尾叶桉U6 4CL基因cDNA克隆及反义表达载体的构建

[目的]为了获得桉树4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)基因,构建植物反义表达载体,研究4CL基因对木质素的调控机理。[方法]从尾叶桉U6幼茎组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到1.4 kb cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy。[结果]测序结果表明,该基因1413 bp,编码471个氨基酸。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121上,构建成4CL反义基因表达载体。通过冻融法将携带反义cDNA的植物表达载体质粒导转入根癌农杆菌EHA105,得到完整的Ti质粒表达载体系统。[结论]为该基因转化桉树的主栽品种尾叶桉U6以降低其木质素含量奠定了基础。     

苎麻品种黑皮蔸染色体核型分析

采用酶解、去壁，低渗法对我国苎麻品种黑皮蔸的体细胞染色体数目和核型进行分析，并对苎麻染色体基数进行了探讨。结果表明，苎麻黑皮蔸体细胞染色体数是28条，核型公式2n=28=28st（2SAT）全为不对称的染色体，臂比值与其染色体数相等，染色体长度比大于2：1，属于4B类核型。     

加大安全技术装备投入 提升企业本质安全水平

提升企业本质安全水平,是企业规避安全风险,实现安全生产的有效方法。而加大安全技术装备的投入是企业提升安全水平的利器和重要保证。本文就企业的本质安全水平的提升进行了探讨,并就加大安全技术装备投入时的重点思路进行了阐述。     

尾叶桉U6遗传转化再生体系的建立

以桉树品种尾叶桉U6叶盘为外植体,选用MS培养基为基本培养基,附加激素6-BA,IAA,IBA,NAAA,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响,建立了较好的遗传转化再生体系.结果表明,尾叶桉U6叶盘最适分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D 1 mg/L IAA 0.2 mg/L 蔗糖30 g/L 琼脂粉5 g/L;小苗的最佳生根培养基为MS NAA 0.2 mg/L mA 0.5 m/L 蔗糖30 g/L 琼脂粉5 g,L.40mg/L卡那霉素可以抑制叶盘的分化;20 mg/L卡那霉素可以抑制再生植株的生根.2种抑菌抗生素中,头孢霉素对叶片再生影响较大;而250 mg/L的羧苄青霉素能有效地抑制农杆菌菌株EHA105的生长,却对尾叶桉叶盘的芽分化影响不大,为适宜的抑菌抗生素.3种农杆菌LBA4404,EHA105,GV3101的菌液浸染桉树叶盘,统计其愈伤组织GUS染色率,以EHA105对外植体的浸染能力最强,达83.3%.     

木薯块根膨大期韧皮部和木质部比较蛋白组学初步研究

以‘华南8号’木薯块根膨大期的韧皮部和木质部为材料,采用改进酚抽法提取总蛋白,进行一维和二维电泳,电泳图谱经Image Master分析,得到差异蛋白点进行质谱鉴定。结果表明:改进酚抽法可以从木薯块根韧皮部和木质部中提取高质量总蛋白,用于蛋白质组学研究;获得分离性好、分辨率及重复性较高的双向电泳图谱;比较木薯块根韧皮部和木质部双向电泳图谱发现265个差异表达蛋白点,其中29个在韧皮部特异表达,17个在木质部特异表达;成功鉴定出8种差异蛋白,这些蛋白主要参与翻译后修饰、无机离子和氨基酸转运代谢、分子伴侣和信号转导等代谢通路。本研究初步比较木薯块根韧皮部和木质部的蛋白表达差异性,为进一步从蛋白质组水平研究木薯块根膨大过程中淀粉转运、积累和合成调控机制奠定了技术基础。     

木薯基因工程育种研究现状与展望

通过基因工程改良木薯遗传性状,使其具有更高的营养价值和经济价值,已成为当今木薯遗传育种研究的热点.重点介绍了近年来基因工程技术在木薯遗传改良中取得的进展,分析了当前存在的问题,展望了未来的发展前景,着重强调了木薯基因工程与国家生物质能源战略的结合.     

黄麻种质资源的鉴定与利用分析

我国保存的黄麻种质资源共10个种。对栽培种种质资源的鉴定表明:根据植株所含色素及形态差异归为40个形态类型;按全生育期长短划分成特早熟、早熟、中熟、晚熟和极晚熟五种生育类型。经过对经济性状、纤维产量、纤维品质、抗病性等主要性状的鉴定、分析和归纳,评选出丰产种质35份。纤维质优种质14份,圆果种对炭疽病具明显抗性种质26份,长果种抗黑点炭疽病种质3份。文中还对各类资源的价值及利用途径进行了分析。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

无患子科树木细子龙营养贮藏蛋白质的分离鉴定

采用光学显微技术、十二烷基磺酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)、免疫印迹和间接免疫荧光定位技术，分离鉴定了无患子科树木细子龙(Amesiodendron chinense)的营养贮藏蛋白质(VSP)。在经汞-溴酚蓝染色的石蜡切片中，观察到枝条、树干和根的次生木质部的木薄壁细胞中有深蓝色颗粒状物质，而在上述枝条、树干和根的次生韧皮部的韧皮薄壁细胞和韧皮射线薄壁细胞中则为均一状的淡蓝色物质。这些被染成不同程度蓝色的物质具有蛋白质性质。SDS—PAGE分析表明，在枝条、树干和根的树皮及木质部中，有2种含量高的蛋白质，其分子质量约23kDa和26kDa。使用荔枝(一种无患子科树木)的22kDa VSP的多克隆抗体对这些部位的树皮和木质部可溶性蛋白质进行免疫印迹分析，在免疫印迹图谱上，该抗血清只识别23kDa和26kDa蛋白质，且23kDa蛋白质谱带颜色较深，说明它们与荔枝的22kDa VSP有一定的同源性。间接免疫荧光定位结果表明，只有颗粒状和均一状蛋白质内含物发出异硫氰酸荧光素特异的蓝绿色荧光，说明23kDa和26kDa蛋白质是这些颗粒均一状内含物的主要成分。树木抽新梢后，这2种蛋白质含量在一定程度上减少。可见，23kDa和26kDa蛋白质符合树木VSP的3条标准，应该是细子龙的VSP。韧皮部和木质部的VSP在形态上的差异可能与蛋白质的种类不同有关。