小反刍兽疫病毒原核表达体外转录系统的建立

构建了小反刍兽疫病毒(PPRV)辅助质粒和微型复制子(minireplicon)并进行功能学研究。RT-PCR克隆PPRV疫苗株N75/1N、P和L基因,亚克隆至有T7启动子的原核表达载体pGEM3Z构建完成3个辅助质粒,分别命名为pGEM3Z-N、pGEM3Z-P和pGEM3Z-L,并通过全基因合成构建含PPRV病毒5′端启动子序列(AGP)、3′端启动子序列(GP)、T7转录终止信号、丁型肝炎病毒核酶序列HamRZ及氯霉素乙酰转移酶(CAT),获得PPRV微型复制子重组质粒pGEM3Z-CAT。构建完成的微型复制子及辅助质粒在表达T7RNA多聚酶(T7RNP)感染痘病毒VTF7-3后,通过脂质体法优化4种质粒配比,并将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光分析CAT的表达情况,荧光显微镜观察到荧光的表达,并通过免疫印迹分析CAT蛋白的表达,表明构建的PPRV微型复制子具有转录和复制功能,这将有助于进一步开展以PPRV反向遗传操作为基础的免疫学及蛋白功能研究。     

小反刍兽疫病毒H蛋白原核表达的研究

小反刍兽疫病毒属副粘病毒科麻疹病毒属,为一不分节段的负链RNA病毒。本研究以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据GenBank下栽的序列及载体的需要设计其主要的抗原基因H基因的编码序列的RT—PCIL扩增引物;然后将扩增基因片段与T载体连接克隆测序,再与原核表达载体pET100／D—TOPO连接、诱导表达。结果显示所设计引物对模极有预期扩增,序列测定表明为正确片段;片段经纯化与表达载体连接,已挑到阳性克隆。H基因的表达菌经IPTG诱导,SDS—PAGE电泳。结果显示：H基因有预期分子量大小的蛋白表达;用Anti—His抗体已检测到相应融合蛋白的表达,其原核表达的相应蛋白抗原性状况正在试验研究中,表达产物具有潜在的诊断抗原和免疫原价值。     

鸡新城疫云南分离株HN基因序列测定和分析

用RT—PCR法对分离自云南省的2株鸡新城疫病毒(编号YN—C1、YN—C2)进行HN基因的扩增和克隆．并对其进行核苷酸序列测定和分析。结果表明：2毒株HN基因开放性阅读框架(ORF)均为l716nt；二者之间的核苷酸同源性为95．3％，氨基酸同源性为95．8％；YN—C1毒株与参考毒株GD／1／98／Go核苷酸、氨基酸同源性均最高，分别为97．9％和97．6％；YN—C2毒株与参考毒株JS／5／01／Go核苷酸同源性最高为98．5％，而与参考毒株JS／3／98／Go氨基酸同源性最高为98．1%。     

鸽源Ⅰ型禽副黏病毒HN基因序列测定和分析

以分离自云南省的一株鸽源禽I型副黏病毒YN-P1株的基因组RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出HN基因片段,然后将其克隆至T载体中。经PCR鉴定后,对阳性克隆进行核苷酸序列测定。测序后拼接得出HN基因的全序列。测序结果显示,YNP1毒株HN基因为1 716 nt。通过与参考毒株比较HN基因序列,发现所研究毒株YN-P1与TW95核苷酸序列同源性最高为88.3％;与ZJ1／Go氨基酸序列同源性最高为91.6％。     

鸭瘟病毒的PCR鉴定及相关序列分析

设计、合成了2对鸭瘟病毒引物，对云南省发现的1例鸭瘟可疑病例(YN-DPV01)进行PCR鉴定，并对其扩增产物进行测序。结果显示，引物对被检测病料的扩增正确；所扩增的片段经序列测定与参考毒株p481的同源性为99．5％。     

浅析大学校园水景空间的五感设计研究——以福建农林大学观音湖景观为例

景观的五感设计是一种全方位体验设计理念。它体现出人性化的景观设计,对于校园水景空间的设计具有指导性意义。文章结合五感设计理论,通过调查福建农林大学观音湖的景观要素,分析它们在五感设计中的体现与不足,并提出优化改造的建议。     

云南奶（水）牛口蹄疫和布氏杆菌病血清学监测及防控措施

本文报告了云南奶（水）牛口蹄疫和布氏杆菌病血清学监测的结果,并在此基础上提出了相应的防控措施。2011年度,云南省现代农业（奶牛）产业技术体系奶牛疫病控制功能实验室在体系所属的2个综合试验站和4个区域推广站各示范场、养殖小区和养殖户采集奶牛、奶水牛血清样品共计311份。应用口蹄疫A型、亚洲Ⅰ型和O型免疫抗体液相阻断ELISA检测方法,检出口蹄疫O型抗体阳性数253份,阳性率81.35%;亚洲Ⅰ型抗体阳性数278份,阳性率89.39%;A型抗体阳性数110份,阳性率35.37%。应用口蹄疫3ABC抗体检测方法检出抗体阳性样品7份,阳性率2.25%。应用IDEXX牛布氏杆菌抗体检测方法检出布氏杆菌抗体阳性样品2份,阳性率0.64%。针对本次获得的口蹄疫和布氏杆菌病血清学监测结果,提出了相应的防控措施,强化奶牛和奶水牛犊牛免疫、跟踪监测和完善生物安全措施。     

新形势下林业科研单位档案管理与发展的研究

随着我国建设步伐加快和林业事业发展及生态环境建设力度加大，林业科研单位档案信息利用需求量明显增大，服务质量要求越来越高，而且档案数量迅速增加，新型载体档案大量涌现，而林业科研单位传统档案管理方式已不能适应和满足新形势下的发展需要，针对这一矛盾和问题，提出应用计算机管理技术对档案进行科学管理，以提高档案管理水平和工作效率及服务质量，实现档案由传统手工管理向现代化管理的转变。通过加强基础工作，实施档案规范化、标准化、科学化管理，提高档案人员综合素质等各项措施，切实保证档案管理现代化目标的实现。并提出利用网络技术、多媒体技术探索档案利用和信息开发的新途径。     

水土保持生态修复的概念、分类与技术方法

水土保持生态修复对于提高土壤肥力、改良土壤结构以及土壤的可持续运用中，均创造了良好的环境并发挥着重要作用。为了给生态系统减少压力，使其呈现健康稳定的状态，对水土保持生态修复的概念、分类与技术方法进行了相关探讨和分析具有重要的意义。