禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定

参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物，经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段，再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后，用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明，融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应，而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。     

猪链球菌2型38 000蛋白主要功能区基因的克隆与表达

根据GenBank中已发表的猪链球菌2型38000蛋白基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用PCR方法,以四川分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增38000蛋白主要功能区基因。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接转化宿主菌DH5α,提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。将目的片段定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、0.8mmol/LIPTG条件下进行诱导表达,结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为35000的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western blotting)证实该重组蛋白可以与猪链球菌2型阳性血清发生特异性反应。     

鸡传染性法氏囊病流行新特点及防治

鸡传染性法氏囊病是鸡的一种病毒性传染病,其病原鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）能破坏鸡的体液免疫中枢器官———法氏囊,造成免疫抑制,影响其它疫苗免疫质量,使鸡极易感染其它疾病。近年来,法氏囊病毒超强毒株（ＶＶＩＢＤ）和血清亚型或变异株的出现使本病的发生和流行更为严重。一九九九年,周口地区发生的传染性法氏囊病与往年相比,发生了显著的变化,主要是由法氏囊病毒变异株引发的传染,现就其发病特点及防治做一介绍：一、发病特点１、多发生于免疫鸡群,病程延长,死亡率降低,发病日龄范围变大。前几年,ＩＢＤ多见于未…     

塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立

为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒无交叉反应;在40℃、20 min内可检测的最低浓度为56拷贝/μL质粒标准品;通过3次重复试验检测,LFD检测线灰度值变异系数范围在4.49%~9.73%。利用该方法对120份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究首次建立了检测SVV的等温、快速RPA-LFD方法,读取结果不依赖任何仪器设备,为猪群感染SVV的现场快速诊断、流行病学研究和根除方案的制定提供帮助。     

河南省种猪场伪狂犬抗体监测分析

对河南省的26个种猪场被监测猪群随机抽样,采用g B-ELISA方法和伪狂犬g E-ELISA方法对1807份样品分别进行了伪狂犬免疫抗体检测和伪狂犬感染抗体检测。伪狂犬免疫抗体平均个体阳性率为94.19%,个体阳性率≥70%为合格,场群合格率为100%;伪狂犬感染抗体阳性场数为17,场群阳性率为65.38%;伪狂犬感染抗体阳性样品数为428,平均个体阳性率为23.69%;伪狂犬感染抗体检测结果阴性为合格,场群合格率为34.62%。并对种猪场伪狂犬流行现状进行了分析,为进一步做好种猪场伪狂犬防控工作提供了参考。     

大豆常见病害的症状识别与防治方法

1大豆根腐病从幼苗到成株期均可发病,主要被害部位为主根,一般初发病斑为褐色至黑褐色小斑点,以后迅速扩大呈梭形、长条形、不规则形大斑。病重时整个主根变为红褐色或黑褐色,皮层腐烂呈溃疡状,病部细缢,有的凹陷,重病株侧根和须根脱落使主根变成秃根。一般根部受害,病株地上部长势很弱,叶片黄而     

猪源沙门菌分离鉴定与耐药性分析

2015年9月和2016年10月,河南省两猪场暴发保育仔猪的急性死亡,为了弄清原因,采集心血、肺脏和肝脏病料,通过常规分离、PCR鉴定、生化试验,分离到2株沙门菌,分别命名为HenanSep1、HenanSq2N。小鼠致病性试验结果显示,每只小鼠接种0.2mL菌液,其浓度为5×10~8 CFU/mL,均导致小鼠发病,但是无死亡。选取21种药物,采用K-B法对2个分离株进行药物敏感性测定。药敏试验结果表明,2株沙门菌对头孢噻呋、氨苄西林、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、磺胺异恶唑、氯霉素、恩诺沙星耐药,对美罗培南、亚胺培南、氨曲南、多黏菌素B、土霉素敏感,对其他药物敏感性不同。研究结果为猪沙门菌病临床诊断与防治提供了重要依据。     

羊免疫布鲁菌病疫苗(S2株)免疫抗体长期监测结果的试验

为探究羊经布鲁菌病疫苗(S2株)免疫后的血清抗体长期动态消长规律,本试验于2012年9月-2015年9月选取阿拉善盟阿拉善左旗96只山羊、100只绵羊作为试验动物,经布鲁菌疫苗(S2株)100亿CFU、200亿CFU不同免疫剂量灌服,分别于免疫前和免疫后不同时间段采血分离血清,应用虎红平板凝集试验和试管凝集试验进行抗体监测。结果表明,绵羊组在一免后20d时,血清抗体阳性率达到最高峰,之后呈下降趋势,150d抗体阳性率降至0%,免疫后180d^360d,绵羊组抗体阳性率一直处于较低水平(0%~4%),二免和三免后不同时间段免疫抗体消长规律与首次免疫基本一致;山羊组抗体阳性率在免疫后20 d时,血清抗体阳性率达到最高峰,之后呈下降趋势,免疫后90 d^360 d,免疫抗体时高时低,起伏较大,无明显规律,二免和三免后不同时间段免疫抗体消长规律与首次免疫基本一致,结果同时表明,100亿CFU和200亿CFU两个免疫剂量组的抗体阳性率无明显差异。     

鸡传染性法氏囊病发生与其日龄关系

为探讨鸡传染性法氏囊病发生与其日龄的关系,我们在１９９５年～１９９７年期间,按来我院就诊时病鸡的日龄为发病日龄。对来自牡丹江市内及外县、镇、村等养鸡场和养鸡户送检来的肉鸡三个品种（ＡＡ、哈伯德、艾维茵）蛋鸡五个品种（罗曼、海赛褐、哥伦比亚、金慧星、宝...     

猪败血性链球菌病诊治

猪败血性链球菌病诊治李正欣赵恒昌猪链球菌病临床上常见的是局部淋巴结脓肿，但以败血性链球菌危害最大。如不及时诊治能引起猪急性死亡，现将一起猪败血性链球菌病诊治介绍如下：１发病情况润州象山七一农技站猪场饲养的１３８头（多为架子猪）猪，１９９６年９月２４日...