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根据鸡的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)基因序列进行抗原肽分析,选择含大片段抗原表位区约1 500 bp的一段基因(15~1 515 bp)设计一对特异性引物后进行RT-PCR扩增,并构建pET-32a(+)-PERK重组质粒,将其转化至BL21(DE3)感受态细胞中.优化诱导表达条件,纯化重组蛋白后免疫兔并制备多克隆抗体.PCR鉴定、酶切鉴定和测序结果表明,pET-32a(+)-PERK重组质粒构建成功.SDS-PAGE电泳鉴定结果表明,重组蛋白在1.0 mmol·L-1IPTG、25℃下诱导9 h时的表达量最大.蛋白纯化结果表明,100 mmol·L-1咪唑洗脱液可较好地洗脱重组蛋白,获得较多的纯化蛋白.免疫结束后,抗体效价检测结果表明,制备的多克隆抗体效价达1∶32 000,可以与重组蛋白特异结合. 相似文献
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本试验旨在研究发酵豆粕对黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道黏膜免疫功能及微生物菌群的影响。选取1日龄黄羽肉鸡250羽,随机分为5个组(每组设5个重复,每个重复10羽):Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮;Ⅱ组为抗生素对照组,在基础饲粮中添加15%杆菌肽锌200 mg/kg和10%硫酸粘杆菌素60 mg/kg;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组,在基础饲粮中分别用3%、6%、9%的发酵豆粕替代部分普通豆粕,试验期28 d。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅳ、Ⅴ组体增重分别显著提高了3.87%、4.38%(P<0.05);Ⅳ、Ⅴ组料重比分别降低了4.57%(P>0.05)、5.71%(P<0.05);Ⅴ组成活率极显著提高了6.38%(P<0.01)。2)Ⅱ、Ⅴ组血清碱性磷酸酶活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅰ组血清尿酸含量最高,显著高于Ⅴ组(P<0.05),但与其他各组差异不显著(P>0.05)。3)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组十二指肠绒毛高度均极显著高于Ⅰ组(P<0.01),其中Ⅴ组最高;Ⅴ组肥大细胞数量最低,极显著低于Ⅰ组(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分泌型免疫球蛋白A(sIgA)阳性细胞数量极显著高于Ⅰ组(P<0.01),其中Ⅴ组最高。4)Ⅱ、Ⅴ组大肠杆菌数量显著低于Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组(P<0.05),Ⅴ组乳酸菌数量显著高于Ⅰ组(P<0.05)。可见,在黄羽肉鸡生长前期用9%发酵豆粕替代部分普通豆粕能够提高体增重,改善料重比,提高血清中碱性磷酸酶活性并降低尿酸含量,同时提高十二指肠绒毛高度,稳定肥大细胞和sIgA阳性细胞数量,增强肠道黏膜免疫功能,并降低盲肠大肠杆菌数量,增加乳酸菌数量,改善肠道微环境。 相似文献
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凝结芽孢杆菌对黄羽肉鸡生产性能、血清生化指标及抗氧化功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究凝结芽孢杆菌对黄羽肉鸡生产性能、血清生化指标及抗氧化功能的影响。选取1日龄黄羽肉鸡360羽,随机分为4组(每组6个重复,每重复15羽):Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲喂分别添加100、200、300 mg/kg凝结芽孢杆菌(活菌数为1×109CFU/g)的试验饲粮,试验期70 d。结果表明:与对照组相比,1)饲粮添加200 mg/kg凝结芽孢杆菌显著提高了全期肉鸡平均日增重、成活率和胸肌率(P<0.05),显著降低了全期料重比(P<0.05);2)饲粮添加200 mg/kg凝结芽孢杆菌显著或极显著提高了28、70日龄肉鸡血清碱性磷酸酶活性(P<0.05或P<0.01)、70日龄血清白蛋白和总蛋白含量(P<0.05),极显著降低了70日龄血清尿素氮含量(P<0.01);3)饲粮添加200 mg/kg凝结芽孢杆菌显著提高了肉鸡28、70日龄血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和70日龄血清过氧化氢酶活性(P<0.05),极显著或显著降低了28、70日龄血清丙二醛含量(P<0.01或P<0.05)。由此可见,结合生产性能、血清生化指标及抗氧化功能指标,1~70日龄黄羽肉鸡饲粮添加200 mg/kg(2×108CFU/kg)凝结芽孢杆菌效果最佳。 相似文献
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组织芯片在科学研究、临床诊断上的应用已较为广泛,近年来也逐步被应用到医学形态学教学,但是在动物形态学上的研究和应用并不多见.本文采用组织芯片技术,制备畜牧生产上常见的三种动物(猪、鸡、鸭)全身组织器官的组织芯片,并运用到动物形态学实验教学中,与传统切片的教学方法进行比较、分析.制备的鸡组织芯片涵盖了11种器官,鸭组织芯片涵盖了13种器官,猪组织芯片涵盖了14种器官.3种动物组织芯片在动物形态学实验教学上的应用结果表明,组织芯片可以大大节省学生更换切片的时间,增加各器官的对比观察,提高教学效果. 相似文献
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绿汁发酵液、纤维素酶及其混合物对水葫芦青贮品质的影响 总被引:4,自引:1,他引:3
为探明添加绿汁发酵液(FGJ)、纤维素酶(CEL)、绿汁发酵液+纤维素酶(MIX)以及原料含水率对水葫芦青贮发酵品质的影响,用2种不同含水率(高:70.58%,低:39.62%)的水葫芦进行青贮,常温下贮存40d,开封后测定青贮的发酵品质和化学成分。结果表明:FGJ和MIX能显著改善2种含水率水葫芦青贮的发酵品质,CEL能有效提高2种含水率水葫芦青贮的WSC存留量;降低原料的含水率能提高青贮的WSC含量和减少气体的损失。 相似文献
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采用分子克隆技术对鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白基因进行克隆,同时运用多种生物学软件对该基因进行结构和生物学功能预测和分析.结果表明,本试验成功克隆了DTMUV LH株E蛋白基因,该基因包含一个1 500 bp的开放阅读框,编码500个氨基酸.遗传进化树分析表明,该蛋白与我国其他省份分离株的同源性很高.该蛋白的分子质量为54.3 ku,等电点为7.63,不存在信号肽序列,含有17个糖基化位点,有13个丝氨酸、4个络氨酸和8个苏氨酸的磷酸化位点.该蛋白存在跨膜区域,为亲水性蛋白.抗原位点分析表明,该蛋白有21个抗原肽段.本试验结果为E蛋白的生物学功能和致病机理的研究奠定重要的分子理论基础. 相似文献
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选取传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒力代表株BC6/85和弱毒力代表株B87为研究对象,根据VP2基因保守区设计一对通用引物和两个限制性内切酶位点,分别扩增两个毒株的VP2基因,然后进行BamHⅠ和PstⅠ酶切,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)分析酶切产物,并进行特异性、敏感性和重复性检测.结果表明:所设计的引物均可扩增两个毒株的VP2基因,大小约856 bp;经BamHⅠ和PstⅠ酶切后,BC6/85株的PCR产物被BamHⅠ和PstⅠ切出166、242和449 bp大小的3个片段,而B87株仅被PstⅠ切出242和615 bp大小的2个片段,且重复性好,特异性强.可见,采用PCR-RFLP分析IBDV VP2基因的方法操作简单,是一种能够快速鉴别IBDV强、弱毒株的可靠方法. 相似文献