水牛Follistatin cDNA克隆及序列分析

卵泡抑索（Follistatin,FS）可通过旁分泌和自分泌的方式抑制促卵泡素（FSH）的分泌,从而影响动物的繁殖机能。本研究拟通过分析水牛的FS cDNA序列来分析其繁殖性能低的可能原因。试验参照GenBank公布的奶牛的FS cDNA序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增目的基因,再将其亚克隆到pMD-18T克隆载体进行测序。测序结果显示本试验成功获得了水牛的FS cDNA序列。同源性及进化树分析提示FS在哺乳动物进化上高度保守。研究发现两处氨基酸的突变,这可能影响FS正常的生物学功能发挥,从而影响水牛的繁殖机能。     

水牛唾液蛋白组学研究进展

唾液具有溶菌、消化和滋润口腔等多种生物学功能,唾液中含有各种酶类,唾液是一种非损伤性的体液,作为研究材料被应用。唾液蛋白质组学研究也成为现代组学研究的热点内容。本文对唾液的收集方法、组学研究方面的应用、疾病方面、生物标记,特别是对水牛唾液蛋白组学方面的研究进行了综述,旨在为今后其他物种唾液蛋白质组学方面的研究奠定基础。     

罗氏沼虾不同群体线粒体16SrRNA基因的序列变异及其保守性分析

利用PCR技术扩增获得罗氏沼虾广西养殖群体、江苏养殖群体和缅甸原种F13个不同群体共15个个体的线粒体16SrRNA基因片段,测定序列并进行序列同源性比较。结果显示,在得到的401bp长度的基因片段中,3个群体所有个体的核苷酸序列完全一致,序列同源性为100%,该基因在群体内或不同群体间均不存在遗传差异。表明罗氏沼虾的16SrRNA基因是比较保守的序列,在不同群体间的分化程度很低。     

甘薯淀粉白度的研究

用石灰水调整磨浆液ｐＨ值至７．５～８．５，（３０００－４０００ｒ／ｍｉｎ）离心分离和沉淀，能有效改善甘薯淀粉白度。     

北海文昌鱼雌鱼群体性腺发育的周年变化

【目的】了解广西北海海区文昌鱼雌鱼繁殖群体性腺发育的周年变化规律。【方法】对广西北海海区文昌鱼进行连续3年的跟踪采样和观测,分别测定北海文昌雌鱼群体的体重、体长和性腺大小,计算成熟系数（GSI）,并对雌鱼性腺组织切片进行显微连续观察,分析北海文昌雌鱼繁殖群体的性腺发育规律及产卵繁殖特点。【结果】北海海区雌性文吕鱼的繁殖季节从每年3月下旬开始,5-6月为繁育盛期,至7月底繁殖基本结束;在繁殖习性上,北海文昌鱼属于一年一次成熟产卵类型,一生可多次成熟产卵;在非繁育期间,北海文昌雌鱼繁殖群体中的个体性腺发育程度差异较大,存在明显不同步现象,但在繁育高峰期内个体间在较短时间内能基本趋于集中同步成熟;北海文昌雌鱼群体的个体GSI与其体重呈正相关。【结论】北海文昌雌鱼的繁育盛期为5～6月,属于一年一次成熟产卵类型,为今后开展天然海区北海文昌鱼的资源保护和人工繁殖研究奠定了基础。     

广西眼镜蛇遗传多样性RAPD分析

对广西眼镜蛇的血液基因组进行RAPD扩增,从30条随机引物中筛选出18条可扩增出清晰多态条带的引物。结果表明,18条随机引物共产生了257个位点,其中多态性位点152个,多态率为59.1%;个体间的平均遗传相似系数为0.8186;个体间平均遗传距离为0.1814,群体Shannon信息指数为0.3170;Nei’s基因多样性指数为0.2112;等位基因观察数为1.3563;有效等位基因数为1.5914。表明广西眼镜蛇具有较强的遗传多样性。     

广西水牛ghrelin cDNA的克隆及序列分析

[目的]克隆广西水牛ghrelin的cDNA并对其进行序列分析。[方法]以广西沼泽型水牛的真胃底组织总RNA为模板,用特异性引物扩增ghrelin的cDNA。扩增产物经凝胶回收纯化后与pMD 18-T连接并转化大肠杆菌DH5d,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经5×1ml LB液体培养基培养鉴定后测序。[结果]成功获得了广西水牛ghrelin的cDNA,该片段长339bp,编码113个氨基酸。BLAST分析结果表明,该片段与黄牛前原ghrelin基因仅有6个碱基的差异,同源性为98．2％;而两者ghrelin均由27个氨基酸组成,序列同源性为1013％。[结论]为进一步研究ghrelin基因的生物学功能提了供理论基础。     

广西沼泽型水牛IL-1β基因的克隆及在发情周期内水平动态变化

白介素-1(IL-1)具有广泛的免疫调节作用,并有致热和介导炎症的作用,它有两个亚型:IL-1α和IL-1β.在动物繁殖领域里,很多研究显示IL-1直接或间接参与调节卵母细胞的成熟和排卵.     

广西水牛唾液和血清生殖激素在发情周期的变化规律及相关性分析

[目的]对广西水牛发情周期唾液和血液中雌激素(E2)和孕酮(P4)的浓度变化规律及相关性进行了分析,为进一步探讨水牛发情规律来指导生产提供依据。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定发情母水牛血液和唾液中E2(雌二醇)和P4(孕酮)的浓度变化,并对血液和唾液的激素变化规律进行了相关性分析。[结果]广西水牛血液和唾液中的E2和P4呈波动性变化,结果表明,发情前期,唾液中P4浓度一直维持在6.57.1ng/mL,第13天达到11.09ng/mL以上,随后快速下降。唾液中E2浓度在发情前期第35天出现一个峰值178.528pg/mL,在1417d唾液中E2浓度显著升高,出现第二个峰值达到120.57pg/mL。唾液E2和P4浓度的变化趋势和血清E2和P4浓度的变化趋势基本一致,相关性较好。母水牛唾液和血清样品的P4浓度相关性显著(R=0.4080;P0.05),母水牛唾液和血清标本的E2浓度相关性显著(R=0.5113;P0.05)母水牛唾液E2和P4浓度相关性非常显著(R=0.7754;P0.01)。[结论]唾液和血液中的这两种激素水平起伏变化基本趋于一致,其相关性显著,可以作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

三个群体罗氏沼虾线粒体COI基因的遗传多样性分析

运用PCR方法,扩增罗氏沼虾缅甸原种F1代、广西选育群体和江苏养殖群体的线粒体DNA上的细胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase subunit I,COI)基因,在此基础上选用10种限制性内切酶对扩增产物进行限制性片段长度多态(RFLP)分析。三个群体共发现2个多态位点,11种酶切图谱,3种基因型。三群体的多态座位比例、平均杂合度和基因型多样性指数分别为:缅甸原种F122.2%、0.0556、0.0472,广西选育群体22.2%、0.0400、0.0398,江苏养殖群体11.1%、0.0106和0.0083,群体间遗传差异未见显著。根据群体间遗传距离构建UPGMA聚类关系图,显示广西选育群体和江苏养殖群体间的遗传关系较近,而与原种F1群体的遗传关系较远。