检验检疫新技术研究进展

最近几年才兴起的生物芯片、核酸序列依赖性扩增法（NASBA）及荧光定量PCR技术同传统的实验方法相比有灵敏性高。特异性强，快速，高通量等优点，而倍受中外学者的青睐。但仍有好多初学者对这方法的知识了解甚少，为了解决这一问题．本文就从生物芯片、核酸序列依赖性扩增法及荧光定量PCR的定义、原理、检测中的应用和各自的优点做一简单的综述，以便相互之间的学习和进步。     

中非陆龟的健康养殖技术

<正>中非陆龟在淡水龟鳖类中属大型龟,也是近些年从国外引进龟类中性情较温和、植食性为主、生长较快、很有养殖前景的龟种。1名称、分类地位及分布1.1名称中非陆龟是该龟的中文名称,拉丁文名为Geochelone suicata,别名苏卡达陆龟。1.2分类隶属于陆龟科。1.3分布及保护级别苏丹、尼日尔、马里和中非(自毛里塔尼亚、塞内加尔到埃塞俄比亚)。属CITES附录Ⅱ级保护     

辽西半干旱区不同玉米间作花生模式对作物产量和水分利用效率的影响

为挖掘玉米间作花生模式的生产潜力和资源利用效率,2019年在辽宁省阜新蒙古族自治县阜新镇设置了玉米间作花生2:4(M2P4)、8:8(M8P8)和玉米单作(SM)、花生单作(SP)4种种植模式,对比分析了不同处理的作物产量构成因素、土地当量比(LER)及水分利用当量比(WER),以期为筛选出适宜在辽西旱作农业区应用的玉...     

辽宁省彰武县甘薯品种引进筛选试验

[目的]选出较适宜彰武县种植的甘薯品种。【方法】对引进的10个甘薯品种进行筛选试验研究,比较其特征特性及鲜薯产量。[结果]辽薯26、龙薯9号、商薯19、明水一号,薯块均匀、薯型适中,且皮色、肉色为大众偏好,有利于生产和销售;红香蕉、济薯21为市场短缺品种,有一定发展潜力;龙薯9号、辽薯26、红香蕉、济薯21、早丰、商薯19、王府等品种的鲜薯产量比对照增产11．0％～44．5％,差异达显著水平。[结论】辽薯26、龙薯9号、商薯19、红香蕉、济薯21等品种表现较好,生长势好,大、中薯比例适中,外观质量好,产量高,品质好,可作为彰武县今后的主推品种.     

不同营养液浓度及施肥方法对烤烟漂浮苗生长的影响

为了阐明壮苗培育与营养液浓度及施肥方法的关系,以K326为试验材料,研究了不同营养液浓度及施肥时间和次数对烟苗生长的影响。结果表明:在小十字期时施第1次肥料,对烟苗生长最为有利;在一定范围内,随着营养液浓度及施肥次数的增加,烟苗的株高、茎围和鲜重呈增大趋势;采用氮素浓度为600 mg/kg的营养液施肥2次,烟苗6叶1心时的株高和茎围都可达到壮苗要求,并且可减少水生根生长。     

基于碳足迹视角的湖北省蔬菜生产可持续发展探讨

在温室气体的累积排放导致全球增温趋势明显,人类生存面临挑战的气候环境条件下,研究蔬菜生产碳足迹,对于控制蔬菜生产温室气体排放,缓解气候变化与蔬菜生产可持续发展的矛盾具有积极意义。基于IPCC国家温室气体清单指南,运用过程生命周期评价法、动态评估及多元回归分析,对湖北省2003-2013年蔬菜生产系统碳足迹进行了核算。结果表明,湖北省蔬菜生产系统碳足迹由2003年的116.05万t CE增长到2013年的142.81万t CE,增加了23.06%。各生产投入品温室气体排放碳足迹排在前3位的为肥料、农药和排灌电能,分别占总排放碳足迹的58.07%、18.47%、9.03%。2003-2013年土地利用碳强度保持在0.97-1.29 t CE/hm2;单位产量碳强度从2003年的37.06 kg CE/t提高到39.91 kg CE/t,收益碳强度从2003年的0.10 kg CE/元降低到2013年的0.02 kg CE/元;碳生态效率从2003年的1.87降低到2013年的1.73。多元回归分析表明,湖北省蔬菜生产系统温室气体排放碳足迹与肥料用量、农药使用量、排灌电能三者间存在显著的线性相关,其相关性分别为0.571、0.341和0.228。根据分析结果,提出了强化科学施肥力度,提高土地规模化经营水平;推广生物防治,建设绿色防控体系;推广节水灌溉技术等可显著减少温室气体排放的策略。     

BVDV-1型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

【目的】建立特异针对牛病毒性腹泻病毒基因1型(BVDV-1)的实时荧光定量RT-PCR检测方法。【方法】通过比对分析近5年流行的BVDV-1毒株全基因序列,基于保守序列5′-UTR设计特异性引物和探针,优化反应体系和反应条件,并进行特异性、敏感性、重复性及临床样品检测试验。【结果】BVDV-1检测的最佳探针浓度为0.25μmol/L,引物浓度为0.60μmol/L,对阳性质粒标准品的最低检测限为1.7 copies/μL。特异性试验显示：建立的方法仅能特异性扩增BVDV-1,对蓝舌病、口蹄疫、水泡性口炎、小反刍兽疫和猪瘟等病毒不发生交叉反应,特异性良好,变异系数小于1%。采用建立的方法对172份临床血液样本进行BVDV核酸检测,结果检出BVDV阳性样本33份,阳性率为19.19%,与《牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范》(GB/T 18637—2018)中实时荧光定量RT-PCR检测结果一致。【结论】本研究建立的BVDV基因1型实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于临床样本的检测,为BVDV-1的检测及监测提供了有力的技术手段。     

赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达

为获得赤羽病病毒(Akabane virus，AKAV)的核蛋白重组抗原，根据其基因序列(S mRNA)设计合成了1对特异性引物，对AKAV N基因进行RT-PCR扩增，产物大小约为696bp，回收纯化后，将其克隆至pMDl8-T质粒栽体中，经核苷酸序列分析，与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的S mRNA基因比较后发现，所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达98．3％，推测的氨基酸同源性为97．6％，证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD／Thio TOPO表达栽体，转化TOPl0细胞，成功地构建了AKAV N基因重组表达栽体。经L-araboinose诱导表达，可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白，分子质量约42．5ku，其表达产量约占茵体总蛋白的28％，融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原，可作为ELISA包被抗原。