猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2融合基因在重组杆状病毒中的表达

将猪细小病毒分离株LJL12 VP2基因和猪瘟病毒多肽基因E290克隆至真核表达载体pMel Ba-cA,将该重组质粒与Bac-N-Blue DNA共转染昆虫细胞,并对表达产物进行分析,构建了表达猪瘟病毒T细胞表位和猪细小病毒VP2融合蛋白的重组杆状病毒。结果显示,获得了含VP2基因和E290基因的重组质粒pM-VP2-E290,昆虫细胞sf9的表达产物经SDS-PAGE、Western-blot检测后确定所表达的蛋白质分子质量大小约为67 ku,且具有天然蛋白的抗原特性。免疫电镜观察可见表达产物形成的病毒样颗粒。证实,成功构建了同时含有PPV VP2基因和CSFV特异性T细胞表位基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到了高效表达。     

猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒双重TaqMan qRT-PCR检测方法的建立与初步应用

为建立可同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪丁型冠状病毒(PDCoV)的双重TaqMan qRT-PCR方法,本研究根据GenBank中的PEDV M基因及PDCoV N基因设计了两对特异性引物和探针,构建重组质粒作为标准品,绘制标准曲线,建立其检测方法,结果显示,根据两种病毒质粒标准品构建的标准曲线的相关系数(R...     

猪场常见消毒药对非洲猪瘟病毒的消毒效果

为做好非洲猪瘟（ASF）防控，保障猪场生物安全措施的有效实施，通过查阅文献分析了多种猪场常见消毒药（火碱、酸、过硫酸氢钾、卤素类和醛类）的特点及使用方法，综述了其对非洲猪瘟病毒（ASFV）的杀灭效果。结果显示：在22℃时，1.0%和0.5%的火碱溶液可将ASFV杀灭；800倍稀释的二氯异氰尿酸钠溶液可在0.5 h杀灭ASFV;1.0%的柠檬酸能够将ASFV减少4个对数单位以上；3.0%的醋酸以及0.1%、0.5%和1.0%的戊二醛溶液均对ASFV有杀灭效果。综上，推荐火碱（0.5%）或二氯异氰尿酸钠（稀释度1:800）用于环境消毒，戊二醛（0.1%～1.0%）用于带猪消毒。本文通过综述猪场常用消毒药对ASFV的消杀效果，为猪场消毒药的选择和使用提供指导，以助于猪场的ASF防控。     

枣粉饲料的营养价值及其在动物生产中的应用北大核心

红枣口味甘甜,营养价值丰富,可作为非常规饲料在动物生产中应用。但是红枣鲜果的含水量较高,需要进行一定处理才可作为饲粮使用。制作成枣粉饲料是提高红枣利用效果的方式之一。文章主要综述了我国红枣资源现状、红枣的营养成分、枣粉饲料的种类及其在动物生产中的应用和问题,为枣粉作为非常规饲料在动物生产中的应用提供参考。     

携带BCoV抗原表位的乙型肝炎病毒核心抗原病毒样颗粒的制备及免疫效果评价

为了制备可用于牛冠状病毒(BCoV)亚单位疫苗的含BCoV S蛋白抗原表位的病毒样颗粒(VLP)，本研究将BCoV S1和S2蛋白中含B细胞表位的aa351～aa403 (159 bp)和aa771～aa784 (42 bp)对应的密码子按大肠杆菌偏好性原则优化后插入乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)主要免疫显性区域(MIR)，合成该重组基因后克隆至pET-32a(+)，经酶切鉴定显示正确构建了重组质粒pET-32a(+)-HBcAg-BCoV S1+S2。将该重组质粒分别转化E.coli BL21(DE3)和伴侣感受态细胞BL21(DE3)(含pG-KJE8分子伴侣质粒)，经诱导表达后采用镍柱亲和层析法纯化两种不同表达形式的重组蛋白，SDS-PAGE检测重组蛋白的表达及纯化效果，结果显示两种表达系统均正确表达了重组蛋白，分别命名为VLP-A、VLP-B，前者为包涵体表达，后者为可溶性表达。纯化后浓度分别为0.9 mg/mL、1.4 mg/m L。利用透射电镜观察纯化后的两种重组蛋白是否形成VLP，结果显示二者均形成VLP，且可溶性表达的重组蛋白形成的VLP产量略高。将两种VLP乳化后...     

基于 ASFV EP402R 编码蛋白 CD2v 的生物信息学分析

为深入了解非洲猪瘟病毒（ASFV）的EP402R编码蛋白CD2v结构与功能的关系和病毒-宿主作用机制，本研究通过在线工具对Pig/HLJ/2018中国分离株CD2v蛋白进行了遗传进化和生物信息学分析。结果显示：Pig/HLJ/2018株与格鲁吉亚Georgia 2007、Georgia 2008以及其他中国毒株处于同一分支，基因型同为Ⅱ型；同一基因型CD2v蛋白氨基酸序列一致性高达100%，不同基因型间蛋白氨基酸序列表现出差异，氨基酸一致性在76.8%～81.7%之间；该CD2v蛋白表达的蛋白大小为41.008 89 kD；蛋白结构主要以无规卷曲为主；存在信号肽和跨膜区；存在4个优势B细胞表位和5个T细胞表位。结果表明：当前中国流行株为基因Ⅱ型；CD2v蛋白在ASFV入侵机体、免疫逃逸等过程中扮演重要角色，为ASFV的深入研究和ASF的防治奠定了基础。     

鲜蛋白桑替代部分进口苜蓿饲喂奶牛效果研究

为研究用鲜蛋白桑替代部分进口苜蓿饲喂奶牛的效果，选择产奶量水平接近的2个高产奶牛群，剔除其中不健康的奶牛。随机选择其中一群为对照组，另一群为试验组，根据等干物质原则用3.5 kg鲜蛋白桑替代替代对照组高产基础日粮中的1 kg进口苜蓿，TMR全混合日粮饲喂，试验期35 d。每天早中晚饲喂3次，每天挤奶2次，自由饮水。结果表明：在夏季热应激初期奶牛日粮用3.5 kg鲜蛋白桑替代1 kg进口苜蓿，奶牛干物质采食量提高1.71 kg/头·d，提高了7.35%|产奶量提高1.1 kg/头·d，提高了3.53%，乳中体细胞数显著降低（P < 0.05），由24.80万/mL降到7.87万/mL，降低了68.27%，但对乳品质其他指标及血液抗氧化指标影响不显著，经济效益分析最终每头牛每天增加收益0.85元。在本试验条件下，综合考虑产奶量、乳品质、抗氧化性能及经济效益，用3.5 kg鲜蛋白桑替代1 kg进口苜蓿饲喂奶牛，可以达到节本增效的效果。 [关键词] 鲜蛋白桑|进口苜蓿|奶牛