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本研究旨在分析产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)后,在感染初期细胞内长链非编码RNA (long non coding RNA,lncRNA)的表达谱变化,探究lncRNA在ETEC感染初期所起到的调控作用。使用ETEC F41感染IPEC-J2,在感染前和感染初期(感染后4 h)收集细胞,通过Illumina Hiseq Xten平台进行高通量测序,共发现lncRNA 9 975条。感染初期与感染前相比,共发现100条差异表达lncRNA,其中40条表达上调,60条表达下调。通过miRanda-3.3a和psRobot_v1.2软件共同预测差异表达lncRNA的靶基因,并对差异表达lncRNA的靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果显示,感染初期差异表达lncRNA的靶基因显著富集于细胞核、核仁、代谢过程调控及发育过程等GO功能条目中。KEGG分析表明,感染初期差异表达lncRNA的靶基因主要富集在PI3K-Akt信号通路、肌动蛋白细胞骨架调节、黏附斑及细胞周期等信号通路。利用实时荧光定量PCR随机验证了5条差异表达lncRNA,结果与测序分析中表达变化趋势一致。本研究对ETEC感染IPEC-J2细胞初期的lncRNA表达谱进行了差异分析,为深入探究lncRNA在ETEC感染初期中的作用机制提供了参考依据。 相似文献
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牛病毒性腹泻/黏膜病病毒河北分离株的生物学特性 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】了解牛病毒性腹泻病毒河北分离株HB株的特性,阐明牛病毒性腹泻/黏膜病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据特进行此项试验;【方法】用理化学及生物学方法对BVDV河北分离毒株HB的特性进行检测,与BVDV准毒株Oregon C24V株进行比较,分析了其理化性及生物学特性。电镜负染检查可见直径为40~60nm有突起的圆形或近圆形的病毒颗粒,病毒在蔗糖中的浮密度为1.13~1.14g/cm3。与牛病毒性腹泻-粘膜病病毒颗粒相似。毒力测定TCID50为10-4.5。理化学研究表明,该病毒对氯仿、乙醚、胰酶敏感;不耐酸、对碱具有较强的耐受性。牛病毒性腹泻/黏膜病病毒对56℃ 30min较敏感,56℃ 70min可使其完全灭活。血凝试验表明,该病毒对鸡、兔、猪和绵羊的红细胞均无血凝性;5-碘脱氧尿核苷(5,-IUDR)不能抑制病毒的增殖,核酸分型试验表明该病毒株基因组为RNA;病毒纯化后经SDS—PAGE电泳出现了5条主要结构蛋白带,与BVDV国际标准毒株Oregon C24V株结果一致;【结论】河北分离株HB株为牛病毒性腹泻病毒。 相似文献
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摘要:纯化的重组子pM-VP2-E290阳性质粒,与Bac-N-Blue DNA共转染昆虫细胞sf9,通过同源重组,形成具有感染活性的重组杆状病毒,并利用重组病毒的LacZ表型进行噬斑纯化。纯化后的高效价重组杆状病毒在昆虫细胞中进行表达,表达产物应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western-blot)和免疫酶斑点技术(Dot-ELISA)进行分析,确定所表达的蛋白分子量大小约为67KD,且具有天然蛋白的抗原特异性。应用免疫电镜对表达产物进行观察,可见到细小病毒样颗粒。病毒样颗粒在无免疫佐剂参与的情况下,免疫6-8周龄的BALB/c小鼠,同时设PPV的灭活疫苗免疫组及PBS接种组作为参比对照,检测小鼠的细胞免疫和体液免疫学指标。结果表明,表达蛋白所形成的细小病毒样颗粒,不仅能诱导小鼠机体产生抗CSFV的特异性CTL反应,还能刺激小鼠产生高效价的抗PPV的特异性抗体。而且机体所产生的抗体效价显著高于灭活疫苗对照组。 相似文献
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牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病病原,高度变异且传染性极强.牛感染该病毒后发病较为突然,能够引起腹泻呕吐等临床症状,一般情况下诺如病毒较为温和但是在暴发时感染率可达45%以上,甚至引起出血性的死亡,给养牛业造成经济损失.因此,建立一种特异性强、灵敏度高、耗时短的检测方法对准确检测BNoV及其流行病学调查等均具有重要意义.实时荧光定量PCR方法敏感而快捷,操作简便,因此荧光定量PCR技术被广泛应用于兽医学的检测.本研究设计了一对BNoV的特异性引物和探针,建立了TaqMan荧光定量PCR的检测方法,为快速检测和及早诊断BNoV提供有效的技术保障. 相似文献
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从保定市不同鸡场疑似大肠杆菌病的病鸡中,分离到致病性大肠杆菌54株,对此54株大肠杆菌进行血清型鉴定,除了6株未能定型外,其余分离株的O血清型共有8个,分别为O1、O2、O5、O18、O78、O26、O76和O88,其中O78、O26、O1为主要血清型,分别占鉴定菌株的39.6%、27.1%和16.7%。用20种临床常用的抗菌药物对分离菌株进行药物敏感性试验,结果表明,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中氨苄青霉素和四环素的耐药率最高,其次为阿莫西林。大多数为多重联合耐药;而阿米卡星、头孢噻呋和头孢噻吩的敏感率较高,其中以头孢噻呋(94.5%)最敏感。 相似文献
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