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111.
为了研究表达H5N1亚型禽流感病毒NA基因重组腺病毒pAdN1的遗传稳定性及重组病毒的滴度,将重组腺病毒pAdN1在293细胞上连续传代20次,取第5、10、15、20代的重组病毒,采用PCR 方法扩增禽流感病毒NA基因,并进行基因序列分析;用绿色荧光蛋白做标记计算出20代次时重组病毒的滴度.结果显示:从各代重组病毒DNA 中均扩增出了约1 400 bp的目的条带,序列分析结果表明,第5、10、15代重组病毒中的NA基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有2处发生了点突变(516位A→G,1 323位T→C),但其编码的氨基酸未发生变化,即蛋白抗原表位未发生变化;采用快速测定法计算出重组腺病毒的滴度为109.5 pfu/mL. 相似文献
112.
笔者于2004年9月至2005年7月从豫北地区采集病料,通过对所采集的88份样品进行分离鉴定,最终确定出该地区主要的血清型是O1、O2、O78、O111。1材料与方法1.1材料1.1.1标准菌株购自中国兽医药品监察所。1.1.2病料采集于新乡市畜牧兽医工作站,河南科技学院兽医院等的病鸡中共采集到88份样本。1.1.3培养基三糖铁琼脂,购自北京奥博星生物技术责任有限公司;麦康凯琼脂,购自北京双旋微生物培养基制品厂;伊红美蓝琼脂,购自杭州微生物试剂厂;邓亨氏蛋白胨水溶液、葡萄糖蛋白胨水溶液,Simmons氏固体柠檬酸盐等培养基均按常规方法制备。1.1.4生化试剂… 相似文献
113.
研究了可溶性干酒糟(DDS)作为饲料原料对生长育肥猪生长性能的影响。选用72头健康体重约70 kg的三元育肥猪,随机分成2个处理组,每个处理组2个重复,每个重复18头猪,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂含40%DDS的试验日粮,试验正式期20 d。结果显示,与对照组相比,试验组育肥猪的平均日增重、平均采食量和料肉比方面无明显差异(P>0.05),从经济效益分析来看,与对照组相比,试验组猪在日采食成本和日增重成本方面分别下降了1.41元/kg和1.50元/kg,整个育肥周期每头猪可多获利约75元。试验证实在生长育肥猪的日粮中添加DDS能够完全满足育肥猪的生长需要,并可降低养殖成本,进一步提高经济效益。 相似文献
114.
115.
为研究牛源防御素类抗菌肽的生物学功能,本研究利用Prot Param工具分析了抗菌肽的理化性质,利用SOPMA分析了抗菌肽的二级结构,利用NetOGlyc 4.0 Server分析了抗菌肽的糖基化,利用NetPhos 3.1 Server分析了抗菌肽的磷酸化,利用Target P 1.1 Server分析了抗菌肽的亚细胞内定位。结果表明,牛源防御素类抗菌肽为阳离子型抗菌肽,等电点在9.31~11.20之间;TAP、bBD-1、BNBD2、BNBD3、BNBD7、BNBD8和BNBD9为稳定性多肽,其他牛源防御素类抗菌肽为不稳定多肽;BNBD12和BNBD13为疏水性多肽,其他牛源防御素类抗菌肽为亲水性多肽;TAP、LAP、b BD-1、BNBD2、BNBD3、BNBD4、BNBD6、BNBD7、BNBD8和BNBD10由α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲构成,EBD、BNBD1、BNBD5、BNBD11、BNBD12和BNBD13由β折叠、β转角和无规则卷曲构成;没有糖基化位点,除了BNBD7不存在磷酸化位点外,其他16种防御素类抗菌肽存在丝氨酸和苏氨酸的磷酸化位点,但不存在酪氨酸的磷酸化位点。根据分析结果推测牛源防御素类抗菌肽可作用于细胞壁或细胞膜,从而导致细菌死亡。 相似文献
116.
猪瘟病毒E2基因在真核细胞中表达及抗E2蛋白单克隆抗体的制备 总被引:4,自引:1,他引:4
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法转入293T细胞中包装逆转录病毒假病毒.用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞术(FACS)分析,结果表明CSFV E2基因在SP2/0细胞膜上成功表达.将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体.取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆和筛选获得了4株稳定分泌抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗可与CSFV产生特异性反应并具有中和活性. 相似文献