基因芯片用于病原微生物的检测和分型

1用于病原微生物检测和分型的基因芯片种类 1．1寡聚核苷酸检测芯片寡聚核苷芯片是报道最多的一种检测芯片。它是先从GenBank等核酸数据库中获得用于制作芯片的相关病原基因，然后用生物软件在病原科、属、种和型的保守基因区内设计出寡核苷酸探针，用于病原微生物科、属、种和型的鉴定；在各种微生物特有基因区内设计出鉴别探针，用于不同微生物的鉴别；在不同型的病原变异区内设计型和亚型鉴别探针，用于病原型和亚型的鉴定。将设计的探针在核酸数据库进行同源性比较，     

师范生微格教学效果探析

介绍了在师范生微格教学采用的一系列改进措施,即以学生互相观摩教学、互评教案和教学、抓住重难点、少量多次等方法改进微格技能训练方式,提高教学技能的一些体会,取得了较好的训练效果.     

地方本科院校生物技术专业人才培养的目标定位

为了改变我国生物技术人才大量集中在基础研究方向的现状,为地方经济培养更多应用型生物技术人才,地方本科院校应明确学校办学类型,以社会需求和区域产业发展为导向,正确定位生物技术专业人才培养目标,防止人才培养目标定位过高和目标趋同化。笔者对地方本科院校生物技术专业人才培养目标定位存在的问题和改进措施进行了讨论,以期为完善生物技术人才结构提供参考。     

番茄果实外观性状的遗传和分子调控研究进展

番茄是一种重要的果蔬植物,属于茄属果实作物,番茄果实外观和质量等重要特征不断得到驯化和改良.与野生型近亲比较,栽培番茄的果实大,呈现一系列不同的形状,果色除了有野生型的红色外,还有绿色、浅黄色、紫色等一系列不同的颜色.就番茄驯化和品种改良过程中番茄果实重量、形状、色彩和成熟等关键性状的选择、遗传和分子调控进行了分析.     

高床猪舍母猪饲养及仔猪育成观察

随着农业科学技术的发展，近年，我国各地修建了不同类型大小的高床猪舍，养猪业从传统的地面养殖转向各种高床网上养殖。1997年重庆市种猪场率先在重庆地区示范建成3000m^2，现代化高床猪舍，随后二期工程又建了4000m^2，全部投产使用。为了探索高床网上养猪的新技术和新工艺对种猪的饲养效果，我们对其母猪的育成产仔、仔猪的培育等最重要环节进行了观察研究，以促使现代化养猪业在我国日趋完善。     

胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用

用设计的引物对胸膜肺炎放线杆菌1、3、6、9型标准株的荚膜多糖输出部分基因序列进行了扩增，克隆，测序，分别获得4个型的部分cpxDC基因序列和3型的部分cpxD基因序列。对克隆序列和GenBank中已知序列进行序列拼接，分别拼接出1、3、6型的荚膜输出cpxD基因全序列。通过基因序列分析发现，胸膜肺炎放线杆菌1、3、5、6、9型荚膜多糖输出基因已知序列间的同源性很高，达89％～99．88％。1、3、5、6型cpxD基因的推导氨基酸序列间的同源性为93％～99％。在cpxDC基因的保守区内设计出1对种特异性引物，对胸膜肺炎放线杆菌进行鉴定和检测，结果从8个标准型菌株和3株分离株中均扩出约720bp的阳性片段，其他6种能引起猪呼吸道疾病的细菌均呈阴性。所建立的PCR方法最低检出量为10Pg，最适模板量为5ng（50ptL）。试验结果表明，胸膜肺炎放线杆菌不同血清型间的荚膜多糖输出基因存在着高度的保守性。设计出的种特异性引物能用于胸膜肺炎放线杆菌的检测和鉴定。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的血清型分型及毒力因子研究进展

根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位的不同，猪胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型，某些血清型问存在交叉反应，不同血清型甚至同一血清型不同菌株间的毒力大小不一样，致病性也有强弱之别。该菌的致病性与多种毒力因子密切相关，主要有外毒素、外膜蛋白、脂多糖、英膜多糖、转铁蛋白、脲酶等。本文综述了国内外对胸膜肺炎放线杆菌的几种主要毒力因子及血清型的研究进展。     

微生物学课程改革与创新创业人才培养

微生物学是高校生物类专业重要的必修专业基础课。近几年,重庆三峡学院生命科学与工程学院通过创新教学模式、整合教学内容、改进教学手段,对微生物学理论及实验课的教学进行了改革,并结合该门课程特点在创新创业人才培养等方面进行了探索和实践,取得了较好的教学效果。     

猪多杀性巴氏杆菌5:A型Ts-8株psl基因的克隆和序列分析

根据禽多杀性巴氏杆菌psl基因序列,设计了1对引物,从猪源多杀性巴氏杆菌5:A型Ts-8株中扩增出453bp的psl基因,将其克隆到pMD18-T载体后测序。序列分析表明,该基因与禽多杀性巴氏杆菌T16株的psl基因序列只相差2个碱基,同源性高达99%;与流感嗜血杆菌编码P6蛋白的基因序列同源性为83%。猪psl基因的推导氨基酸序列与禽psl基因、P6蛋白的氨基酸序列同源性分别为100%,87%。结果表明,多杀性巴氏杆菌psl基因在猪和禽的菌株中是高度保守的,而且与P6蛋白的氨基酸序列具有较高的同源性。     

猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌联合检测芯片的研制及应用

本研究旨在建立联合检测胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的DNA芯片.用7个从3种病菌基因组中扩增出的不同特异性靶DNA制作基因芯片,并对芯片的靶DNA和探针浓度、杂交温度、重复性、特异性和灵敏度进行了研究.结果表明,检测芯片的特异性强,能与测试的李氏放线杆菌、猪鼻支原体和副猪嗜血杆菌等9种病原区分;灵敏度高,在50μL标记反应体系中,能检测到10～50 pg基组DNA,芯片可重复利用.用芯片对44株目标菌的不同型标准菌株、分离株和疫苗株进行了检测.其信号值≥1 000,信号噪音比(SNR)≥6.用芯片对45头病猪和97头健康猪的临床样品选择培养物进行了检测,其检出率分别为多杀性巴氏杆菌71.1%和49.5%、胸膜肺炎放线杆菌42.2%和26.8%、猪肺炎支原体20%和22.7%,混合感染率分别为42.2%和24.7%.在检测临床样品时,芯片法与PCR的符合率为97.8%～100%,与分离鉴定法的符合率为87.6%～95.6%.研究表明,研制的芯片特异性强、敏感性高、可重复使用,是一种能有效用于胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和猪肺炎支原体鉴定和联合检测的新工具.