鲫源嗜水气单胞菌毒力基因多重PCR检测及ERIC-PCR分子分型

为快速了解鲫源嗜水气单胞菌株毒力基因携带情况及与菌株基因型的相关性,建立多重PCR法和ERIC-PCR分子分型,为临床快速检测、菌株分型和菌株致病性分析提供依据。通过单重PCR法检测出标准菌株ATCC7966内5个毒力基因气溶素(aerolysin,aer)、溶血素(hemolysin,hly)、细胞毒性肠毒素(cytotoxic enterotoxin,alt)、胞外蛋白酶(extracellular protease,ahp)和细胞肠兴奋性肠毒素(intestinal cells of excitatory enterotoxin,act),其扩增产物长度依次为300 bp、592 bp、442 bp、856 bp和500 bp。在此基础上,优化并建立特异性高,敏感度达7.2×102cfu·m L-1多重PCR法,用于检测从江苏射阳地区患病水产动物体内分离的17株嗜水气单胞菌5个毒力基因携带率。结果显示,毒力基因act的携带率为100%,而80%的菌株5个毒力基因均有检出。采用ERIC-PCR分子分型技术,以标准菌株ATCC7966为对照,对17株鲫源致病性嗜水气单胞菌进行基因分型,获得两种基因型,分别描述为A型和B型,其中B型菌株14株,带型与ATCC7966一致,认为是当地的主要流行株。探究菌株基因型与毒力基因分布相关性,携带5个毒力基因的均为B型菌株,而所有A型菌株存在一或多个毒力基因缺失,有可能是此类菌株更易发生毒力基因漂变,但还需进一步研究。     

农电工形象处处闪光辉

农电工形象处处闪光辉黄肖丹，马学平四川眉山思蒙电管站（６１２１６１）１９９４年３月１９日，电管站的张保金、马学平、张树安、洪志兵４名同志正在莲花乡黄塔村２社为一村民用电搞安装。下午３时许，正在全神贯注进行施工的４位同志突然听见远处传来几声撕心裂肺的声...     

贵州省新农村环境信息管理系统构建的实践

从贵州省脆弱生态环境背景下新农村环境可持续发展入手,旨在建立一个能同时服务政府部门、研究人员以及农民群众的农村环境信息管理系统。本着以上宗旨,分别设计了信息管理系统构建的原则、基础数据指标体系,在此基础上探讨了信息管理系统的运行模式及其主要应用前景。     

滇池打捞蓝藻总氮含量检测方法研究

 水体富营养化是蓝藻爆发的主要原因,污染水体中的蓝藻打捞是水环境治理的重要措施之一。目前没有检测打捞上岸的泥状蓝藻（藻泥）总氮（TN）含量的标准方法。为得到科学的计量打捞蓝藻含TN检测方法,供政府支付滇池水体污染物去除补偿计量使用,本文通过对从滇池中打捞的17批次37个蓝藻抽检样品,用鲜、干两样品状态分别采用LY/T1269—1999和NY525—2002两种标准方法进行蓝藻TN含量检测,并对检测结果进行配对t测验和偏差值分析。结果是：用鲜样测定蓝藻TN时,LY/T1269—1999方法和NY525—2002方法之间无显著差异、偏差小,两方法均可;而用风干样测定时NY525—2002方法的结果显著偏高,且高于其他没有显著差异的3种测定结果。同时,用NY525—2002方法测定风干样蓝藻TN的变异系数为1576%,远高于其他3种约11%~12%的变异系数。研究确定采用105℃烘箱法测定蓝藻含水率、LY/T1269—1999方法测定蓝藻TN,适用于打捞蓝藻去除的氮污染物的检测方法。     

鲤科疱疹病毒Ⅱ型射阳株的分离与鉴定

对患"鳃出血"病的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)病灶组织进行分离,并通过回归感染试验、细胞分离鉴定、电镜观察以及PCR几种方法结合来鉴定。结果显示:健康异育银鲫注射组织滤液5 d后开始发病,且症状与原发病症状一样,死亡率为80%,对照组没有死亡。对患病鱼内脏组织经超薄切片,电子显微镜观察发现组织内有大量的病毒颗粒,成熟的病毒粒子直径大小170~200 nm,与疱疹病毒Ⅱ型病毒粒子相符。滤液经疱疹病毒Ⅱ型特异性的PCR检测,获得阳性目的片段,同时将无菌处理的病样滤液接种胖头鲤细胞(FHM),培养1 d后出现明显的细胞病变(CPE),单层细胞网状收缩,坏死细胞聚集。收集细胞培养液,进行病毒特异性的PCR检测,并检测到436 bp的阳性片段。结果表明:从江苏射阳某"鳃出血"病异育银鲫养殖鱼塘分离到的病毒为疱疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2)病毒。     

明治奶粉召回查出放射元素召回40万罐

在中国妈妈中知名度很高的明治奶粉又出事了．日前,日本明治乳业公司宣布,该公司生产的“明治STEP”奶粉检测出微量放射性铯,公司决定召回约40万罐奶粉,进行无偿更换。但通过海外代购等非官方途径购买了明治奶粉的中国妈妈可能享受不到这一待遇,这止一些妈妈很着急。     

枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾免疫机能的影响

在饲料中分别添加0、1×109、3×109和5×109cfu/kg枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),测定投喂相应饲料后第1、4、7、14、21、28天以及停止投喂枯草芽孢杆菌后的第7、14天克氏原螯虾(Procam barus clarkii)的血淋巴吞噬活性、血清溶菌活力、抗菌活力以及酚氧化酶活力。结果显示:实验组(含枯草芽孢杆菌的饲料组)的吞噬活性于投喂枯草芽孢杆菌后第7天开始显著高于对照组(P<0.05);实验组的溶菌活力、抗菌活力明显高于对照组(P<0.05),并在停药后仍维持较高水平(P<0.05);此外,酚氧化酶活力也有所增加。本研究表明,枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾的免疫机能有促进作用。     

大口鲶维氏气单胞菌病发生与诊治

大口鲶俗称河鲶,属鲶形目、鲶科鱼类.大口鲶营养丰富,肉质鲜美,无肌间刺;生长速度快,苗种易得,疾病少,耐缺氧能力强,养殖技术简单,饲料成本低,经济效益好.基于以上原因,该品种深受养殖户和消费者喜爱.2014年7月四川崇州一养殖场养殖的大口鲶发生大规模死亡,笔者对其进行相关诊断,并进行治疗取得很好的治疗效果.     

温和气单胞菌PCR快速诊断方法的建立

根据NCBI公布的温和气单胞菌(Aeromonas sobria)丝氨酸蛋白酶的基因序列,设计并选取一对能够快速而准确地检测温和气单胞菌的PCR引物,建立PCR快速检测体系,并对患病的鱼组织进行检测。研究结果表明,使用设计的引物能够扩增出与预计大小相符合的131 bp的特异性片段,具有较好的检测特异性,对靶标DNA的检测灵敏度为1.0 pg/20μL,对温和气单胞菌的检测灵敏度为50 cfu/20μL。样品的检测结果与实际发病情况一致,表明本研究成功建立了温和气单胞菌常规PCR检测体系,该体系可以用于温和气单胞菌的诊断和样品的检测。     

淡水养殖动物致病性嗜水气单胞菌ERIC-PCR分型与耐药性

以质控菌株ATCC7966为对照,采用ERIC-PCR方法对49株分别采集于中国浙江、江苏、江西、广东、湖北、上海等主要淡水养殖区的致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行了基因分型,并分析了嗜水气单胞菌对12种抗生素的耐药模式,探讨了嗜水气单胞菌的基因型与区域性分布及其耐药性的关联性。实验结果表明,50株受试嗜水气单胞菌菌株可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ这12个基因型,其中Ⅷ型菌株最多,Ⅲ型和Ⅹ型菌株最少。此外,50株受试菌株对氨苄青霉素(AMP)的耐药率高达100%,对头孢氨苄(CX)的耐药率高达98%,94%以上的菌株对氨基糖苷类及喹诺酮类抗生素未产生耐药性。受试菌株对12种抗生素呈现出AMP、CX/AMP、CX/AMP/POL(多黏菌素)、CX/AMP/SMZ(复方新诺明)、CX/AMP/NM(新霉素)、CX/AMP/SMZ/POL、CX/AMP/SMZ/POL/GM(庆大霉素)、CX/AMP/SMZ/LOM(洛美沙星)/ENR(恩诺沙星)、CX/AMP/SMZ/LOM/ENR/OF(氧氟沙星)/LEV(左氟沙星)这9种不同的耐药模式,其中Ⅻ型菌株的耐药...