基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统

对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达载体pgfvs-Cas9-HK1/HK2-gRNA转化金针菇原生质体,经潮霉素筛选后的拟转化子再进行PCR鉴定。结果显示:金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度均为50μg/mL;经潮霉素筛选后的部分拟转化子成功扩增出Cas9的部分片段,携带有HK1、HK2基因载体的Cas9蛋白基因成功整合到了金针菇的基因组中,两个表达载体转化率分别为24.1%和12.5%。     

诺如病毒P-partical-GnIH抗原制备及抗原性初步检测

为探索调控家鹅繁殖性能的技术,本研究通过设计合成鹅促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)序列片段,酶切后连接到诺如病毒(Nov)P基因重组pEGX-4T-1载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取阳性菌重组质粒,并通过测序和酶切进行验证。将测序正确的质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,利用IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE及Western blotting检测重组蛋白表达。进一步在不同IPTG浓度及诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件,在最佳条件下的诱导菌液经过离心收集菌体,并超声波破碎离心后对重组蛋白可溶性进行分析。利用xTractor Buffer和Glutathione Superflow树脂对重组蛋白进行纯化,并使用自制的抗GnIH鹅血清及抗鹅二抗通过Western blotting检测重组蛋白。结果显示,重组质粒Nov P-partical-GnIH经双酶切鉴定获得大小约为96 bp的目的基因条带,进一步测序结果证明重组质粒构建成功。诱导表达的重组蛋白分子质量约为64 ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导2 h条件下表达量最高;菌体超声破碎后经SDS-PAGE检测,重组蛋白主要表达在沉淀中。重组蛋白与GST单抗及抗GnIH阳性血清均能反应,表明此重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。本研究通过对Nov P-partical-GnIH蛋白原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的重组蛋白,将有助于进一步建立家鹅的繁殖性能免疫调控方法,为提高繁殖性能及调控繁殖机制的研究奠定基础。     

地方特色产品包装设计研究——以陇南网销产品为例

陇南地域文化中具有秦陇文化和巴蜀文化两种特征。同时,千百年来的民族大融合,使得陇南文化呈现出复杂多样的形态。而作为地域文化凝集与代表的地方特色产品与人们的生活息息相关。本文以陇南网销特色产品为例,对地方特色产品包装设计现状、陇南地域文化的特点及在包装设计中的应用必要性进行分析,进而对陇南地方特色产品包装设计的思路进行探讨。     

伪狂犬病及其根除:美国经历的回顾——伪狂犬病的流行病学

本文由美国家畜保护研究所于1990年完成,两位作者David G博士和Jerry Torrison博士均来自明尼苏达大学兽医院。本文来源于《伪狂犬病及其根除报告:美国经历的回顾》报告中的附件,由美国农业部公开发布。     

中国竹产业在乡村振兴中的发展对策

中国竹资源丰富，竹业是山区农民的重要经济来源。随着科技的进步，中国竹产业发展取得了很大进步，但在乡村地区竹产业的优势和潜力尚未充分发挥。当前，中国“三农”工作的重心已转向全面推进乡村振兴，竹资源丰富地区也成为乡村振兴的主要战场，竹产业在乡村振兴中大有可为。文章分析了中国竹产业发展现状以及乡村地区竹产业发展存在的问题，提出了竹产业服务于乡村振兴的对策。     

蛋鸡沙门氏菌和大肠杆菌混合感染的诊断与治疗

<正>鸡沙门氏菌病是由沙门氏菌引起的,以肝、脾等实质器官的病变和下痢为特征的败血性传染病,根据临床表现不同和病变特征分为鸡白痢、鸡伤寒和鸡副伤寒,腹膜炎、气囊炎、输卵管炎等病变,对养鸡业危害较大。临床发现一例蛋鸡的沙门氏菌与大肠杆菌混合感染的病例,现报告如下。1发病情况吉林省某养殖场蛋鸡在190日龄时,发现个别鸡打蔫,拉稀,然后陆续出死。用环丙沙星治疗3 d,有一定治疗效果,但治疗后,每天仍有个别鸡死亡。     

伪狂犬病及其根除:美国经历的回顾——猪伪狂犬病根除指南:猪群PRV净化方案

正对猪群和猪场而言,伪狂犬病是可消灭的。当某一猪群被发现感染伪狂犬病,必须在考虑所有相关因素的基础上选择适当的计划并严格遵守。为利用特定设施,可对基础计划作出改动。但应严格遵守基本原则。本文对美国清群重建净化方案、旨在保留猪群种系并利用血清反应呈