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【目的】克隆鸭梨苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)序列,并分析其在果实发育阶段和机械伤害时的表达模式,为研究鸭梨褐变机制提供理论依据。【方法】采用同源克隆方法,获得鸭梨PAL全长序列;利用在线生物信息学软件对其进行分析;采用MEGA 5.1软件构建PAL蛋白系统进化树;利用实时荧光定量PCR技术分析PAL在鸭梨果实发育阶段及受机械伤害过程中的表达。【结果】在鸭梨中获得了2个含完整CDS区的PAL,分别命名为PbPAL1和PbPAL2。PbPAL1 cDNA序列全长为2 232 bp,含2 160 bp完整开放阅读框、60 bp的5′非翻译区及12 bp的3′非翻译区,GenBank登录号为GU906268.1;PbPAL2 cDNA序列全长为2 387 bp,含2 163 bp完整开放阅读框、14 bp的5′非翻译区及210 bp的3′非翻译区,GenBank登录号为GU906269.1。系统进化分析表明PbPAL1和PbPAL2位于分子进化树的不同分支,PbPAL1与西洋梨(Pyrus communis)的PAL同源性较高,而PbPAL2与桃(Prunus persica)的PAL同源性较高。定量PCR分析表明,随着鸭梨果实发育成熟,果皮、果肉和果心的PbPAL1和PbPAL2表达量各异,但均呈下降趋势;且果实发育早期果心中的PbPAL1和PbPAL2表达量显著高于果皮和果肉。损伤处理可迅速诱导鸭梨的果肉褐变,果皮褐变出现较晚;同时,损伤刺激果皮和果肉组织中PbPAL1和PbPAL2表达上调。果皮中PbPAL1表达量在损伤处理后6 h达到高峰,而PbPAL2在损伤处理后48 h才显著上升;果肉中PbPAL1在损伤处理后1 h表达量开始显著上升,而PbPAL2在损伤处理后12 h才显著上升。【结论】鸭梨PbPAL1和PbPAL2属于2个不同的PAL类型,其表达随果实发育呈下降趋势,机械损伤过程中,两基因表达显著上调,表明其参与了损伤引起的组织褐变过程。 相似文献
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【目的】从鸭梨中克隆GAPDH基因家族,筛选合适的鸭梨内参基因。【方法】采用同源克隆的方法,克隆鸭梨GAPDH基因家族,用半定量PCR方法分析4个鸭梨GAPDH基因在鸭梨幼叶、花蕾、盛花期花瓣、幼果期果肉和成熟期果心,以及幼果期、膨大期、成熟期和褐变期果心的表达特征。【结果】从鸭梨中成功克隆出了4个GAPDH基因,分别命名为PbGAPDHa、PbGAPDHb、PbGAPDHc1和PbGAPDHc2。其中PbGAPDHa和PbGAPDHb是由一个共同的祖先基因倍增进化来的,主要在鸭梨的幼叶中表达,其蛋白定位在质体;而PbGAPDHc1和PbGAPDHc2是一个基因的2种拷贝形式,在鸭梨的花、幼叶、果实等组织中表达量基本一致,在不同发育时期的果心中表达量也相近,其蛋白定位在细胞质。【结论】PbGAPDHc1和PbGAPDHc2适合作为鸭梨的内参基因。 相似文献
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【目的】比较窖藏和冷藏过程中,鸭梨果实品质、呼吸速率、乙烯释放速率、电子鼻特征、挥发性物质及其相关基因表达的差异,进一步解析两种贮藏方式对鸭梨香气物质形成的影响及其机制。【方法】鸭梨采收后以窖藏和冷藏两种方式贮藏,测定贮藏期间果实硬度、可溶性固形物含量(SSC)、可滴定酸(TA)含量、呼吸速率和乙烯释放速率,使用电子鼻检测挥发性物质变化,利用气质联用色谱(GC-MS)测定挥发性物质成分及含量,利用荧光定量PCR(Real-time PCR)技术分析乙烯生成(PbACS1、PbACO2)及其信号转导(PbETR1、PbETR2、PbERS1a、PbERS1b、PbEIN3、PbERF)、挥发性物质合成(PbAAT1、PbADH2、PbADH3、PbADH5、PbHPL、PbLOX1、PbLOX8)相关基因的表达量变化情况。【结果】冷藏期间,鸭梨果实硬度变化较小,SSC上升,TA含量下降。窖藏时,果实硬度下降比较明显,但对SSC的影响较小,而TA含量增加。与冷藏相比,窖藏下果实呼吸速率较高,乙烯释放高峰提前1个月出现,且其峰值较高。电子鼻可有效区分两种贮藏方式下的挥发性物质,其中W1W、W5S、W2W、W1S这4种传感器对挥发性物质区分起主要作用;窖藏期间果实挥发性物质较多。鸭梨果皮和果肉的挥发性物质包含醛类、酯类、醇类、萜类、烷烃类等,且果皮中含量较高;窖藏果皮和果肉、冷藏果皮和果肉中分别检出36种和33种、28种和24种挥发性物质,窖藏鸭梨较冷藏时生成更多的乙酯类化合物,其中己酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、(E,Z)2,4-癸二烯酸乙酯等为果皮主要香味物质,己酸乙酯、丁酸乙酯为果肉主要香味物质。相关基因的表达分析表明,与冷藏相比,窖藏明显上调鸭梨果皮和果肉ACC氧化酶(PbACO2)、脂氧合酶(PbLOX1)和醇酰基转移酶(PbAAT1)相关基因的表达,下调乙烯不敏感转录因子(PbEIN3)的表达。【结论】在贮藏3个月内,与冷藏鸭梨相比,窖藏条件明显促进乙烯生成(PbACO2)和香气合成(PbLOX1、PbAAT1)等基因的表达,此时果实具有较多的香气物质种类和较高含量,表现出香味浓郁的特点。 相似文献
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为减少贮藏期间冷害的发生,以深州蜜桃(Prunus persica L.Batsch cv.Shenzhou)为供试材料,研究了自发气调包装联合聪明鲜(MAP+SF)以及联合乙烯控释剂(MAP+ESF)对果实贮藏品质的影响。结果显示:低温贮藏49d后,MAP+SF处理果实PPO活性显著高于对照果实(CK),果肉褐变指数显著低于MAP处理果实;MAP+ESF处理保持了果实硬度,降低了果肉褐变指数、出汁率和总酚含量、PPO活性。20℃货架3d后,MAP+SF延缓了果肉褐变,减少了总酚含量,但提高了果实出汁率,加剧了果实腐烂率;MAP+ESF处理减少了果肉褐变和果实腐烂,降低了出汁率和总酚含量。这表明MAP+ESF处理技术可有效改善果实贮藏品质,延长货架期。 相似文献
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对“新红星”苹果进行1-甲基环丙烯(1-MCP)、自发气调包装(MAP)与乙烯吸收剂(EA)处理,然后于0 ℃下冷藏,研究不同处理在冷藏270 d后20 ℃货架期果实品质的差异。结果表明:贮后货架期间,“新红星”苹果果实硬度和可滴定酸含量下降,可溶性固形物含量无明显变化,虎皮病增多;MAP包装与1-MCP+EA+MAP能较好维持冷藏期间“新红星”苹果果实硬度,同时1-MCP+EA明显降低了冷藏期间虎皮病病情指数、显著降低了果实乙烯释放量和呼吸速率,并且抑制果皮α-法尼烯及共轭三烯的生成。综合分析认为,1-MCP+EA+MAP处理能较好维持"新红星"苹果冷藏和货架期间的品质,并能显著控制果实虎皮病的发生。 相似文献
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套袋对鸭梨采后生理及贮藏品质的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以鸭梨为试材,研究了田间套袋对常温(25±2)℃下鸭梨果实呼吸速率和乙烯释放速率以及果实低温(0±0.5)℃贮藏品质的影响。结果表明,套袋并未推迟或提前常温下鸭梨果实的呼吸高峰和乙烯释放高峰,但套袋鸭梨的呼吸高峰低于未套袋鸭梨,而乙烯释放高峰无明显差别。采摘时,套袋鸭梨较未套袋鸭梨果实硬度大、可滴定酸含量高,VC含量低;随着贮藏时间的延长,套袋和未套袋鸭梨果实硬度均有所下降,但套袋鸭梨果实硬度下降更为迅速;可溶性固形物含量(SSC)在贮藏过程中整体上升,贮藏后期(210 d)套袋鸭梨果实SSC显著高于未套袋果实(P0.05),而之前两者无显著差异;套袋鸭梨果实TA含量较未套袋鸭梨下降更为迅速;贮藏初期套装鸭梨果实VC含量较低,但在贮藏后期这种差别已不明显;套袋鸭梨果心褐变指数较低,未套袋鸭梨果心总酚含量高且下降更为迅速,其PPO活性显著高于套袋鸭梨(P0.05),相关性分析表明鸭梨果心褐变指数与PPO活性呈极显著正相关(P0.01),说明套袋处理对抑制鸭梨贮藏期间果心褐变具有显著效果。 相似文献
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以深州蜜桃为研究对象,分析不同成熟度果实常温(25℃±1℃)贮藏过程中呼吸速率、乙烯生成速率、品质指标和电子鼻响应情况.结果表明:贮藏期内果实成熟度(IAD值)、色度角(H)、硬度、可溶性固形物含量(SSC)和可滴定酸(TA)含量均呈降低趋势.同时,果实呼吸速率逐渐增强,乙烯释放速率先上升,至第3天时达最大值,然后降低.电子鼻响应值经主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)和负载(Loading)分析结果显示,电子鼻可以对贮藏初值、第3天、第6天和第9天的深州蜜桃挥发性成分进行有效区分,其中传感器W1W、W2W、W5S、W1S、W2S对挥发性成分区分起主要作用.相关性分析表明,上述5个电子鼻传感器响应信号与果实的IAD值、色度、硬度、SSC和TA含量均呈极显著负相关(P<0.01).上述结果为深州蜜桃成熟度分级以及使用电子鼻技术预测其贮藏期内品质变化提供了依据. 相似文献