猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白特异性纳米抗体的原核表达及鉴定

为获得针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP5蛋白的特异性纳米抗体,并鉴定其抗原结合活性,以本实验室前期获得的PRRSV GP5蛋白特异性纳米抗体VHHGP5基因片段为模板,使用PCR对目的片段进行扩增,将扩增的片段经双酶切处理后连接到pColdSUMO-FLAG载体上,随后转化至E.coli TOP 10感受态细胞。经菌液PCR鉴定,将构建成功的重组质粒转化至E.coli BL21 （DE3）感受态细胞,用IPTG作为诱导剂对目的蛋白进行诱导表达,表达产物通过Ni-NTA亲和层析柱纯化。通过SDA-PAGE凝胶电泳分析表达及纯化后的蛋白,同时使用ELISA方法检测纯化后的纳米抗体效价,并使用Western blot鉴定纯化后的蛋白。SDS-PAGE结果显示,成功获得了大小约36 kDa的重组蛋白,利用原核表达系统制备的PRRSV GP5特异性纳米抗体重组蛋白以可溶性形式表达;ELISA结果显示,该纳米抗体结合抗原的效价为1:50 000;Western blot结果显示,该纳...     

种鸡舍采用臭氧水消毒的适宜使用方法研究

[目的]研究臭氧水在种鸡舍的消毒效果及使用方法。[方法]对空舍期鸡舍使用20 mg/L的臭氧水分别消毒15、30、60 min,检测消毒前后菌落数的变化情况;使用臭氧水浸泡水线消毒30 min,观察臭氧水对水线内细菌的杀灭率;每天使用10 mg/L的臭氧水带鸡消毒30 min,连续处理7 d,检测处理前、后鸡舍内菌落总数、氨气、硫化氢含量及种鸡生产性能。[结果]空舍期鸡舍使用20 mg/L的臭氧消毒30和60 min,细菌杀灭率在98%以上,与消毒15 min和甲醛消毒法差异显著(P<0.05);臭氧水对水线消毒30 min,总细菌杀灭率达99.04%,大肠杆菌未检出;臭氧水带鸡消毒对种鸡的生产性能无不良影响(P>0.05),能明显减少舍内的菌落总数,降低空气中氨和硫化氢的含量(P>0.05)。[结论]空舍期种鸡舍和水线使用20 mg/L的臭氧水消毒30 min可以有效杀灭微生物,使用10 mg/L臭氧水每天带鸡喷雾消毒30 min可以有效减少鸡舍内菌落总数和有害气体的产生。     

复方中药制剂体外杀纤毛虫及毒性试验研究

研究3个复方中草药水煎浓缩液(1 g/mL)(复方Ⅰ:十大功劳、黄柏、半枝莲、苦参、百部、槟榔;复方Ⅱ:大黄、黄芩、野菊花、蛇床子、石榴皮、乌梅;复方Ⅲ:地丁、蒲公英、野菊花、地锦草、败酱草、龙胆草、鱼腥草、青蒿)体外杀水滴伪康纤虫和海洋尾丝虫的效果及对体质量18~20 g大菱鲆的毒性,旨在筛选出高效、低毒、少残留的治疗盾纤毛虫病的中药组合。体外杀虫试验在96孔细胞培养板的每孔中加入90μL药液和10μL离心后的虫液,药物剂量分别为0、5、10、15、20、25、30 mg/kg,每组3个平行,显微镜下观察盾纤毛虫的状态。体外杀虫试验结果显示,复方Ⅰ的剂量在0~30 mg/kg时对海洋尾丝虫无杀害作用;复方Ⅲ仅在药物剂量为30 mg/kg时对海洋尾丝虫有杀害作用,其他剂量时无效;复方Ⅱ20、25、30 mg/kg组1 h水滴伪康纤虫全部死亡,30 mg/kg组3 h海洋尾丝虫全部死亡。随即在循环水箱中进行为期7 d的大菱鲆毒性试验,随机分为4组,即空白对照组(0 mg/kg)、推荐剂量组(20 mg/kg)、3倍剂量组(60 mg/kg)、5倍剂量组(100 mg/kg),每组3个平行。试验结束时,鱼尾静脉采集全血和血清,使用血液细胞分析仪和全自动生化分析仪检测血常规和血液生化指标。大菱鲆毒性试验结果显示,复方Ⅱ药浴后,大菱鲆血液中白细胞、嗜酸性细胞等血常规指标以及葡萄糖、球蛋白含量等血液生化指标均无显著差异;各试验组大菱鲆的鳃、肠道、胃、肝脏和脾脏均无明显的病理变化。     

现代楼房养猪智能化环境控制及疾病预防技术概述

如今,非洲猪瘟的疫情对国内养猪行业影响巨大,猪场的生物安全备受关注,我国的养猪模式在此基础上发生了改变,由原来的小户散养逐渐转型为集约化、集团化养殖;近年来,国家对土地资源的管控使得养殖用地愈发紧张,我国对猪肉的高需求量得不到满足,"楼房养殖"这一概念逐渐被推出到大家的视野中.文章主要分析了楼房养殖的现状、优势、痛点的...