腹泻犊牛病原分离鉴定及药敏试验

从河北省某奶牛场采集腹泻犊牛粪样,进行病原的分离鉴定及耐药性检测。结果表明,分离菌在形态特征、培养特性、生化特性、血清型和致病性等方面与大肠埃希菌基本一致,鉴定为大肠埃希菌。应用大肠埃希菌O抗原定型血清鉴定为O9。肠毒素试验表明,该菌产生热稳定肠毒素。分离菌对多黏菌素、丁胺卡那霉素敏感,对链霉素、红霉素、四环素、庆大霉素和氨苄青霉素则表现出耐药性。     

实验性乳腺炎小鼠乳腺肥大细胞的变化

应用改良甲苯胺蓝染色法和苏木精-伊红染色法对金黄色葡萄球菌诱发实验性乳腺炎小鼠乳腺肥大细胞的数量、分布、活性进行了研究。正常对照组小鼠乳腺组织中肥大细胞主要分布于乳腺小叶之间的结缔组织中,有些围绕血管或乳腺导管分布,腺上皮之间没有肥大细胞分布;阳性试验组小鼠乳腺肥大细胞主要分布在相邻腺泡周围或腺导管上皮周围,胞质内充满异染颗粒,脱颗粒状态显著,甚至表现有颗粒耗竭现象,腺泡中有一定程度的肥大细胞浸润。肥大细胞计数结果显示,阳性试验组母鼠乳腺内的肥大细胞数急剧增多,显著高于正常对照组(P<0.05),而脱颗粒肥大细胞数阳性试验组与正常对照组相比极显著增多(P<0.01)。结论:肥大细胞在小鼠乳腺炎的致病机制中发挥重要作用,参与了乳腺炎的发病过程。     

鸡堆型艾美耳球虫单链抗体基因的构建及表达

轻链可变区和重链可变区基因产物等摩尔浓度混合后,用重叠延伸拼接法扩增出单链抗体基因,再用带限制性内切酶位点的引物(NcoⅠ和HindⅢ)扩增出带有特定酶切位点的单链抗体基因片段.NcoⅠ和HindⅢ双酶切单链抗体与表达载体pET-22b( ),用回收试剂盒回收酶切后的单链抗体与表达载体pET-22b( )基因片段,用连接试剂盒将单链抗体与表达载体pET-22b( )基因片段连接,并将连接产物转化感受态细胞JM109.氨苄青霉素筛选阳性重组子.以T7promoter/T7terminator primer进行茼落PCR鉴定,测定正确后,37℃摇菌扩增,测菌浓度至D600为0.6时,加入IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE初步检测.SDS-PAGE检测显示其相对分子质量是31 000,与预期结果一致,证明单链抗体基因在大肠杆菌中得到表达.     

堆型艾美耳球虫心单克隆抗体细胞株的鉴定

通过对杂交瘤细胞染色体分析、单克隆抗体的免疫组化和免疫荧光等指标的检测,对已建立的单克隆抗体细胞株5B4和5G7进行鉴定,结果表明两株单克隆抗体细胞株的染色体数目均接近两亲本的染色体数目之和;所建立的单克隆抗体细胞株所分泌的特异性抗体是针对子孢子的.     

堆型艾美耳球虫早熟减毒株子孢子在鸡胚小肠上皮细胞中的发育研究

为观察堆型艾美耳球虫早熟减毒袜子抱子在鸡胚小肠上皮细胞中的发育情况进行了如下试验。1材料和方法1．1细胞的制备采用14～17日龄健康鸡胚5只,在无菌室内,取出十二指肠,纵向剖开肠壁,以Hanks浪冲洗粘膜,用手术刀刮取粘膜,将刮下物以Hanks液洗涤3次,而后通过50ml注射器（不装针头）,注入到200ml三角瓶内,加入0．25％胰酶（Hanks液配制）50ml,在38C水浴箱内消化30min,每隔smin摇动1次,消化完成后,自然静置沉淀,用吸管轻轻吸去上层胰酶液,以Hanks液反复洗涤5次,以除去胰酶。加入少量细胞生长液,用n＊1吸管将组织吹打成糊…     

河北省中小规模猪场猪瘟流行病学调查

2006年下半年,我们重点对河北省中小规模猪场的猪瘟免疫状况和发病情况进行了实地调查和实验室诊断,并对其免疫效果进行了评估,较为全面地分析了河北省目前中小规模猪场猪瘟流行状况。1材料与方法1.1试验材料1.1.1器械:采血器、ELISA实验所需试剂及器械。1.1.2诊断试剂:猪瘟病原检测试剂盒(CHEKIT-HCV-Antigen ELISA TEST KIT HCV Ag),IDXXX公司生产,批号43220-441;LSI猪瘟抗体ELISA检测试剂盒(CI VTESTSUIS HC/PPC),海博莱公司生产,批号700085-01。1.1.3试验样品:(1)免疫效果评估:血清样品采自K规模猪场,共85份。…     

镉的食品污染及其检测

镉毒性较大,是最常见的污染食品和饮料的重金属元素,在1973年FAO/WHO所确定的十七种最优先研究的食品污染物中,镉仅次于黄曲霉毒素和砷,列第三位。联合国环境规划署1984年提出12种具有全球意义的危险化学物质,镉被列为首位。镉的食品污染问题已为世界各国所关注。     

黄曲霉毒素对动物性食品的污染与检测

黄曲霉毒素(Aflatoxin)简称AFT,是黄曲霉菌和寄生曲霉菌的代谢产物的二氢呋喃香豆素衍生物,是毒性和致癌性最强的化学致癌物之一。由于黄曲霉菌在自然界中广泛存在,很容易污染食品,国内外均有食用霉变食品引起中毒的报导,应引起广泛的重视。 1.黄曲霉毒素对动物性食品的污染 饲料污染了黄曲霉毒素,曾引起英格兰10万多只火鸡的死亡事件。目前已经分离到的黄曲霉毒素及其衍生物20余种,共分两大类即B族和G族。现知污染食品的黄曲霉毒素主要有B_1、B_2、G_1、G_2、B_(za)和G_(za)。据报道目前黄曲霉毒素对动物性食品的污染较普遍,如奶粉、腌肉、香肠、火腿、干咸鱼中有一定的检出率。黄曲霉毒素对植物性食品如玉米、花生、大米、稻谷等污染严重,我     

空肠弯曲杆菌对动物性食品的污染及检测

空肠弯曲杆菌(Campyobater fetus sub- sp.jejuni)是人的肠炎和腹泻病原之一,世界各国均有报道,引起医学界广泛的关注.1 空肠弯曲杆菌的生物学特性空肠弯曲杆菌的革兰氏阴性菌,在感染组织中呈孤型或S型,幼龄者较短,老龄者较长.不形成芽胞和荚膜,具有一根鞭毛.本菌为微需氧菌,在10%～20%CO_2环境中生长良好,生长最适温度37℃,最适pH7.0.普通培养基上一般生长不良,需在培养基中添加血清或血液.空肠弯曲杆菌在选择性培养基上具有两种类型;一种菌落不溶血,灰白色.     

牛附红细胞体病双抗体夹心ELISA诊断方法的建立

用过碘酸钠改良法制备酶标抗体,建立了从血液中检测奶牛温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA。试验结果表明:抗体最适包被量为156μg/mL;酶标抗体最适工作浓度为1∶400;抗原及酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃、1 h;封闭液为5%犊牛血清;底物显色时间为15 min;对温氏附红细胞体抗原的最低检出量为6.64μg/mL;全血及带有附红细胞体的红细胞与纯化抗体反应的最大稀释倍数分别为1∶160和1∶40,可按照此浓度检测血液中的附红细胞体抗原。对该方法进行特异性阻断试验、交叉性试验和重复性试验,结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的诊断方法,并适合作群体检测。