牡丹春节催花品种需冷量的研究

2006、2007年对5个牡丹品种低温解除休眠的需冷量进行了研究。结果表明:低温的累积对牡丹花芽解除休眠有质的作用,根据"犹它模型"计算,胡红、紫二乔、乌龙捧盛、肉芙蓉、鲁菏红的需冷量分别为:650c.u、631c.u、672c.u、501c.u、623c.u;根据"0～7.2℃模型"计算,胡红、紫二乔、乌龙捧盛、肉芙蓉、鲁菏红的需冷量分别为:562h、627h、661h、515h、627h。"犹它模型"更适合于菏泽地区应用。     

三种不同衰老类型牡丹叶片叶绿素荧光特性的比较

以三种不同衰老类型的牡丹品种卷叶红、大胡红和肉芙蓉为试材,比较其叶片在不同时期的强光下叶绿素荧光特性的差异,探讨牡丹叶片光抑制发生的机理和叶片衰老差异的原因。结果显示,7月中旬至8月下旬,与大胡红和肉芙蓉相比,卷叶红的PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ电子传递量子产率(PSⅡ)和光化学猝灭系数(qP)下降较小,且保持了较高的非光化学猝灭系数(NPQ)。表明叶黄素循环的热耗散迅速增加,提高了对强光的适应,而可逆失活和不可逆破坏则加重了光合机构的损伤,这造成了衰老的先后次序为肉芙蓉、大胡红、卷叶红。Fv/Fm、NPQ、qP和PSⅡ对光强响应的差异明显,使之可以作为鉴定耐光抑制能力大小的指标。     

转基因植物的筛选与检测

近年来,转基因的研究进展很快,对转基因植株进行筛选检测是基因转移的必须环节。本文综述了转基因中选择试剂的种类和应用范围;转基因植株的检测方法。Ｋａｎ抗性基因、Ｇｕｓ基因、Ｂａｒ基因是可安全使用的选择标记基因,其它选择基因的安全性尚待进一步评价。Ｇｕｓ基因可检测外源基因的表达部位,可作为首选的报告基因。ＰＣＲ是早期检测的较好方法。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交特异性强,可以研究外源基因的整和状态、位置数及外源基因的完整性和稳定性,因而应用最多。Ｗｅｓｔｅｒｍ杂交结果与性状表现有直接关系。     

牡丹新品种‘福照粉蓝’

‘福照粉蓝’是观赏牡丹种子经过⁶⁰Co-γ射线辐射诱变后选育出的新品种。株形高大,直立;花蕾绿色、扁圆;花浅紫色,微带蓝色(RHS-75D),菊花型;花态直上,高于株丛,花径15 cm×7 cm;在山东省菏泽市4月中旬盛花。适宜栽培区域包括华东、华中、华北及西北等地。     

牡丹PsAP1基因的表达分析及功能鉴定

为进一步探讨MADS-box基因家族在牡丹花器官发育和开花时间调控中的功能提供理论依据,为培育早花品种提供候选基因。以RACE扩增获得Ps AP1基因的全长c DNA为基础,分析了其表达模式和功能,以牡丹课题组利用454测序得到的类AP1基因的部分c DNA序列为基础,利用RACE扩增方法获得1 130 bp牡丹Ps AP1基因全长c DNA,同源性分析表明,牡丹Ps AP1与葡萄Vv AP1的相似性最高,为80.4%。实时定量PCR分析了其初花期的表达模式,结果表明,Ps AP1基因在萼片中转录量最高,其次为花瓣,在雄蕊中表达量最低。将Ps AP1基因在拟南芥中异源表达,分析鉴定了3个转基因株系的表型,结果发现异源表达Ps AP1拟南芥开花时间较野生型提前了约3 d。     

牡丹休眠相关基因PsGRASs筛选、克隆和表达特性分析

通过筛选、克隆牡丹PsGRASs基因并进行表达模式分析,初步解析其是否参与牡丹休眠解除,以期为牡丹反季节催花提供候选基因。利用HMM(Hidden Markov Model)模型,基于GRAS基因家族的种子(Pfam号为PF03514)序列,利用BioEdit软件对牡丹花芽休眠的454测序转录组数据进行本地检索,筛选到2个具有GRAS结构域的序列。通过RACE扩增得到了其全长cDNA,其中PsGRAS1序列为2 308 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1 848 bp,编码615个氨基酸;PsGRAS2为2 034bp,ORF为1560bp,编码518个氨基酸,两个编码PsGRASs蛋白的同源性为19.87%。进化树结果表明,PsGRAS1蛋白与拟南芥GRAS家族中的DELLA亚家族的GAI和RGLs聚到一个大的分支,PsGRAS2蛋白与拟南芥HAMs(AtSCL6/15/22/26/27)并为一支,说明PsGRAS1和PsGRAS2来自GRAS家族的两个不同分支。组织表达结果显示PsGRAS1和PsGRAS2在牡丹初花期不同组织中表达水平不同,PsGRAS1在叶中表达水平最高,在雄蕊中最低;而PsGRAS2在苞片中表达水平最高,在花瓣中最低。在牡丹花芽休眠解除过程中,PsGRAS1呈下调趋势,低温28 d表达水平最低,而PsGRAS2呈先上调后下调趋势,低温14 d表达水平最高。在外源GA3处理7 d的牡丹花芽中,PsGRAS1的表达显著下降,而PsGRAS2显著提高。这表明PsGRAS1和PsGRAS2都参与了休眠过程,但功能不同。     

莱芜生姜根状茎再生植株的研究

以莱芜生姜的根状茎为外植体 ,研究了利用根状茎再生植株的适宜培养基及影响其分化率的主要因素。结果表明 ,以MS附加BA 3 0mg/L和NAA 0 6mg/L的培养基根状茎分化率最高 ,可达 6 9 4 %。用催芽 30天左右的根状茎再生率最高。外植体接种密度以 4块 /瓶为宜。     

分子标记技术及其在作物育种中的应用

论文综述了分子标记的基本类型及其在作物遗传育种中的应用,分析了应用过程中存在的问题,提出了解决的方法,并讨论了其应用前景。     

牡丹花芽休眠解除进程中碳氮比的变化与低温处理时间的关系

以牡丹‘鲁荷红’花芽为材料,对不同低温处理的牡丹花芽的4种营养物质的含量进行测定,同时测定淀粉水解酶和谷氨酰胺合成酶的活性。目的是探索其变化趋势与牡丹休眠解除的相关性。试验结果表明,在牡丹花芽休眠解除过程中,淀粉、可溶性糖与可溶性蛋白质均有不同程度的增加;但是基本打破休眠时,即低温15天时可溶性蛋白含量有所降低,打破休眠后,又恢复含量;而游离氨基酸的量变化不明显,整个过程趋于稳定。其花芽的总体碳氮比,在未感受低温时,比值较低,感受低温后的花芽其总体的碳氮比持续处于较高的水平,并趋于稳定。在牡丹花芽休眠解除过程中,淀粉水解酶活性持续缓慢升高,可溶性糖含量升高,碳水化合物积累,是碳氮比升高的重要原因。谷氨酰胺合成酶活性呈现先升高后下降的趋势, 在感受低温15天时达到最高值。     

玉米自交系亲缘关系的SSR分析

了解玉米自交系亲缘关系,可明确自交系系谱及所属的杂种优势群,为玉米杂交育种亲本选配提供指导。选用了分别位于10对染色体上的30对引物对35份玉米自交系（部分为改良自交系）进行了SSR（simple sequence repeat）分析。通过银染检测,在35份自交系中共检测出299个等位基因变异,变幅4-19个,平均9.97个;多态性信息量为0.869-0.108,平均为0.593。利用UPGMA（Unweighted pair groupmethod arithmetic averages）法将供试自交系划分为5类,并将改良自交系归入相应优势群。该划分结果与根据地理来源、种质系谱的分类结果基本一致,利用SSR进行玉米自交系亲缘关系分析是准确可靠的。分子标记辅助的自交系改良将成为玉米品种改良的重要途径。