猪瘟病毒多表位基因的表达及其免疫原性分析

体外表达猪瘟病毒(CFSV)T、B细胞表位,并对表达产物的免疫原性进行分析.人工合成CFSV的多个T、B细胞表位及表位之间的连接linker基因,并将该基因插入pGEX-6P-1表达载体,经酶切和测序鉴定获得重组阳性克隆,成功构建了CFSV复合多表位抗原基因的原核表达质粒pGEX-BT500,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,纯化表达产物并免疫兔.结果:通过IPTG诱导目的基因可高效表达,SDS-PAGE结果表明,以终浓度为0.9 mmol· L-1的IPTG进行诱导,7h后表达量最高,产物分泌表达,相对分子质量约43 ku,表达产量约占菌体总蛋白的30％.Western blotting检测表明,表达的融合蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应;兔攻毒试验表明所免疫表达产物可保护(根据发热反应评价)兔.结果表明表达获得的产物具有良好的反应原性,这为应用该融合蛋白制备CSFV免疫血清学诊断试剂和多表位疫苗研究奠定了基础.     

猪瘟病毒C株(脾淋毒)全长cDNA分子几个突变位点的重组改造

采用RT-PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从试验感染兔脾组织的总RNA中得到了猪瘟病毒(CSFV）C株全长cDNA的3个待改造片段，分别克隆于pMD18-T载体后进行测序。用重组技术分别从前期构建的5′半长cDNA或3′半长cDNA中替换F1、F3和F51，构建成2个新的半长cDNA，进一步连接成新的全长cDNA，经测序证实全长cDNA中3个致死性突变位点均得到改正。初步鉴定证明该全长cDNA具有感染性。为猪瘟病毒C株反向遗传操作系统的建立奠定了基础。     

影响牧草植物量形成的因素

牧草植物量的形成受许多因素的影响,其中以降水和温度最为显著。在高寒地区,牧草植物量受气温影响最大;而在干旱地区,降水的作用最为突出,气温则次要。除此之外,它还受土壤、放牧强度、刈割、施肥、焚烧等的影响。就这些因素作一简要的介绍,为今后有关植物量的研究提供了一个比较系统的认识和依据,对指导牧草生产具有重要的意义。     

琯溪蜜柚幼果嫁接技术

溪蜜柚幼树营养生长特别旺盛 ,枝条粗壮 ,较难形成花芽 ,导致幼树花量偏少 ,结果率偏低 ,结果少或不结果树占 5 %～ 10 %,多的 5 0 %以上。笔者从 1996年开始探索柚幼果嫁接技术 ,经过几年的不懈努力 ,嫁接成活率由起初的 2 5 %逐年上升到 95 %以上 ,嫁接成活后幼果能正常生长发育并成熟 ,果形和品质保持品种原有特性 ,幼果嫁接技术投资少 ,见效快 ,是广大果农增产增收的有效途径。1　嫁接时期　幼果嫁接时期为每年 5月中下旬至6月上旬 ,柚树正处于第二次生理落果时期 ,幼果直径在 2 5～ 5cm时嫁接效果最佳。2　接穗处理　每年 5月中旬至 …     

吸盘式排种器几个基本参数的试验研究

本文介绍了一种适于茄子、青椒、西红柿、黄瓜等4种蔬菜种子精密播种的吸盘式排种器。通过正交设计的试验方案对其中几个基本参数进行了试验研究,并分析得出了各因素的最优组合。经试验验证,该排种器具有单粒率高、空穴率低、重播率低等优点。     

无限风光惹人醉——莱阳市加快农技成果向现实生产力转化拾零

一个芋头能长到0.25公斤,一只莱阳梨重量可达0.8公斤,一棵大白菜足足20公斤……这些都不是天方夜谭,它就实实在在地发生在我们身边。这一现代科技的成果,是莱阳市坚持自身开发和引进先进技术相结合,把科技成果转化为现实生产力所带来的丰厚馈赠,它给农业的生产和种植方式带来了革命性的变化。把农业科技摆在突出位置 莱阳是一个农业大市,但长期     

基于超越对数生产函数的黑龙江省农业经济增长动力因素分析

为促进黑龙江省农业经济增长,完善农业生产要素配制机制,本研究基于柯布—道格拉斯生产函数,以农业资本投入、农业劳动力投入、农业土地投入和农业中间投入4个生产要素为变量,建立超越对数生产函数,应用因子分析法去除自变量间的多重共线性,岭回归法求解模型参数,确定各个影响因素的系数。并利用本文所提方法对黑龙江省2006-2016年的相关数据进行分析。结果表明:黑龙江省正朝着农业现代化快速发展,但要素配置协同匹配水平不高,农业中间投入利用率高于农业资本投入,劳动力投入和土地投入;农业中间投入和农业劳动力投入在黑龙江省农业生产活动中的地位较高,对经济发展的贡献较大;要素间技术进步差异较小,其中农业土地投入和农业中间投入技术进步较高。     

硬雀麦(Bromus rigidus Roth)种子萌发吸水特性和萌发温度的研究

对硬雀麦种子萌发吸水特性与不同温度处理下的萌发进行研究,结果表明:硬雀麦种子萌发吸水过程大致可分为3个阶段,吸水速度呈先快后慢的趋势,在2 h时达最大值0.091 8 g/h,8 h后就达到吸胀饱和,种子萌发最低吸水量占种子干重的53.03%。硬雀麦种子在20℃恒温条件下萌发状况好,发芽率达97.5%。发芽指数以25℃下最高,为90.08,其次为20℃,为89.32,两者差异不显著。从活力指数看,20℃恒温条件下的活力指数最高,达1 656.89,与其它各温度处理之间差异极显著。综合发芽率、发芽指数和活力指数最后确定硬雀麦的最适发芽温度为20℃。当温度升高到35℃时硬雀麦种子发芽明显受阻,但可耐5℃的低温。     

酸铝胁迫下红三叶种质萌发期和幼苗期生长特性及综合评价

为评价红三叶种质耐酸铝能力强弱,以30份国内外红三叶种质材料为对象,研究其萌发期和幼苗期不同Al³⁺浓度胁迫下的生长特性,并根据灰色理论对红三叶耐酸铝性进行综合评价。结果表明：随着Al³⁺胁迫浓度的增加,红三叶相对发芽率逐渐降低,胚根变短,变粗;相对于发芽率,胚根对Al³⁺胁迫更为敏感,在4 mmol/L的Al³⁺胁迫下,胚根长度仅为对照的0.16倍。红三叶幼苗能够耐受20 mmol/L的Al³⁺胁迫,但在酸铝胁迫下其根系和茎叶生长受到抑制,相对根总长度、相对根表面积、相对根体积、相对根尖数、相对地上生物量、相对地下生物量、相对叶绿素含量及相对绿叶率均显著降低。不同浓度间红三叶各性状差异显著,2 mmol/L和10 mmol/L的Al³⁺浓度可分别作为红三叶萌发期和幼苗期耐酸铝评价的处理浓度。幼苗期的相对根表面积、相对根尖数、相对叶绿素含量和相对绿叶率可以作为红三叶耐酸铝评价的关键指标,其模型预测值与综合评价值显著相关。聚类分析可将30份红三叶种质聚类为3...     

猪繁殖与呼吸综合症GP5蛋白的纯化与免疫活性分析

1材料与方法1．1表达菌及试剂猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）6P-1-GP5表达质粒由该实验室保存。Novagen蛋白纯化试剂盒、硝酸纤维素膜（NC膜）均购自华美公司;弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂购自Sigma公司;辣根酶标记兔抗猪IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司;其他常规试剂均由国内生产。试验用豚鼠由中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物厂提供,体重400-500g,共8只。