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猪主要RNA病毒病多重二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对Genbank登录的CSFV、PRRSV和JEV的核苷酸序列进行比对分析,找出CSFV的E2基因,PRRSV的Nsp2基因和JEV的E基因为相对保守区域[1]。利用生物学软件在保守序列分别设计一对引物,通过对PCR反应条件的优化,确定了最佳引物浓度、最佳Mg2+浓度和最佳退火温度,建立了多重二温式PCR方法检测CSFV、PRRSV和JEV。其扩增的目的片断大小分别为CSFV(482 bp)、PRRSV(576 bp)和JEV(375 bp),将传统三温式PCR过程中的退火与延伸合并为一步,从而大大节省临床检测时间,同时又能通过一个反应体系对CSFV、PRRSV及JEV三种猪主要RNA病毒病进行检测。用50份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。 相似文献
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1999 年1 月~2 月间四川绵阳市江油河西镇一带的肉鸡蛋鸡先后出现以头部( 颜面及眼眶周围) 肿胀为特征的疾病,其死亡率不等。根据现场综合诊断( 流行病学、症状、尸体剖检)和实验室检查( 细菌学检验) 诊断为传染性鼻炎,用链霉素和恩诺沙星治疗以及用传染性鼻炎疫苗进行免疫接种,均取得了良好的效果。 相似文献
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鸡传染性鼻炎的诊断及防制 总被引:1,自引:0,他引:1
四川绵阳市江油河西镇一带的肉鸡及蛋鸡先后出现以头部(颜面及眼眶周围)肿胀为特征的疾病,其死亡率高低不等。根据流行病学、症状、尸体剖检和实验室检查诊断为传染性鼻炎,用链霉素和恩诺沙星治疗,以及用传染性鼻炎菌苗进行免疫接种,均取得了良好的效果。一、流行情... 相似文献
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以猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)主要中和表位所在的糖蛋白GP5为模式抗原,采用肌肉注射、皮下注射和滴鼻免疫方式免疫6~8周龄ICR小鼠,利用间接ELISA检测血清抗体,MTT法检测淋巴细胞增殖.结果表明:三免后GP5弗氏佐剂乳化组小鼠血清抗体的水平最高,LTB+GP5免疫组的抗体水平显著高于单独GP5免疫组,肌肉注射免疫组的抗体水平明显高于皮下注射组,滴鼻免疫组没有检测到特异性血清抗体;各GP5免疫组均能不同程度地诱导脾脏B淋巴细胞增殖,其中GP5弗氏佐剂乳化组、LTB+GP5肌肉注射和LTB+GP5皮下注射组B淋巴细胞增殖显著,除了GP5弗氏佐剂乳化免疫组外,其他各免疫组均无明显的脾脏T淋巴细胞增殖反应. 相似文献
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“棉花抗旱抗病增产剂一号”是河北省衡水师范专科学校郑艾玉付教授研制成功的新药剂,两年示范推广一般可增产10~14.5%。1987年冀县大面积推广同步进行系统验 相似文献
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