瓜类褪绿黄化病毒p22 基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

 以被瓜类褪绿黄化病毒（Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）侵染的甜瓜叶片为供试材 料,采用RT-PCR 方法克隆其P22 蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3 上,PCR 验证及克隆 测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22 转化大肠杆菌BL21 菌株,诱导表达,SDS-PAGE 分 析表明,经IPTG 诱导,p22 基因在大肠杆菌BL21 中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家 兔,制备了CCYV P22 的特异性抗血清。ACP-ELISA 检测结果表明,血清效价高达1.28 × 10⁵。Western blot 检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV 侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22 蛋白。     

不同小麦品种(系)对禾谷孢囊线虫病的抗性鉴定

为了筛选抗小麦禾谷孢囊线虫的小麦材料,通过大田小区试验,对10个具有优良农艺性状的小麦品种(系)抗孢囊线虫病性能及产量进行了鉴定,结果表明:各供试品种(系)抗病程度和小麦产量存在明显差异,但未发现免疫品种。其中CD01最为抗病,平均病指为19.3;豫展1号和CD992005发病最重,平均病指分别高达41.6和40.0。且产量明显低于其他品种。株孢囊数与植株感病程度和产量高低之间的关系并不完全一致。     

烟草花叶病毒株系研究进展

烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus TMV)是烟草花叶病毒属病毒的典型成员,其寄主范围非常广泛,能侵染茄科、藜科、苋科、葫芦科、十字花科、番杏科、豆科和商陆科等共30科300多种植物[1]。在不同的寄主上,TMV有许多不同的株系,在我国主要有普通株、番茄株、车前株、豆类株、葫芦科株、兰花株和U2株等[2]。近十几年来,从不同寄主植物上不断分离鉴定到TMV的不同株系或分离物,在TMV不同株系的基因组序列分析和基因功能研究方面也取得了很大的进展,简述如下。1现已报道的TMV株系烟草花叶病毒株系的种类非常多,在同一寄主上可以有不同的…     

抗病毒RNA沉默和病毒拮抗RNA沉默策略研究进展

RNA沉默通指在转录或转录后水平上由RNA介导、序列特异性地降解靶标RNA从而抑制基因表达的过程。在动物、真菌和植物中,RNA沉默是通过小RNA的形成来抵御病毒侵染的,病毒自身可以作为RNA沉默的诱导子和靶标。病毒通过进化形成积极的和消极的策略来对抗RNA沉默。为此,主要讨论了siRNAs和miRNAs介导的抗病毒RNA沉默以及病毒蛋白和RNA介导的沉默抑制作用,有助于阐明病毒侵染与寄主之间的相互关系,为抗病毒研究奠定基础。     

拮抗菌96-79抑菌物质的理化特性研究

拮抗菌96-79发酵产生的抑菌物质对多种植物病原菌具有较强的抑制活性,本试验对其理化性质进行了研究。结果表明,该抑菌物质可耐120℃高温20 min,4℃下可保存半年以上,在pH值为1～7时抑菌活性稳定,可溶于甲醇和水,分子量主要分布在50000～100000 Da之间;抑菌物质中除含有蛋白成分外,还可能含有其它类型的抑菌物质。     

河南省花生网斑病的初步研究

通过对病原的分离培养和回接、鉴定,明确了河南省花生上发生的一种新的叶斑病是由花生茎点霉(Phoma arachidicola Marasas,Pauer & Boerema)所致的网斑病。观察了该病的症状和病原形态。经室内抑菌测定和大田防病试验,明确了80％新万生和70％代森锰锌500倍液对该病有很好的防治效果。     

河南省小麦全蚀病菌变种类型鉴定

为了解河南省小麦全蚀病菌的变种类型,2011年从河南省郑州、许昌、开封、周口、漯河、商丘和驻马店等地采集小麦全蚀病株,并对其所属的变种类型进行了形态学、生理学和分子生物学鉴定。经过分离、纯化,共得到74个菌株,根据形态及生理特性的测定结果,初步确定所有菌株均为禾顶囊壳小麦变种(Gaeumanomyces graminis var.tritici)。采用小麦全蚀病菌4个变种的特异性引物分别对菌株DNA进行PCR扩增,所有菌株均获得大约870bp的条带,进一步确定所采菌株为禾顶囊壳小麦变种。温室测定74个菌株对小麦的致病力,结果表明,河南省小麦全蚀病菌株以中强致病力为主,不同地区菌株间致病力存在显著差异。     

豫花14号、15号主要病虫害防治技术

豫花 1 4号和豫花 1 5号是河南省农科院棉花油料作物研究所新近培育的花生新品种 ,在生产上表现高产优质 ,深受农民欢迎。两个品种虽然综合抗性明显优于当前推广的其它品种 ,但在生产中仍然有一些病虫危害。近年来我们对豫花1 4号、1 5号病虫害发生情况进行了调查 ,并针对主要病虫害进行了防治研究 ,总结如下。1　蛴螬蛴螬为金龟子的幼虫 ,是目前花生上危害最大的害虫 ,主要取食花生荚果和根 ,虫量多时可成片将荚果和根吃光 ,严重影响产量 ,有些地方由于蛴螬危害花生损失达 5 0 %以上。蛴螬在重茬地块以及大量施用未腐熟有机肥的地块发生较…     

不同西瓜品种对枯萎病抗性鉴定

西瓜枯萎病是影响西瓜生产的主要问题，种植抗病品种是防治的一项主要措施。通过人工接种室外盆栽试验，对16个西瓜品种进行了抗枯萎病鉴定，明确了不同西瓜品种抗病性的强弱，其中豫艺57、农抗1号、早抗3号、西农8号、郑抗1号和台湾黑宝等品种抗病性较强，病情指数分别为20.0、21.5、22.3、23.2、23.9、25和28.2；郑杂5号、9925、春宝，9909最为感病，病指均在50以上。     

瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

 根据已报道的瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus, CCYV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法从感病甜瓜中扩增得到长度为753 bp的CP基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-3上,获得重组载体pGexCP,在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了CCYV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,当CP蛋白浓度为2.5 μg/mL时,血清效价高达5.12×10⁵。Western blot分析表明制备的抗体检测CCYV侵染的甜瓜叶片得到特异性的条带,表明该抗体的特异性较好。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甜瓜病样的检测。本试验为CCYV的快速检测提供了重要的研究材料。