蓬蘽茎段与叶片培养及其植株再生

以蓬蘽带腋芽的茎段为外植体,研究了HgCl2处理时间对消毒效果的影响、不同激素浓度和继代培养次数对增殖效果的影响以及不同浓度NAA对生根的影响,同时研究了基本培养基种类、植物生长调节剂配比以及光照强度对叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明,以75%酒精浸泡45 s,再用0.1%HgCl2处理8 min为最好的消毒方法,污染率为31.58%,褐化率为21.06%,存活率为52.63%;最佳芽增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,增殖系数最高可达9.22;继代培养次数越多,增殖效果越好;正交试验筛选出叶片不定芽再生的最佳培养基为MS+TDZ 2 mg/L+NAA0.5 mg/L;适宜生根的培养基为1/2MS+NAA0.01 mg/L,生根率为100%,平均生根数11.13条,平均根长3.95 cm。     

基于高通量测序的金钗石斛叶转录组数据分析

本研究采用Illumina Hiseq4000对金钗石斛(Dendrobium nobile)叶转录组进行测序,共获得5.6 Gb数据。组装并去冗余后得到61 998个Unigene,其总长度,平均长度,N50以及GC含量分别为53 773 338 bp、867 bp、1 482 bp和43.09%。将Unigene比对到七大功能数据库进行注释,最终分别有34 250(NR:55.24%),28 010(NT:45.18%)、22 029(Swissprot:35.53%)、13 384(COG:21.59%)、25 754(KEGG:41.54%)、7 731(GO:12.47)以及25 407(Interpro:40.98%)个Unigene获得功能注释。在KEGG数据库中,注释上的与碳水化合物代谢、萜类和黄酮类化合物代谢、以及多糖合成相关的Unigene分别有2 819个、706个和559个。根据注释结果共检测出34 096个CDS,未注释上的Unigene使用ESTScan预测后获得2 108个CDS。检测出7 165个SSR分布于6 264个Unigene中,其中在不同重复基序类型中,出现频率最高的为AG/CT,其次是AAG/CTT、AT/AT和AGG/CCT。同时,预测出1 234个编码转录因子的Unigene。该转录组测序分析为金钗石斛次生代谢和转录组方面研究提供了一定的理论参考。     

不同品种黑莓在南京地区的生长表现

为了给黑莓品种的鉴定和栽培措施的制定提供科学依据,对11个黑莓品种在南京地区的生长情况进行了调查和分析。结果发现,黑莓功能叶片中叶绿素含量平均为(40.87±4.84)spad,同一品种在不同生长期其叶绿素含量比较稳定,而不同品种却存在着较大的差异。复叶大小平均为(1.51±0.25)dm2,品种间差异显著,其中Chester品种的最大,Triple Crown的最小,前者是后者的1.65倍。小叶数量和单株叶面积分别平均为(4 815±3 880)片和(7.65±5.94)m2,品种间差异极显著,其中Kiowa品种的叶片数量最多,其单株叶面积最大,单株叶面积平均为(22.92±6.72)m2,远远高于其它品种。枝蔓数量和年生长量分别平均为(26.32±10.92)支和(2.14±1.52)dm3,品种间差异也达到了极显著水平,枝蔓发生数量最多的品种也是Kiowa,最少的品种是Young,后者数量不到前者的1/4;Kiowa和Triple Crown这2个品种的枝蔓年生长量最大,Young品种的年生长量最小,前者是后者的10余倍。     

氨基酸水溶肥与菌剂配施对松花菜生长及土壤生态特征的作用效果

为研究氨基酸水溶肥、微生物菌剂单施及其配施对设施松花菜生长及其土壤生态特征的作用效果,本研究采用田间小区试验,试验设置5个处理(CK.对照(不施肥);M.施用菌剂;A.施用氨基酸水溶肥;AM.氨基酸水溶肥与菌剂配施;F.常规施肥),在松花菜成熟期测量经济产量、生物产量与土壤生态特征指标。结果表明:1)处理AM的经济产量最高,比对照显著提高了46.07%,增产效果最好,同时,配施处理的松花菜经济系数、肥料农学效率均达到最高;2)菌剂处理M和配施处理AM对提高土壤速效钾含量、速效磷含量以及土壤碱性磷酸酶活性效果较好,氨基酸水溶肥处理A和配施处理AM可有效提高土壤蔗糖酶活性;3)处理AM大幅增加了土壤微生物种群的丰富度,而常规施肥处理的土壤微生物丰富度指数和多样性指数均大幅降低,同时,不同施肥处理之间土壤菌群结构上产生了较大的变化,形成了常规处理下以海单胞菌属为优势菌,其余处理以假单胞菌属为优势菌群的分布特征。本试验结果表明氨基酸水溶肥与微生物菌剂配施在设施松花菜上推广应用是可行的。这项施肥技术不仅显著提高了松花菜的经济产量、肥料农学效率,还活化了土壤磷钾养分,替代了部分化肥的投入,提升了土壤生物指标,达到了设施蔬菜节本增效的目的。     

煤矿区土壤PAHs含量特征及来源解析

我国土壤PAHs污染日益严重且来源较为复杂,为探明煤矿区土壤PAHs的污染情况,确定其污染来源,本试验通过在煤矿区不同点位采集表层土壤样品,并以该区未受PAHs污染的土壤样品作为对照,用气相色谱—质谱方法测定土壤中16种多环芳烃(PAHs)的含量,结合比值法、聚类分析法及其复合分析方法探讨PAHs污染土壤的来源。结果表明:煤矿区各采样点农地土壤中萘(Naph)、苯并(g,h,i)苝(BghiP)、茚并(1,2,3-cd)芘(InP)、二苯并(a,h)蒽(DbA)、苯并(b)荧蒽(BbF)、荧蒽(Flt)、苯并(a)蒽(BaA)、(Chry)、芘(Pyr)、苯并(a)芘(BaP)和苯并(k)荧蒽(BkF)含量基本达到了对照的5倍以上,人为影响较大。在空间分布上,萘(Naph)、芴(Flu)、菲(Phe)、蒽(Anth)和二苯并(a,h)蒽(DbA)为分异型,而其余PAHs则属于强分异型,不同采样点之间PAHs空间差异较大。比值法解析PAHs的来源结果表明,该煤矿区农地土壤PAHs主要来源于焦化厂、钢厂等工厂加工的煤、石油等化石燃料燃烧以及交通车辆燃烧源的燃烧。聚类分析法结果表明,PAHs来源主要包括石油泄漏、化石燃料(石油和煤)燃烧的燃烧源以及交通尾气排放;通过两种方法联合将不同污染水平点位进行功能分类的基础上,对煤矿区不同方位上PAHs的来源进行了细化分析认为,煤矿区北部、中部、南部区域土壤PAHs可能多受石油等化石燃料燃烧影响,而西部偏北方向土壤PAHs可能更多受生物质及煤炭等燃料燃烧影响。     

2007年中国部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学分析

 【目的】对采集自上海、江西、山东、江苏、河南和湖南等省的257份进行了PCV2的检测,确定中国PCV2感染情况及分子特征。【目的】设计一对针对PCV2 ORF2的引物,利用PCR对其进行PCV2基因组的检测,对PCV2阳性的样品,进行了ORF2的克隆、序列测定和分析。【结果】结果显示PCV2阳性率为24.51%（63/257）,并能从健康猪群中检测的阳性;各PCV2分离株间ORF2核苷酸序列同源性为84.4%～100%,氨基酸同源性为82.5%～100%,与所属群的不同而不同。【结论】中国有2个群的PCV2毒株在流行,以PCV2b群为主（70.97%,22/31）,但也有PCV2a群毒株（29.03%,9/31）的流行,同时PCV2流行的基因型没有明显的地域间差异。部分毒株符合高致病性PCV2的特征,暗示中国已存在高致病性PCV2的流行。     

玉米大斑病菌StCHS6的基因结构及表达规律分析

为了阐明玉米大斑病菌几丁质合成酶基因StCHS6在病菌生长发育及致病过程中的作用,克隆并解析了该基因及其编码蛋白的结构特征,明确了该基因在病菌生长发育过程中的表达模式。在玉米大斑病菌1号小种菌株01-23中克隆StCHS6,利用生物信息学手段分析该基因的结构特征,并利用已有的病菌重要发育阶段的RNA-Seq数据库信息,明确该基因的表达模式。结果发现,StCHS6位于病菌基因组scaffold_1:2066293-2069876(-)的位置,基因全长为3 584 bp,含有4个内含子和5个外显子;CDS序列大小为2 703 bp,编码900个氨基酸,脂肪指数为81.86,亲水性平均值为-0.178,等电点(PI)为8.36,不稳定指数为36.94,属于碱性稳定型蛋白;保守结构域分析表明,StCHS6蛋白含有几丁质合成酶催化结构域Chitin_synth_1和多个跨膜结构域;亚细胞定位分析推测该蛋白定位于细胞膜上;RNA-Seq数据分析表明,StCHS6在菌丝、分生孢子、芽管、附着胞和侵入钉5个发育时期均有表达,但其表达量有所差异。以芽管时期的表达量为1,菌丝、分生孢子、附着胞和侵入钉时期的表达量分别为芽管时期的3.80,4.97,3.40,2.60倍。为阐明玉米大斑病菌StCHS6的基因结构特征、表达模式及功能奠定了基础。     

连翘叶精油提取、GC-MS分析及其活性研究

以连翘叶为试材,采用单因素和响应面试验方法确定了最佳超声提取条件,通过气相色谱质谱联用仪(GC-MS)对精油进行分析鉴定,同时对其抑菌活性与抗氧化活性进行了研究。结果表明:连翘叶精油最佳提取工艺条件为,液料比13∶1 mL·g~(-1),超声时间50 min,超声温度50℃,超声功率200 W,该条件下连翘叶精油的平均提取率约为1.87%。抑菌结果表明,连翘叶精油对金黄色葡萄球菌、红酵母MIC为2.0%,枯草芽孢杆菌、大肠杆菌MIC为1.5%,白地霉、灰葡萄孢、假丝酵母MIC为1.0%,黄曲霉MIC为0.5%,均有一定抑制效果。抗氧化活性结果表明,连翘叶精油具有清除DPPH·、ABTS~+·及羟自由基的能力,其抗氧化能力随着精油浓度的增加而增强。     

猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白部分片段的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立

为了建立猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体间接ELISA检测方法,该研究首先克隆了MRP编码基因的部分片段,构建了重组表达质粒pET28a-mrp,并将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,获得了58 000的重组蛋白,经Ni柱纯化后,免疫印迹显示MRP重组蛋白能够被猪链球菌2型抗体特异性识别。以纯化的MRP重组蛋白作为包被抗原,建立了猪链球菌2型MRP抗体检测间接ELISA方法。该ELISA方法的包被抗原浓度为10μg/ml,待检血清1∶50稀释,检测临床48份未免疫猪链球菌2型疫苗健康猪的血清。当效价(S/P)≥0.22时,判定待检血清样品为阳性;当S/P<0.22时,判定待检血清样品为阴性。运用建立的方法能特异性识别猪链球菌2型抗体,人工感染猪的MRP抗体于攻毒后14～28 d出现峰值,同时提示临床健康猪群的免疫功能存在个体差异。