三种复合菌对无抗全价饲料的固体发酵研究

采用副干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌及酿酒酵母对无抗全价猪饲料进行复合微生物固体发酵,对不同发酵时间含菌数、pH值、营养成分、蛋白酶、有害菌等进行了测定。试验结果表明:随着发酵时间延长,发酵产物pH值逐渐降低,在发酵5~10 d发酵饲料含菌数达到最高,此后副干酪乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母含菌数均逐渐减少,而发酵饲料中粗蛋白和小肽有增加的趋势,粗纤维含量略有降低。发酵过程中未检测到淀粉酶和植酸酶,蛋白酶和纤维素酶有检出,同时饲料中有害微生物大肠杆菌随着发酵时间延长而减少。因此,可以用副干酪乳杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌对无抗全价猪料进行三菌复合固体发酵,发酵效果以5~10 d最优。     

壳聚糖对仔猪肠黏膜通透性及Occludin和ZO-1表达的影响

旨在探讨日粮中添加壳聚糖对早期断奶仔猪肠道屏障功能的影响。将30头21d断奶仔猪((6.62±0.59)kg)随机分为3组,预试期采用大肠杆菌攻毒(109细胞.头-1),对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加50mg.kg-1金霉素和300mg.kg-1壳聚糖,饲养期21d。结果表明,与对照组相比,壳聚糖能降低血浆中D-乳酸(D-Lactate)含量(P<0.05)、二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05)和血清内皮素-1(ET-1)水平(P<0.05),但对血清一氧化氮(NO)含量无明显影响(P>0.05);免疫组化结果显示,壳聚糖组空肠黏膜Occludin(P<0.01)和ZO-1(P<0.05)蛋白表达提高;荧光定量PCR结果表明,壳聚糖组空肠黏膜Occludin(P<0.01)和ZO-1(P<0.05)mRNA表达丰度升高。结果说明,日粮中添加300mg.kg-1的壳聚糖能降低早期断奶仔猪小肠黏膜屏障功能的损伤作用。     

白僵菌生产中防霉剂的应用研究

为了解决白僵菌固体培养时易遭受霉菌污染问题,以玉米螟白僵菌ABUV–3和松毛虫白僵菌DBUV–7为供试菌株,对40%克菌灵等5种防霉剂进行了系列研究。结果表明:5种防霉剂对毛霉菌、木霉菌、根霉菌、绿霉菌和黄曲霉菌的孢子和菌体均有抑制作用,其中以70%菌绝杀可溶性和绿霉霸粉剂的抑制效果最好;虽然5种防霉剂直接作用时会对白僵菌的孢子萌发产生抑制作用,但在固体培养生产孢子时添加一定量的防霉剂,对孢子产量及其萌发并没有抑制作用。因此,建议在白僵菌生产过程中,在固体培养基中添加70%菌决杀和绿霉霸粉剂500倍液(折合剂量为2 mg/m L),用以抑制霉菌的污染。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染饲粮对断奶仔猪血液生理生化指标的影响及竹炭和竹醋液的干预作用

本试验旨在探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)污染饲粮中添加竹炭和竹醋液对断奶仔猪生长性能、血液常规指标、血清生化指标及脏器指数的影响。试验选用28头35日龄、平均体重为(12.10±1.12)kg的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为4个组,分别为对照组(基础饲粮)、DON组(基础饲粮+DON)、竹炭组(基础饲粮+DON+2%竹炭)、竹醋液组(基础饲粮+DON+1%竹醋液),每组7个重复,每个重复1头猪。试验期为37 d。结果表明:1)与对照组相比,DON组断奶仔猪平均日增重(ADG)显著降低(P<0.05),料重比显著升高(P<0.05);与DON组相比,竹醋液组断奶仔猪ADG、平均日采食量(ADFI)有提高趋势(P>0.05),料重比有降低趋势(P>0.05)。2)在试验第15天,血液红细胞数量,DON组显著低于对照组(P<0.05),竹炭组与对照组相比差异不显著(P>0.05),竹醋液组显著高于对照组和竹炭组(P<0.05);红细胞比积,DON组和竹炭组显著低于对照组(P<0.05),竹醋液组与对照组相比差异不显著(P>0.05);在试验第30天,血液常规指标4组之间无显著差异(P>0.05)。3)血清免疫球蛋白M、葡萄糖含量及乳酸脱氢酶和谷草转氨酶活性,不论是在第15天、第30天还是在第37天,4组之间差异均不显著(P>0.05)。试验第15天,血清谷丙转氨酶活性,DON组和竹醋液组显著高于对照组(P<0.05),竹炭组与对照组相比差异不显著(P>0.05);试验第30天,血清总蛋白含量,DON组显著低于对照组和竹醋液组(P<0.05),竹炭组、竹醋液组与对照组相比差异不显著(P>0.05);试验第37天,血清尿素氮含量,DON组显著高于对照组和竹醋液组(P<0.05),但竹炭组、竹醋液组与对照组相比差异不显著(P>0.05)。4)DON组、竹炭组和竹醋液组肝脏、肾脏、胰脏、脾脏、心脏、胆囊、胸腺指数与对照组相比差异不显著(P>0.05);DON组肝脏指数有升高的趋势,但差异不显著(P>0.05)。结果提示:1)DON降低仔猪生长性能,而添加1%竹醋液有改善的作用。2)DON对断奶仔猪前期影响较大,后期断奶仔猪适应程度相对提高,有一定的耐受能力。3)DON可导致血细胞数量减少,血清谷丙转氨酶活性和尿素氮含量升高,总蛋白含量降低,添加2%竹炭和1%竹醋液,血细胞数量及血清谷丙转氨酶活性、尿素氮和总蛋白含量等指标可恢复到正常水平,表明竹炭和竹醋液对DON导致的负面影响具有一定的缓解作用。     

黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响

本试验旨在研究黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响。选择200只初始体重相近的健康22日龄湘黄肉鸡,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上分别添加0.10、0.20、0.30和0.40 g/kg黄芩素。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,22~42日龄,0.20 g/kg黄芩素组平均日采食量(ADFI)显著降低(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组ADFI显著增加(P<0.05),各试验组平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和死亡率均无显著差异(P>0.05);43~63日龄,各试验组ADFI均显著降低(P<0.05),而ADG、F/G和死亡率均无显著差异(P>0.05);22~63日龄,0.20 g/kg黄芩素组ADFI和F/G均显著降低(P<0.05),0.40 g/kg黄芩素组ADG显著降低(P<0.05),各试验组死亡率均无显著差异(P>0.05)。2)与对照组相比,0.20 g/kg黄芩素组血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著增加(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组血清IgA和免疫球蛋白G(IgG)含量均显著增加(P<0.05);各试验组血清白细胞介素-2(IL-2)含量均显著增加(P<0.05),而血清免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均无显著差异(P>0.05)。3)与对照组相比,0.10和0.20 g/kg黄芩素组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著增加(P<0.05),各试验组血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H 2O 2)和丙二醛(MDA)含量均无显著差异(P>0.05);0.20 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC和T-SOD活性均显著增加(P<0.05),0.10 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC显著增加(P<0.05),各试验组肝脏H 2O 2含量均显著降低(P<0.05),而肝脏GSH-Px活性、GSH和MDA含量均无显著差异(P>0.05)。4)与对照组相比,0.30 g/kg黄芩素组血清总胆固醇(TC)含量显著降低(P<0.05);各试验组血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均无显著差异(P>0.05)。5)与对照组相比,0.40 g/kg黄芩素组胸肌屠宰后24 h黄度值显著降低(P<0.05);各试验组胸肌屠宰后24 h亮度值均显著降低(P<0.05),而屠宰后45 min pH与亮度、红度、黄度值以及屠宰后24 h pH、红度值、剪切力和滴水损失率均无显著差异(P>0.05)。由此可见,黄芩素可改善22~63日龄湘黄肉鸡的生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态和肉品质,综合考虑,饲粮中黄芩素的适宜添加量为0.20~0.30 g/kg。     

芽胞杆菌培养上清赖氨酸含量分析及高产赖氨酸突变株的筛选

通过传统分离培养法从动物肠道分离得到112株芽胞杆菌,其培养物通过离心过滤后采用氨基酸全自动分析仪对分离得到的100多株芽胞杆菌进行上清氨基酸分析,采用打孔法测定芽胞杆菌对大肠杆菌O8株的抑制效果,通过紫外诱变和S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸筛选对菌株进行选育。结果发现,不同芽胞杆菌菌株产赖氨酸能力相差较大,其中产赖氨酸水平高、抑菌性好的菌株枯草芽胞杆菌PA105,上清赖氨酸水平超过0.3g/L。将枯草芽胞杆菌PA105进行紫外诱变和AEC筛选,获得产赖氨酸高且抗菌的突变菌株枯草芽胞杆菌PL83,上清赖氨酸水平达到0.582g/L,几乎比常规菌株提高了1倍。     

金黄色葡萄球菌铁运输系统组成及调控作用机制

正金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)广泛存在于自然界,是人和多种动物的一种重要致病菌,可引起人和动物局部的化脓感染、肺炎、心内膜炎、败血症、脓毒症等~([1]),严重时,可引起人和动物死亡。S.aureus能够产生多种毒素,通过污染食品,引起中毒。据美国疾控中心报道,由S.aureus引起的感染位于细菌感染的第二位,仅次于大肠杆菌感染~([2])。同时S.aureus产生的肠毒素能引起食物中     

黏质沙雷氏菌次生代谢物对TMV的抑制机理

【目的】分离、纯化和鉴定黏质沙雷氏菌2A2次生代谢物中具有抑制TMV侵染力的活性成分,明确其对TMV的抑制机理。【方法】通过病毒生物学测定,确定黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV的抑制效率。为明确黏质沙雷氏菌2A2发酵液次生代谢物中抑制TMV侵染力的活性成分,通过TLC和硅胶柱层析对其发酵液进行了分离纯化,获得主要的次生代谢物,通过局部枯斑法测定各代谢物的生物学活性,筛选可显著抑制TMV侵染活性的物质,经NMR分析,确定其成分结构,进而确定物质组分。为进一步揭示代谢物对TMV的抑制机理,利用透射电子显微镜探索代谢物对TMV粒体形态的影响,TMV粒体与代谢物甲醇溶液混合30 min后,于透射电子显微镜下观察TMV粒体形态。同时,用代谢物甲醇溶液喷施处理寄主下部3片叶,共设5个处理：处理Ⅰ,喷施代谢物24 h后,接种TMV;处理Ⅱ,代谢物与等体积TMV汁液混合30 min后,接种叶片;处理Ⅲ,先接种TMV,24 h后喷施代谢物;处理Ⅳ,宁南霉素（50 μL•mL-1）与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做阳性对照;处理Ⅴ,无菌水与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做空白对照。分别在次生代谢物诱导和TMV侵染后1、3、5、7、9 d,取未经任何处理的上部叶,TRIZOL法快速提取总RNA并反转录cDNA,利用real-time RT-PCR分析样品PR基因和TMV的RNA相对表达量,进而明确代谢物处理寄主对寄主PR基因表达的影响和对TMV在寄主体内复制增殖的抑制作用。【结果】黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV具有显著的抑制作用。对其发酵液进行分离纯化,获得3种主要代谢物,通过局部枯斑法测定,编号为BJH-2的代谢物可显著抑制TMV的侵染活性,经NMR分析,确定了该代谢物为灵菌红素（prodigiosin）。透射电子显微镜结果显示灵菌红素可显著破坏TMV粒体,使TMV典型的杆状病毒粒体降解断裂成排列紊乱的短杆状。real-time RT-PCR结果表明,灵菌红素处理植株后,处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ可诱导寄主体内PR基因表达随着时间逐渐上调,第7 天左右,三者处理的寄主体内PR1、PR2、PR4、PR5表达上调至高峰,显著高于空白对照,亦高于处理Ⅳ的阳性对照,从而提高系统抗性;灵菌红素处理植株后,处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ寄主体内TMV RNA的表达量随着时间上调减缓,在接种TMV后的第9天,三者处理的寄主体内的TMV RNA含量分别是空白对照的11.98%、5.23%、15.90%,显著低于空白对照,亦低于处理Ⅳ的阳性对照。【结论】灵菌红素既对TMV在寄主体内的复制增殖具有抑制作用,又可诱导寄主产生系统抗性,整体效果高于宁南霉素,可作为防治植物病毒新的生物制剂。