大麻FT同源基因CsHd3a的克隆及表达谱分析

为探究FT基因在大麻光周期途径中调控开花的作用,从工业大麻品种庆麻1号(Q1)中使用PCR技术克隆了FT同源基因cDNA序列,命名为CsHd3a.利用生物信息方法对该基因序列特征进行了分析,并使用实时荧光定量(qRT-PCR)技术研究其组织特异性表达模式.选取了晚花品种云麻7号(Y7)与早花品种Q1使用qRT-PCR技...     

工业大麻中大麻二酚提取工艺优化和生物活性分析

为优化工业大麻中CBD提取工艺,建立CBD高效液相分析方法,评估CBD体外酶抑制活性和抗氧化活性,拟通过设计单因素实验,以溶剂种类、超声时间、料液比、提取次数为影响因素,CBD含量为评价指标优化提取工艺,并通过检测CBD对黄嘌呤氧化酶、多酚氧化酶的抑制率及ABTS自由基的清除率监测其体外酶抑制活性。结果表明:甲醇为提取溶剂、提取2次、超声10 min、料液比1:20 g/mL为最佳提取条件。生物活性实验表明CBD能明显抑制酶活,其对XOD、PPO、ABTS的C50分别为1.18μg/mL(40s)、1.03μg/mL (60s)、4.99μg/mL和1.68μg/mL。该工艺操作简单、稳定可靠、成本较低,为工业大麻花叶中CBD的提取及定性定量提供一种新的技术方法,且该方法提取的CBD酶抑制活性和抗氧化活性好,具有重要的药用价值。     

红麻HcMYB3基因克隆和表达分析

为探究HcMYB3基因在红麻中的潜在功能和盐胁迫响应规律,研究以红麻品种“中红麻21号”为试验材料,对HcMYB3基因进行同源克隆,并进行生信分析以及盐胁迫下时空表达模式分析。结果表明,HcMYB3基因包含675 bp的开放阅读框,编码224个氨基酸,编码的蛋白质为酸性,具有不稳定、亲水性、不跨膜、不含信号肽的特性,二级结构以无规则卷曲为主,与木槿HsMYB3亲缘关系最近。HcMYB3基因在中低浓度盐(50、150 mmol/L NaCl)胁迫下显著上调,高浓度盐(250 mmol/L NaCl)胁迫下随时间呈“降—增—降”的趋势。研究为红麻耐盐调控网络的研究提供了理论基础。     

玉竹蔗糖合成酶（SUS）基因家族的鉴定、表达分析及PoSUS1基因的克隆

多糖是玉竹的质量标志物，在免疫调节、抗肿瘤等方面具有显著的药理作用。作为多糖合成的关键酶之一，蔗糖合成酶（sucrose synthase, SUS）一直是揭示植物多糖合成的重要研究内容。基于转录组序列信息，本研究利用生物信息学手段对玉竹SUS基因家族及其成员进行鉴定，并利用荧光定量PCR(qPCR)对其成员表达模式进行分析。结果表明：玉竹转录组共获得8个具有ORF序列的PoSUS基因家族成员，其编码蛋白质含有111～310个氨基酸，分子量为12.81～35.43 kDa，其理论等电点为5.83～9.18。系统进化树分析表明，8个PoSUS基因家族成员可分为3个亚家族，其中第Ⅲ亚家族基因成员数目最多。亚细胞定位预测显示大多数PoSUS蛋白定位在叶绿体。基因表达模式分析表明，PoSUS1和PoSUS6基因在多糖积累的根茎组织中表达量最高，且高多糖种质HN1中PoSUS1和PoSUS2表达量显著高于低多糖种质AH2。此外，本研究还从种质HN1和AH2克隆得到PoSUS1基因CDS序列，其编码蛋白在2份种质间存在3处氨基酸差异，且这些差异位于PoSUS1蔗糖合成酶结构域。本研究结果为深入研究...