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应用PCR技术将发生突变的tac启动子-10区(TATGTT)回复突变为TATATT和TATGAT,构建了两个重组质粒pPM1、pPM2,酶切结果发现pPM1质粒转化大肠杆菌后部分细菌对tac启动子进行切除。将重组质粒分别与pAX1共转化大肠杆菌,提取细菌总蛋白,酶联免疫吸附法测定细菌总蛋白中activator及3α-HSD的表达量,结果表明tac启动子-10保守区为TATATT的质粒比-10保守区为TATGAT的质粒具有更高的转录活性,activator及3α-HSD的表达量高低依次均为pPM1>pPM2>pb。根据同源重组原理构建突变菌,并利用HPLC测定了各突变菌对睾凡酮的降解能力,结果表明不同突变菌对睾凡酮的降解能力高低依次为Cp7(C.T.+ pPM1)> Cp4(C.T.+pPM2)> Cb7(C.T.+pb)>C.T.。 相似文献
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通过不同播期超甜玉米生长发育中光合特性的测定,分析了光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)在不同生育期的变化.结果表明,甜玉米种植期中拔节期至大喇叭口期,光合速率较高,后期呈下降的趋势;甜玉米生长的前期蒸腾速率较低,后期蒸腾速率较高;气孔导度的变化呈单峰曲线状,以大喇叭口至抽穗期为最高峰时期.同时表明甜玉米适时早播有利于提高光合作用,增进同化物积累达到高产优质.揭示了甜玉米在生长发育时期一些主要光合特性的动态变化规律 相似文献
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果蔗Rar1基因反义载体的构建及遗传转化初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:本研究根据其它作物已克隆的RAR1基因的两个氨基酸保守位点设计简并引物,用果蔗cDNA进行PCR扩增,得到果蔗Rar1基因片段序列,推测出的氨基酸序列与其它作物推测出的氨基酸序列的CCCH结构域和一个锌结合域CHORD-Ⅱ具有很高的相似性,初步证明了所克隆的果蔗Rar1基因片段具有正确的序列信息。并构建了果蔗Rar1反义植物表达载体pCAM-RAR1,转化农杆菌后侵染果蔗的愈伤组织并得到初步验证,为转基因植物的获得以及果蔗Rar1基因功能鉴定奠定了基础。 相似文献
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不同播期超甜玉米光合特性与产量的初步研究 总被引:12,自引:0,他引:12
通过不同播期超甜玉米生长发育中光合特性的测定,分析了光合速率,蒸腾速率,气孔导度在不同生育期的变化。结果表明,甜玉米种植期中拔节期至大喇叭口期,光合速率较高,后期呈的趋势;甜玉米生长的前期蒸腾速率较低,后期蒸腾速率较高;气孔导度的变化呈单峰曲线状,以大喇叭口至抽穗期为最高峰时期同时表明甜玉米适时早播有利于提高光合作用,增进同化物积累达到高产优质,揭示了甜玉米在生长发育时期一些主要光合特性的动态变化 相似文献
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甘蓝型油菜与萝卜属间杂种的获得及其酶学分析 总被引:2,自引:1,他引:2
甘蓝型油菜(AACC)与萝卜(RR)杂交以导入抗性基因,应用“胚胎挽救”技术在本研究中产生了133株F1代杂种株与油菜栽培品种回交的第1代杂种株,145株回交第2代杂种株。细胞学和同工酶(GPI,POX)酶谱分析表明,回交后代中萝卜的抗性R基因通过染色体工程可望导入到甘蓝型油菜栽培品种中。 相似文献
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睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究根据同源重组原理,利用电穿孔法将重组质粒pKtac1-act1和pKtac1-act2分别转化睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni),经PCR和Southern blot筛选获得2株睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌。对这两株基因工程菌的关键酶3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase/carbonyl reductase,3α-HSD/CR)表达情况和细菌稳定性的分析结果表明:两株基因工程菌在没有诱导剂诱导的情况下,其3α-HSD/CR的表达量比原始菌提高了近20倍。添加抗生素进行培养,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR表达均较稳定;而在不添加抗生素的培养基上培养时,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR的表达变化较大,蛋白总体表达水平比添加抗生素时低。研究结果可以初步推断,3α-HSD/CR的表达受activator基因的表达调控。 相似文献
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供试材料为无性繁殖第2代的4个甘蔗组培亚无性系群体.仙游79-83组培亚无性系的性状平均表现为茎变细,茎数/丛增加,株高减少,锤度与供体的无显著差异.新台糖10号组培亚无性系的茎变细,茎数/丛无明显变化,株高增加,锤度比对照有所下降.同一供体在MS和N_6培养基培养出来的亚无性系,4个性状变异的平均表现趋剪一致,但变异幅度有所不同.培养基对不同供体及其不同性状变异的影响有一定差异.同工酶分析表明,不同供体及同一供体在不同培养基下培养出来的亚无性系,其POD和Est的变异均有差异.仙游79-83亚无性系的POD变异率较Est的变异率高,但不同培养基培养出来的亚无性系之间差异明显.新台糖10号的亚无性系则表现为POD的变异率比Est的低,而培养基之间的差异不明显.就供体而言,仙游79-83亚无性系POD的变异率高于新台糖lO号亚无性系的变异率,而Est则因培养基而异.供试亚无性系农艺性状的变异与同工酶的变异有一定的联系,并表明组培对甘蔗无性系变异的影响是有限的. 相似文献
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以甘蔗杂交组合 Co10 0 1× Ya71- 374后代为供试材料 ,采用人工接种方法 ,对其黑穗病抗性的分离结果进行分析 ,并构建了抗、感池 .相关分析表明 ,除最短潜伏期与最终累计丛感率相关不显著外 ,其余病害流行参数间的相关均达显著水平 ;利用最长距离法借助病害流行参数对供试材料进行聚类 ,可较好地归为 5类 ,类内个体抗病性差异不大 ,类间个体抗病性差异明显 .系统聚类分析结果可进一步验证所构建的抗、感池 相似文献