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【目的】构建多拷贝整合表达禽流感病毒样颗粒的重组巴斯德毕赤酵母,为H5N1亚型禽流感基因工程疫苗提供基础。【方法】以巴斯德毕赤酵母GS115株18S rRNA基因(rDNA)部分序列,插入pPIC9K载体上XbaⅠ和Bsp1407Ⅰ位点间,构建多拷贝整合表达质粒p8K。再以禽流感病毒H5N1毒株基因组RNA为模板,RT-PCR扩增HA、M和NA基因,分别插入多拷贝载体p8K,构建表达质粒 p8K-HA/M/NA。表达质粒分别扩增后线性化,按比例混合,电转化GS115感受态细胞。增菌后,经遗传霉素G418抗性平板筛选、PCR鉴定携带HA、M和NA基因序列的多拷贝整合菌株。阳性菌株增菌、诱导表达、高压均质破碎后,Western-blot检测表达产物。【结果】PCR鉴定阳性的重组菌株,其细胞裂解蛋白,免疫印迹试验可检测到与HA、M1和NA分子量一致的蛋白条带;电子显微镜可观察到大小约为80~120 nm 的病毒样颗粒,免疫鸡能产生抗禽流感病毒中和抗体。【结论】重组毕赤酵母能够多拷贝整合、表达、组装禽流感病毒样颗粒。 相似文献
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主要阐述了流式细胞仪在贝类血细胞分类、血细胞功能、染色体核型分析、倍性检测等研究中的应用,供研究贝类的科技工作者参考。 相似文献
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赛绕依汗·沙黑都拉 《新农村(黑龙江)》2014,(8):32-32
1试验目的
通过田间肥效对比试验,验证由新疆百威生物有限公司提供的“百威”大量元素水溶性肥料在设施番茄上的施用效果,为这种新型叶面肥料进一步试验示范和大面积推广应用提供科学依据。 相似文献
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不同刈割期天然牧草青贮品质评价 总被引:1,自引:0,他引:1
以内蒙古通辽扎鲁特旗山地草原天然混合牧草为原料,对其不同刈割时期的青贮品质进行了测定,以确定天然牧草青贮的刈割时间。结果表明:7月中旬~8月下旬刈割的牧草,青贮品质在感官评价上均表现优良,且在营养价值上优于原料草,均可用来制作青贮。综合分析牧草发酵品质和营养价值发现,随着刈割时间的推迟,青贮料的pH、粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的含量呈先降低后增加的趋势,乳酸含量先升高后降低,氨态氮占总氮的比例、可溶性碳水化合物含量无明显规律。8月15日刈割的青贮饲草的干物质含量、粗蛋白含量、乳酸含量均相对最高,氨态氮占总氮的比值最低,青贮品质最佳,7月14日刈割的牧草青贮品质较差。 相似文献
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粗饲料是指按干物质计算,粗纤维素含量超过18%的干草、秸秆、秕壳等。粗饲料来源广、种类多、产量高、价格廉,是饲养肥育牛羊的主要饲料,也符合我国的具体国情。 相似文献