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蕨类植物的DNA提取方法比较研究(摘要) 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的]研究蕨类植物DNA提取的方法,为进一步的遗传多样性以及分类学的研究提供基础。[方法]通过改变试剂的用量以及操作方法对CTAB法提取DNA方法进行了改进。①取0.5~1.0 g新鲜叶片,加液氮充分研磨成粉末,置于1.5 ml离心管中,加2%CTAB600μl及10μl巯基乙醇;②65℃水浴15 min(期间取出振荡1次),冷却;③加500μl氯仿/异戊醇(24:1)上下颠倒数次至液相深绿色;④12 000 r/min离心3 min;⑤取上清液至-1.5 ml离心管,重复步骤③、④;⑥取上清液至-1.5 ml离心管中,管内预装1 ml 95%乙醇。室温静置2 h;⑦12 000 r/min离心3 min;⑧弃上清,用70%乙醇(约4400μl)洗涤沉淀,真空干燥器干燥。干燥后加低温保存;⑨使用时加100μl超纯水溶解。-25℃保存。提取出的DNA样品中加超纯水50μl,混匀后,用石英比色杯于DU(R)800分光光度计中测定紫外消光值,根据其在260nm和280 nm波长处的光吸收值计算DNA产率,根据A_(260)/A_(280)判断DNA样品的纯度。DNA样品的浓度(μg/μl)为:在260 nm的紫外消光值×核酸稀释倍数×50/1 000。纯DNA样品A_(260)/A_(280)紫外消光值应为1.8,A_(260)/A_(230)值应大于2.0。A_(260)/A_(280)值大于1.9时,表明有RNA污染,小于1.6时,表明样品中存在蛋白质或酚污染。A_(260)/A_(230)值小于2.0时表明溶液中有残存盐和小分子杂质,如核甘酸、氨基酸、酚等。分别对常规CTAB法和改进CTAB法提取出的蕨类植物DNA进行琼脂糖凝胶电泳检测,以验证提取出DNA的质量。[结果]改进的CTAB法提取的蕨类DNA,其主带(基因组DNA)更加明亮,且与其他杂带区分明显,表明DNA的降解较少,DNA得率及纯度都有了很大提升。[结论]改良的CTAB提取法能够提取出高质量的蕨类植物DNA。 相似文献
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主要从设计手法与表现方式两方面入手,将旧工业建筑的改造归结为转换功能、重组空间及选择表现方式,并对这三个方面进行了简要阐述。 相似文献
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沈洁 《内蒙古林业调查设计》2008,31(3):102-103
企业内部存在着繁杂经济关系,在这些经济关系中起统领全局、提纲挈领作用的是企业内部经济活动机制,属于一种契约形式的制度性机制。文章从企业生产要素组合、组织机构运行、各岗位之间分工协作这几个方面,就这种契约形式的制度机制如何保证企业内部经济活动有序进行,做了进一步讨论。 相似文献
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社会在不断进步,经济也在不断发展,人们对生活的环境要求不断提高,这也对园林绿化土建施工提出了新的考验。近几年,生态环境不容乐观,人们都在倡导低碳生活,与此同时园林绿化建设也变成了热门话题,受到社会各界广泛关注。随着科技的发展,园林绿化土建施工技术不断提高,本文通过对土建施工技术管理特点以及作用展开分析,分析了园林绿化土建施工技术管理现状,并且对园林绿化土建施工技术管理提出了建议。 相似文献
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放牧活动不但影响草原生态过程,而且改变草原群落空间格局。为进行草地冠层连续变化的尺度对放牧强度响应的研究,基于无人机机载激光雷达和多光谱遥感获取亚米级的草原冠层数据,利用小波分析方法研究了不同放牧强度下草原冠层空间格局及其尺度特征,探究草原冠层高度(CH)、植被覆盖度(FVC)、归一化植被指数(NDVI)等不同冠层参数空间尺度特征对放牧强度的响应。结果表明:CH、FVC、NDVI的小波方差随放牧强度增大呈下降趋势,草原冠层空间结构整体趋于均匀;小波方差和系数实部分析显示,CH,FVC和NDVI的空间格局存在170~180 m、116~140 m等2个主特征尺度,不随放牧强度而变化,较为稳定;中度、重度放牧使植物群落在空间中产生了许多小斑块,植被盖度的空间格局在小尺度上的变化较大。 相似文献
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