鼠源eIF4A1基因克隆及其原核/真核表达鉴定

【目的】克隆昆明小鼠真核生物翻译起始因子4A1基因（eIF4A1）并构建其原核/真核表达载体,探究其结构和生物学特性,为在体内外鉴定e IF4A1互作蛋白网络打下基础。【方法】以昆明小鼠脑组织总RNA反转录合成的cDNA为模板,PCR扩增鼠源e IF4A1基因编码区（CDS）序列,然后克隆到pGEX-4T-1和pcDNA3.0载体上分别构建原核/真核表达载体;利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞对原核表达载体进行诱导表达、纯化及鉴定;同时以真核表达载体转染HEK-293T细胞,通过Western blotting和间接免疫荧光（IFA）检测eIF4A1蛋白在HEK-293T细胞内的表达及分布情况;并以ProtParam、ProtScale、TMHMM-2.0、SignalP-5.0、SOPMA和SWISS-MODEL等在线软件对鼠源eIF4A1蛋白进行生物学信息分析。【结果】鼠源eIF4A1基因CDS序列长1221 bp,克隆到pGEX-4T-1载体能成功构建原核表达载体pGEX-4T-eIF4A1-Flag,在25和30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导均能大量表达出融合蛋...     

棉花抗虫杂交种发芽率和纯度快速鉴定方法

近年来,棉花杂交种推广面积增加,经营单位制种面积也随之扩大,其杂交种来源于各繁殖基点,来源于千百个农户的制种。在制种过程中由于杂交种的母本是常规种,往往不抗虫,有一些棉铃由于疏漏没有进行杂交,而是自交,这样在最后收的杂交种子中往往掺杂一些不抗虫的假杂种,因此就必须进行发芽率和纯度鉴定,保证种子的质量。发芽率需要在恒温箱中进行,而纯度鉴定就更费工费时,有的带到海南岛长期观察,种植面积大、时间长,成本高,耽误经营。怎     

日粮添加过瘤胃保护胆碱对喀斯特山区奶牛泌乳性能的影响及其延续效应研究

研究日粮添加过瘤胃胆碱(RPC)对喀斯特山区奶牛泌乳性能及其延续效应的影响。以10头喀斯特山区泌乳盛期奶牛为试验动物,进行自身对照试验设计。试验按照对照期、正试期(试验Ⅰ期、试验Ⅱ期)、延续效应期(试验Ⅲ期)连续进行,每期12 d。其中,正试期RPC每头奶牛的添加水平为40 g/d;试验Ⅲ期停喂RPC以观察其是否可对奶产量产生延续效应。结果表明,对照期、试验Ⅰ期、试验Ⅱ期、试验Ⅲ期奶牛干物质采食量差异不显著(P>0.05)。试验Ⅰ期奶产量显著高于其他3期(25.5∶27.7∶26.5∶24.8 kg/d,P<0.05);正试期(试验Ⅰ期、试验Ⅱ期)奶产量显著高于对照期、延续效应期(25.5∶27.2∶24.8 kg/d,P<0.05);当停喂RPC后,延续效应期奶产量即下降至对照期水平(25.5∶24.8 kg/d,P>0.05)。奶成分不受日粮添加RPC的影响(P>0.05),乳脂、乳固型物含量数值上较对照期有所增加。由此可见,日粮添加RPC有利于提高喀斯特山区奶牛泌乳性能,但未对奶产量表现出延续效应,生产实践中需持续添加。     

我国兽医人才的职业素质培养及就业前景

<正>经济全球化是当今世界经济的重要特征,也是世界经济发展的趋势。伴随着经济的全球化,我国的动物、动物产品要进入国际市场,就必须提高动物、动物产品的卫生质量。2003年的非典疫情、2004年的高致病性禽流感、2005年猪链球菌病、2008年一场波及全国的三聚氰胺事件、2009年影响全世界的H1N1流感,再到近期的     

家兔难产手术方法

兔是一种小动物,产道狭窄,一旦由各种因素引起难产,矫正比较困难,如不及时进行手术,难产时间过长,往往造成仔兔与母兔的死亡。笔者近年来用手术的方法治疗了９例兔难产,除一例因难产时间长（４８小时后手术）失败外,其余８例母兔与仔兔全部成活,成功率８８．９％...     

几种常见的猪静脉采血方法简介

生猪的免疫抗体和疫病监测是调查猪病发生、传播的重要途径,采集的猪血样品的质量好坏更是直接影响到监测结果的准确性。介绍了几种常见的猪静脉采血方法,以期为广大防疫人员采血工作提供参考。