香草酸对花生种子萌发、幼苗生长及根际微生物区系的影响

【目的】探讨酚酸类自毒物质香草酸的自毒作用,研究其对花生种子萌发和幼苗生长的影响,揭示根际土壤微生物在花生生育期内对自毒物质的响应规律。【方法】以花生品种阜花12号150GY为试材,培养皿培养试验设6个处理：0、0.01、0.03、0.05、0.07、0.09 mmol·L^-1香草酸溶液;营养钵种植试验设5个处理：0、0.01、0.03、0.05、0.07 mmol·L^-1香草酸溶液;盆栽试验设5个处理：香草酸用量分别为0、0.01、0.03、0.05、0.07 mg·kg^-1干土。分别研究外源添加香草酸对花生种子萌发、幼苗生长及根际微生物区系的影响。【结果】（1）经不同浓度香草酸溶液处理后,花生种子的发芽率、发芽势和发芽指数均低于CK,与对照存在显著性差异。当香草酸溶液浓度为0.09 mmol·L^-1时,发芽率、发芽势和发芽指数与对CK相比分别降低39%、66.3%和55.9%,自毒效应响应指数达到最大值。（2）经不同浓度香草酸溶液处理后,花生幼苗的主根长、单株干重、叶绿素含量、净光合速率和气孔导度均低于CK,与对照存在显著性差异,当香草酸溶液浓度为0.07 mmol·L^-1时,各指标与对CK相比分别降低37.3%、40.0%、19.0%、53.9%和49.1%,自毒效应响应指数达到最大值。胞间CO₂浓度变化趋势与以上指标相反,随香草酸浓度的增大而呈现上升趋势,当香草酸溶液浓度为0.07 mmol·L^-1时,胞间CO₂浓度比对照提高46.1%。（3）香草酸浓度≥0.03 mmol·L^-1时,花生根系总吸收面积、活跃吸收面积和根系活力（活跃吸收面积/总吸收面积）低于CK,叶片的MDA含量高于对照,均与对照存在显著性差异,当香草酸溶液浓度为0.07 mmol·L^-1时,各指标与对照相比分别降低22.4%,54.2%和40.6%,MDA含量提高43.3%。（4）根际放线菌数量在花生生育前期随着香草酸浓度的增大而显著降低,进入结荚期后各处理间差异不显著。根际细菌数量在花生生育前期时各处理间差异不显著,而进入结荚期后随着香草酸浓度的增大而显著降低。高浓度的香草酸（0.07 mg·kg^-1干土）对根际真菌生长具有抑制作用,而低浓度的香草酸（0.01 mg·kg^-1干土）对根际真菌生长具有促进作用。【结论】香草酸对花生种子萌发和幼苗生长存在一定的抑制作用,香草酸亦会抑制花生幼苗的光合作用,降低根系活力,促进幼苗叶片产生丙二醛。此外,不同浓度的香草酸溶液均会使花生根际细菌和放线菌的数量降低,抑制根际土壤中细菌和放线菌的生长繁殖,而对土壤真菌的影响呈现低促高抑的现象,即低浓度的香草酸溶液促进花生根际土壤中真菌的生长;而高浓度则对真菌生长具有一定的抑制作用。     

黄瓜内生枯草芽孢杆菌B504发酵配方优化研究

利用SAS软件对黄瓜内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B504发酵培养基进行优化。首先用Plackett-Burman法筛选出3个重要因素,通过最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域,最后采用Box-Behnken设计及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度。结果表明:当葡萄糖、KH2PO4、玉米粉、黄豆粉、MnSO4、K2HPO4的最佳用量分别为0.72、1.073、.67、3.0、2.03、.0 g时,发酵培养基产生的芽孢数量达到最大值2.22×109cfu/mL,较优化前的1.81×109cfu/mL提高了22.7%。     

木霉工程菌株酯酶同工酶和可溶性蛋白的电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对木霉菌的野生菌株T21及其4株REMI转化子T31、T34、T47、T55的可溶性蛋白和酯酶同工酶进行了比较研究。结果表明各转化子之间、转化子与野生菌株之间的谱带均有差异。野生菌株T21及转化子T31、T34、T47、T55的蛋白谱带为22,21,19,17,24条;酯酶谱带为6,8,4,5,3条。     

甜瓜枯萎病土壤拮抗菌的初步筛选

从土壤中分离并筛选到4个对甜瓜枯萎病菌具有稳定拮抗作用的细菌，经初步鉴定，Y1、Y2、X1、X11均为芽孢杆菌（Bacillus sp.）。室内防治试验测定表明，它们对甜瓜枯萎病均有一定的防治效果，其中最好的Y1防治效果可达75．32％。     

葡萄抗感白腐病品种PAL酶、PPO酶和SOD酶活性比较

对抗、感葡萄白腐病品种的苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）和超氧化物歧化酶（SOD）活性动态变化进行测定,结果为抗、中抗品种的PAL酶活性,在病原菌侵染后呈上升趋势,而感病品种呈下降趋势;两个抗病品种的PPO酶活性迅速上升,并保持相当长时间的高活性值,而中抗、感病品种PPO酶活性几乎没有明显变化,或呈下降趋势,抗病品种的健康果粒中的SOD活性低于感病品种的SOD活性,但抗病品种在受病原菌侵染后SOD活性迅速上升,感病品种的SOD活性几乎没有改变。     

葡萄白腐病菌对多菌灵抗药性研究

建立了葡萄白腐病菌对多菌灵的相对敏感基线[1,2],评价了辽宁地区该病菌对多菌灵的敏感性,明确了病菌抗药性水平、分布,已检测出葡萄白腐病菌对多菌灵的中抗和高抗菌株。葡萄白腐病菌对多菌灵的抗性值得关注。     

辽宁省花生网斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

为确定辽宁省花生(Arachis hypogaea Linn.)网斑病病原菌,采用柯赫氏法则,测定从病样中分离的纯培养物致病性,根据其形态学特性及ITS序列分析,对病原菌进行鉴定。采用菌落生长法及凹载玻片萌发法研究病原菌生物学特性。结果表明,辽宁省花生网斑病病原菌为Peyronellaea arachidicola。菌丝生长最适温度为23℃,最佳碳源为麦芽糖、最佳氮源为酵母膏,最适pH为7,光暗交替有利于菌丝生长,菌丝致死温度为45℃。分生孢子萌发的最适温度为25℃,最适pH为7,光照条件有利于分生孢子萌发。     

花生褐斑病菌侵染对不同抗性花生活氧代谢及防御酶的影响

开展了3个不同抗性花生品种经花生褐斑病菌(Cercospora arachidicola Hori)胁迫后O2-、MDA含量和防御酶系含量变化的测定,分析其与品种抗病性的相关性。结果表明,供试花生品种接种褐斑病菌1~15 d内,O2-和MDA含量均呈现先升后降的趋势。对O2-含量而言,粤油7号9 d达到最大值,花育20号7 d达到最大值,鲁花11号5 d达到最大值;对MDA含量而言,粤油7号9 d达到最大值,花育20号9 d达到最大值,鲁花11号13 d达到最大值。接种病菌后叶片中CAT、SOD、POD、PAL和PPO的含量对比分析表明,鲁花11号最高,花育20号次之,粤油7号最低;3种花生品种受侵染后病情指数与防御酶含量均呈负相关,且SOD及PAL含量在抗病品种和感病品种间存在显著差异。表明花生褐斑病菌侵染后,叶片内氧阴离子及MDA暴发时间和含量变化与花生品种抗性密切相关,抗性越强的花生品种应答时间越迅速,叶片细胞遭受破坏越小,细胞功能丧失越少;不同花生品种对褐斑病抗性水平存在差异,褐斑病菌胁迫可引起花生叶片防御酶活性及抗氧化物质含量变化,且抗性越强的花生品种防御酶含量越高;SOD和PAL含量可作为鉴定花生对褐斑病抗性的生理生化指标。     

葡萄霜霉病菌拮抗放线菌QH94发酵滤液的稳定性研究

菌株QH94为葡萄霜霉病菌拮抗放线菌。对其发酵滤液稳定性进行了研究,结果表明,菌株QH94的抑菌物质属于胞外次级代谢产物;发酵滤液在20~100℃下抑菌率为86.44%~90.37%;pH值为2.0~5.0时抑菌率90%以上;抑菌活性随光处理时间的延长有下降趋势,日光处理120 h抑菌率最低降至82.22%,紫外光处理抑菌率最低降至80%;该发酵滤液较耐贮藏,4℃下可保存长达60 d,室温下可保存7 d;发酵滤液的抑菌物质不溶于石油醚、四氯化碳、二氯甲烷、乙酸乙酯,溶于丙酮和甲醇,说明其活性物质为水溶性。     

花生褐斑病生防菌筛选及田间防效评价

为获得花生褐斑病生防资源，对从阜新、锦州等辽宁花生主产区采集到的60份健康花生叶片进行分离，获得微生物563株，从中筛选出对花生褐斑病菌具有抑制作用的菌株18株，其中抑制作用最强的为TL6菌株，其对花生褐斑病菌的抑菌圈直径达64.3 mm。根据其形态特征、生理生化反应和保守序列同源性分析，明确TL6菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。田间防效试验结果显示，TL6菌液对花生褐斑病具有较好的防治效果，其发酵液原液对花生褐斑病防治效果为69.17%,发酵原液200倍稀释液对花生褐斑病的田间防治效果达42.48%,TL6发酵原液200倍+50%多菌灵悬浮剂1 000倍对花生褐斑病的田间防治效果达81.33%,联合使用能够显著增效，解淀粉芽孢杆菌TL6具有较好的开发应用前景。