广西巴马小型猪GHRH成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响

【目的】探讨广西巴马小型猪促生长激素释放激素（GHRH）成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响,为进一步研究广西巴马小型猪GHRH成熟肽的促生长作用及GHRH基因疫苗的高效制备与安全使用提供参考依据。【方法】利用基因重组技术将广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列与p EGFP-N1质粒连接构建重组真核表达质粒,然后按0.5μg/g的剂量肌肉注射经25%蔗糖溶液预处理的小鼠,观察记录小鼠体重变化情况,并分别提取重组质粒注射组小鼠的心脏、肝脏、肾脏及注射部位肌肉DNA,再以PCR检测是否存在基因质粒残留。【结果】以构建的p EGFP-GHRH重组质粒注射小鼠后,其外源GHRH成熟肽DNA可在肌肉中获得表达,但并未整合入小鼠基因组中。虽然重组质粒注射组小鼠的末重与空质粒注射组小鼠的差异不显著（P〉0.05）,但在注射后的10-25 d,重组质粒注射组小鼠体重均显著高于空质粒注射组（P〈0.05）。在相对日增重率方面,注射后的前15 d内,重组质粒注射组小鼠的相对日增重率均高于空质粒注射组。【结论】构建的广西巴马小型猪p EGFP-GHRH重组质粒能在一定时间内促进小鼠生长,即GHRH种属差异性小,在动物中有较高的保守性。     

玉米秸秆低温高效降解复合菌系GF-20的菌种组成及降解稳定性

【目的】探索不同温度及pH条件对玉米秸秆低温高效降解复合菌系的玉米秸秆分解稳定性及菌群结构稳定性的影响,完善菌系培养方法,促进其应用开发利用。【方法】以低温高效降解复合菌系GF-20为研究对象,在10℃条件下连续继代培养45代、不同温度和pH条件下连续继代培养15代,分别获得多组不同代数（F）、不同温度（T）和pH（P）条件下的菌系。测定各复合菌系发酵液pH、玉米秸秆降解率及纤维素酶活,评价复合菌系的玉米秸秆分解稳定性;利用PCR-DGGE技术结合主成分分析法对菌群组成结构的稳定性进行研究。【结果】在10℃条件下经连续继代培养40代和在温度4-30℃、pH 6.0-9.0条件下继代培养获得的不同复合菌系发酵液pH均随发酵时间的延长趋近中性;玉米秸秆降解率在27.59%-32.53%,除F40显著高于F5外,其余无显著差异;纤维素酶活性呈高代菌系大于低代菌系,温度4-10℃和pH 6.0-9.0条件下,对复合菌系产酶有促进作用,纤维素酶活为1.34-1.84 IU·mL^-1;复合菌系的纤维素酶在较低的温度和较宽的pH范围内具有良好的温度和pH稳定性,酶促反应温度15-30℃和pH 4.0-9.0内仍保持80%以上的纤维素酶活力;复合菌系F5-F45、T4-T30和P6.0-P9.0的DGGE条带差异不显著,表明菌系的菌种组成稳定;而在偏酸（pH=4、5）和偏碱性（pH=10）条件下继代培养,复合菌系秸秆降解率和纤维素酶活均显著降低,菌种组成发生变化,进而影响性质与功能稳定性。PCR-DGGE共检测到18个条带,其中关键菌株分别为Bacillus licheniformis、Azonexus hydrophilusd、Azospira oryzae、Arobacter cloacae、Cellvibrio mixtus、Bacillus tequilensis、Clostridium populeti subsp. Mixtus和Clostridium xylanolyticum。【结论】复合菌系GF-20在温度4-30℃、pH 6.0-9.0条件下经过多代继代培养,仍然保持了较高的玉米秸秆分解活性和菌种组成稳定性,具有良好的应用前景。     

设施农田土壤重金属污染评价及分区阈值研究

设施农田高强度的耕作模式使土壤重金属累积日益加重,因地制宜地确定其土壤重金属目标值与筛选值对设施农田可持续生产意义重大。本文以石家庄、衡水与唐山为研究区,基于土壤重金属污染风险和生态风险评价,用熵权法得出综合风险等级并确定重金属污染分区阈值。结果表明土壤Cd、Cu、Zn污染最严重,高风险区占比达40.57%。研究区设施农田土壤Cd、Cu、Pb、Zn全量与有效态的目标值分别为0.12、40.17、19.23、116.03 mg·kg^-1与0.02、4.19、0.59、8.80 mg·kg^-1;筛选值分别为0.40、90.27、38.33、170.68 mg·kg^-1与0.11、11.77、1.55、14.24 mg·kg^-1。基于综合评价结果反推分区阈值的方法简单便捷,重金属全量与有效态的目标值及筛选值的确定为研究区设施农田重金属污染的预防提供了多方位的指导。     

全氟辛烷磺酸和全氟辛烷羧酸在天津大黄堡湿地地区鱼体和蔬菜中的分布研究

对天津市大黄堡湿地自然保护区的池塘水体、两种常见鱼体(鲤鱼和鲶鱼)和两种蔬菜(大白菜和萝卜)的不同组织以及两种蔬菜根际土中的全氟辛烷羧酸(PFOA)和全氟辛烷磺酸(PFOS)的污染水平进行了调查,并计算了生物富集(迁移)系数,分析比较了陆生植物与水生生物的富集规律.研究表明,在池塘水体中,PFOA的浓度为22.0± 1.3 ng· L-1(n=3),PFOS为8.4±0.6 ng·L-1(n=3).在鱼体中,PFOA的检出浓度均低于PFOS,说明PFOA具有较低的生物富集能力;PFOS在鲤鱼和鲶鱼中的最高浓度均出现在肝脏中,分别为17.8、21.7 ng·kg-1(湿重,WT),组织分布的变化趋势均表现为肝脏＞肾脏＞肉(腮).在两种蔬菜中,PFOA和PFOS最高浓度均出现在大白菜的地下部分(菜根),浓度分别为0.84、0.42 μg·kg-1(WT).鱼体对目标化合物的富集系数为1.7～2588,远高于蔬菜的富集(迁移)系数,0.01～0.59;水溶性较大的PFOA在蔬菜中转移系数大于PFOS,在鱼体中的富集系数却小于PFOS.对该地区的两种蔬菜和两种鱼的风险暴露进行了初步评价,鲤鱼对人体每日可贡献2.6 ng PFOA和104 ng PFOS;而鲶鱼的贡献量分别为1.7ng和39 ng.大白菜和萝卜对人体中PFOA的贡献量要高于上述两种鱼类,分别为18.4 ng和4.1 ng,对于PFOS的贡献量分别为13.4 ng和11.5 ng.通过与欧盟食品安全局对PFOA和PFOS暴露风险评价的日可最高摄入量对比,发现本研究中该地区的两种蔬菜和两种常见鱼类的暴露风险均较低.     

东北地区白斑狗鱼人工繁殖技术的研究

在长春地区进行了白斑狗鱼的人工繁殖,并对白斑狗鱼胚胎发育及卵黄囊期仔鱼的发育情况进行了研究.结果表明,白斑狗鱼卵呈圆球形,金黄色,多油球,卵径为1.9～2.2 mm.白斑狗鱼受精卵在水温10～14℃下经188 h孵化出膜,有效积温为2244℃·h;在水温12～14℃下卵黄囊期需10 d,有效积温为120 ～ 140℃·h.受精率达73.3％,孵化率为48.5％.     

蕾期低温胁迫对棉花叶绿素荧光特性的影响

【目的】分析棉花蕾期不同低温胁迫对不同棉花品种的叶绿素荧光特性的影响,研究棉花蕾期的抗冷响应规律,筛选棉花蕾期耐冷性相关的指标,为耐冷资源鉴定、耐冷棉花品种选育提供依据。【方法】于棉花蕾期设置3个低温梯度：T₁(20℃/15℃,昼/夜)、T₂(15℃/10℃)、T₃(10℃/5℃)和对CK(28℃/20℃)处理。【结果】蕾期棉花在低温胁迫条件叶绿素荧光参数Fv、Fm、Fv/Fo、qP、SPAD下降,NPQ、Fo上升。而Fv/Fm在20℃/15℃以上低温和15℃/10℃低温初期升高;10℃/5℃以下低温和15℃/10℃低温后期下降。【结论】可根据蕾期棉花的Fm、Fo等荧光参数来判断其受到的低温胁迫程度。     

毛喉素诱导猪卵泡颗粒细胞体外分化机制的研究

[目的]本试验旨在研究毛喉素(FSK)对体外培养的猪卵泡颗粒细胞分化的作用及机制.[方法]体外分离培养猪原代卵泡颗粒细胞,预培养24 h.用10 nmol·L-1 FSK处理细胞48 h,检测细胞形态、脂滴积聚、标记基因和周期相关基因表达状况;处理96 h后检测孕酮(P4)水平及类固醇合成相关蛋白的表达水平.[结果]与...     

杜鹃基因组DNA提取方法的研究及应用

杜鹃是广泛分布于北亚热带地区的常绿或者落叶灌木。本研究以杜鹃成熟叶片为材料,比较了4种方法提取基因组DNA的效率,并分别采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测所提取DNA的浓度和纯度,用ISSR和SSR两类分子标记进一步检测了DNA的质量。结果表明改良的3×CTAB法提取的基因组DNA效果最好,提取的DNA浓度为487.9μg/mL,得率为81.31μg/g,该种方法提取的DNA可直接用于分子标记扩增分析。因此,3×CTAB法是一种高效、可靠且非常适合杜鹃等灌木植物分子生物学研究的DNA提取方法。     

茄子“3415”肥效试验初探

以长茄2号为试验材料,采用二次回归＂3415＂试验设计,研究茄子在海口市琼山区砖红壤上的施肥效应。结果表明：施用有机肥对茄子产量影响较大。在施有一定量有机肥的基础上,氮磷钾肥对产量影响不明显,缺素相对产量均在90%以上。在中等肥力条件,施有机肥1 000 kg/667m2的基础上,以N 6.53 kg/667m2,P2O5 5.66 kg/667m2,K2O 6.56 kg/667m2配施较适宜,其氮磷钾配比为1.15∶1∶1.16。     

防治仔兔黄尿病验方四则

仔兔黄尿病多数是由于仔兔吮吸了患有乳房炎母兔的乳汁而引起。该病主要发生于开眼前的仔兔,往往全窝发病。仔兔感染后,表现昏睡、肢体发凉,后肢及肛