脂肪组织甘油三酯酯酶研究进展

脂肪组织甘油三酯酯酶(ATGL)是新近发现的调节脂肪分解的关键酶,含有经典酯酶的Gly-X-Ser-X-Gly模序和α/β水解酶折叠子结构,其主要功能是催化甘油三酯水解的起始步骤,其信号传导途径也可能不同于激素敏感酯酶(HSL).文章就ATGL的近年研究进展进行了概述.     

免疫乳的研究现状和最新进展

哺乳动物的乳汁含有多种生物化学活性物质，在调节人体功能和代谢等方面起着重要作用。免疫乳（Immmune milk）是指运用基因工程技术经免疫化学处理给哺乳动物有选择性的接种一些能够引起人或动物疾病的细菌和病毒或其他外来抗原刺激机体引发免疫应答而分泌特异性抗体的乳汁，即为免疫乳。哺乳动物通过高度免疫之后，所分泌的乳汁中除保留有普通乳汁的全部营养成分外，     

AAV-SaCas9敲除MSTN基因病毒的构建及鉴定

为了研究肌肉生长抑制素(MSTN)的相关功能,应用分子生物学方法构建敲除MSTN的AAVSaCas9载体,通过转染293T细胞提取基因组后进行T7酶切鉴定、TA克隆及测序确定该基因的敲除效果;将鉴定正确的AAV-SaCas9重组质粒与pHelper质粒共转染AAV-293细胞3 d后,分离纯化病毒并用实时荧光定量PCR法检测病毒滴度。结果显示,成功构建了敲除MSTN基因的AAV-SaCas9重组载体,T7酶切和测序鉴定出sgRNA2位点可以对MSTN进行编辑,并成功将其包装成病毒,经荧光定量PCR鉴定病毒滴度为2.73×10~(12)vg/mL。     

脂多糖对奶山羊肝脏代谢组学的影响

【目的】探寻脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）影响奶山羊肝脏营养代谢的特征代谢物（生物标记物）,阐明LPS引起肝脏代谢障碍的机制。【方法】选择12-18月龄,体重24-28 kg的关中奶山羊15只,平均分为3组（每组5只）,分别为对照组（CTL）、低剂量LPS处理组（LPS-L）和高剂量LPS处理组（LPS-H）。LPS-L和LPS-H分别腹腔注射20、40 μg?kg^-1 BW 的LPS溶液,CTL注射等容量生理盐水。24 h后, LPS-L和LPS-H追加LPS溶液。48 h后,静脉采血,分离血浆和血清,检测血液相关生化指标;然后活体采集肝脏组织,液氮保存。肝脏组织冻干后,用氢核磁共振（¹H-nuclear magnetic resonance,¹H-NMR）技术检测肝脏组织代谢物,运用数据库对检测到的代谢物变量进行化合物种类鉴别,再用模式识别方法中的偏最小判别二乘分析法(partia1 1east squares discriminant analysis,PLS-DA) 筛选生物标记物。【结果】血清生化指标表明,LPS-L和LPS-H处理的谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）水平较CTL显著升高(P<0.05);甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸（NEFA）、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)和总蛋白(TP)的含量较CTL显著降低(P<0.05)。用¹H-NMR技术共检测到69种代谢物变量,包括氨基酸,醇类,糖类及其它代谢产物。PLS-DA分析发现,代谢物变量可将CTL、LPS-L与LPS-H组之间聚类区分,并找到9种组间差异显著的代谢物,这些代谢物主要与氨基酸、脂肪和碳水化合物等代谢途径相关,可作为肝脏在LPS诱导损伤状态下的标志物。【结论】LPS可显著影响奶山羊肝脏营养代谢,¹H-NMR代谢组学可以较为全面地检测到肝脏组织的代谢物,准确地筛选出差异代谢物,通过分析差异代谢物的代谢途径,阐明LPS引起肝脏代谢障碍的机理。     

半胱胺促进奶山羊乳腺发育的试验研究

为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验。结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现,血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高。     

合理认识和正确对待转基因

随着越来越多的转基因产品投放到市场,关于转基因安全的问题逐渐为人们所关注。由于人们对生物技术与转基因的了解不一,所以对转基因食品消费和安全的认知也有差异。本文对转基因技术、转基因安全及国家相关法律进行了阐述,以期增强广大群众对转基因的认识,使转基因发挥更大的社会效益。     

β-葡聚糖酶对草鱼生长性能和饲料消化率的影响

试验研究了饲料中添加β-葡聚糖酶(500IU/kg)对草鱼(初始体质量约41g)生长性能、饲料消化率和体成分的影响,试验共设2组,每组设3个重复水箱,每箱随机放鱼20尾,每天投喂4次,试验期共饲养56d。结果表明,饲料中添加β-葡聚糖酶,草鱼平均增重率提高16.51%(P<0.05);平均饵料系数降低6.59%(P>0.05);干物质消化率提高7.27%(P<0.05);粗蛋白消化率提高7.32%(P<0.05);粗脂肪消化率提高3.45%(P>0.05);粗纤维消化率提高13.60%(P<0.05);体成分没有显著变化。     

雄性水牛去势对瘤胃消化代谢的影响

选用装有永久性瘤胃瘘管，十二指肠瘘管和临时性颈静脉插管的雄性水牛３头，研究去势对瘤胃微生物消化代谢的作用。结果表明，动物去势后１２ｄ，瘤胃细胞蛋白下降１９．０８％，ＴＶＦＡ下降８．０７％，且丙酸比例下降；而瘤胃液中ＮＨ３－Ｎ水平增加１５．２４％。去势后皱胃进入十二指肠食糜流量下降３３．６％，１ｄ内进入十二指肠总Ｎ量减少３２．０％，含Ｎ组分中，细菌蛋白Ｎ量，过瘤胃蛋白Ｎ量，氨态Ｎ量分别下降２．７％，     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5/M蛋白可溶性表达及免疫原性分析

为表达出高可溶性的GP5/M蛋白并检测其免疫原性,本试验将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)HN07-1毒株ORF5和ORF6基因序列上GP5和M蛋白的编码核苷酸序列进行密码子偏爱性优化设计,构建了GP5/M融合Grifin、GST、MBP、NusA、Sumo、Thioredoxin、γ-crystallin、ArsC、PpiB、CeHSP17共10种不同可溶性标签的表达重组载体。分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导,SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测,筛选出高可溶性表达的GP5/M融合蛋白。重组蛋白通过Ni-NTA Agarose亲和纯化,免疫家兔,对获得的兔抗GP5/M血清进行间接ELISA和病毒中和试验。结果显示,成功构建10个GP5/M表达载体,10个标签中,MBP与GP5/M蛋白相融合的可溶性表达效果最好,并获得了高纯度的MBP-GP5/M重组蛋白质;通过免疫家兔,检测重组蛋白具有免疫原性并能刺激机体产生较高水平的中和抗体。结果表明,试验成功建立了稳定获得GP5/M重组蛋白质的方法,初步鉴定了重组蛋白的免疫效力,为PRRSV亚单位疫苗的后续研究及大量制备奠定基础。