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利用TaqMan探针技术,采用实时荧光相对定量RT-PCR的方法检测了鸡马立克氏病病毒(MDV)meq基因对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)p53基因表达的影响,并用本室改进的TRAP法测定了端粒酶活性。结果显示,meq基因激活了CEF中原癌基因p53的表达,并且48 h的表达量是72 h的18.8倍;在对CEF和转染前后48、72 h的细胞端粒酶活性测定时也发现,端粒酶活性在转染后48 h是转染后72 h的16倍。流式细胞仪检测发现meq基因使S期细胞比例较转染前有所上升,进一步印证了meq基因是MDV中致瘤的主要因素。 相似文献
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为了获得我国斯氏艾美耳球虫长春株ADF基因并分析其与柔嫩艾美耳球虫长春株相应序列的同源性,试验根据GenBank中公布的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列设计引物,采用RT-PCR方法获得我国斯氏艾美耳球虫长春株ADF基因部分序列,然后将其克隆到pMD18-T载体中,应用DNAStar软件对测得序列进行序列分析。结果表明:斯氏艾美耳球虫长春株ADF基因大小为357 bp;经DNAStar分析,我国斯氏艾美耳球虫长春株与柔嫩艾美耳球虫长春株ADF核苷酸序列和氨基酸序列同源性均为99.2%。说明ADF基因在进化过程中高度保守。 相似文献
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为真核表达斯氏艾美尔球虫(Eimeria stiedae)肌动蛋白解聚因子(ADF)基因,本研究采用RT-PCR技术扩增ADF基因,构建pVAX- 1-ADF真核重组质粒,并转染HeLa细胞.采用RT-PCR方法检测ADF mRNA转录水平、western blot检测ADF蛋白表达水平.琼脂糖凝胶电泳结果表明PCR扩增出一条大小为350 bp的特异性片段,与预期值相符.Western blot检测显示,转染pVAX- 1-ADF的HeLa细胞在大约13ku处出现特异性表达条带,与预期值相符.本研究构建了E.stiedae ADF基因真核表达质粒pVAX- 1-ADF,并且在体外真核细胞中表达,为进一步寻找防治E.stiedae的疫苗候选基因奠定了基础. 相似文献
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近年来,传染病实验室因致病性病原微生物感染时有发生,实验室生物安全问题引起高校高度重视。笔者总结了传染病学实验室因指导教师不重视生物安全,学生安全意识低,操作不规范等造成较高生物安全风险的原因。根据生物实验室CNAS的认可规则,提出建立严格的实验室安全管理责任制,加强生物安全培训、规范化处理生物垃圾等措施消除实验室安全隐患,保护传染病实验室的公共安全。 相似文献
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通过对人工林现状的分析,指出现有人工林的以纯林为主的缺点、发展混交林的优势和今后人工林发展的趋势. 相似文献
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黄花乌头种子萌发特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以吉林省珍贵道地药材黄花乌头种子为试验材料。利用不同发芽温度(10、15、20、25、30℃)、30℃温水不同浸种时间(0、4、8、16、32、64 h)、不同贮藏条件(室温、4℃冰箱中、种子∶湿润河砂=1∶3贮藏6个月)处理,测定其发芽率、发芽势、简化活力指数及其萌发特性。探索其种子发芽的最佳条件,为黄花乌头的规模化种植和进一步研究提供依据。结果表明,黄花乌头种子适宜的发芽温度为20~25℃,播种前用30℃温水浸泡种子一昼夜可以提高其发芽率,种子∶湿润河砂=1∶3埋在地下10~15 cm土层中自然越冬条件下贮藏能够保持其较高的萌发能力。 相似文献
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