C型肉毒梭菌的分离及鉴定

[目的]肉毒毒素是梭状芽孢杆菌属肉毒梭菌在专性厌氧环境中产生的一系列极强烈的外毒素.[方法]通过革兰氏染色、生化鉴定等方法,参照伯杰氏细菌鉴定手册,鉴定分离的细菌.[结果]根据《常见细菌鉴定手册》[1]对其进行生化鉴定,最终鉴定其为C型肉毒梭菌.[结论]分离和鉴定C型肉毒梭菌,为今后C型肉毒梭菌的进一步研究奠定基础.     

旋毛虫新生幼虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ基因家族的筛选和分析

利用旋毛虫新生幼虫期特异性基因N5cDNA作为探针,对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行筛选,并将阳性克隆全部送测序公司测序.对测序结果进行序列分析后,根据信号肽不同分为15种基因.NCBI BLAST 检索表明,其中有13种基因均为旋毛虫未知基因序列,并且氨基酸序列最前面均包含有1个信号肽,属于分泌性蛋白.InterProSean检索表明,15种氨基酸序列均编码脱氧核糖核酸酶Ⅱ(DNaseⅡ),均含有DNase Ⅱ的保守序列.通过互联网将编码蛋白序列输入CLUSTAL W数据库,检索结果表明,这些编码的脱氧核糖核酸酶Ⅱ蛋白质同源性高达85%～98%.     

新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测

为获得多浪羊IFN-γ地高辛探针,并对其标记效率进行检测。将多浪羊pMD-18T-IFN-γ克隆菌进行PCR扩增,经切胶回收及目的基因浓缩后获得目的基因IFN-γ,然后用地高辛标记和检测试剂盒对IFN-γ基因进行标记,获得IFN-γ地高辛探针。IFN-γ的PCR扩增产物经8g/L琼脂糖电泳分离后转移至Hybond N+膜,膜上显影后进行敏感性检测并计算探针质量浓度,结果显示,IFN-γ地高辛探针在杂交液中的质量浓度为30μg/L。Southern杂交显示,Hybond N+膜上有IFN-γ基因的双链DNA,且浓缩后的DNA(2.5μg)标记的特异性探针质量浓度较高,可以在Hybond N+膜上呈现出清晰的杂交条带,证明获得的探针质量浓度符合要求。     

旋毛虫肌幼虫p53cDNA的克隆及鉴定

根据GenBank中旋毛虫53000抗原基因的序列设计引物，用PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p53cDNA，将其克隆到pMD-18T载体，转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析，结果表明，克隆到1176bp的p53cDNA，共编码391个氨基酸。序列分析表明，p53cDNA序列与GenBank中的旋毛虫p53基因序列相比共有12个核苷酸发生改变，二者的同源性为98％，所编码蛋白质氨基酸序列的同源性为98％。将其克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star（DE3），经IPTG诱导表达后获得约48000的重组蛋白。Western blotting检测证实，p53重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别，具有很好的抗原性。     

扁吻鱼石蜡切片制作方法的探讨

为探讨新疆扁吻鱼石蜡切片的制作方法,观察新疆扁吻鱼的基本组织结构,总结切片制作过程中出现的问题,分析问题产生的原因和解决办法。利用组织学石蜡切片技术和苏木精-伊红染色技术,用电子显微镜观察扁吻鱼各个组织结构。结果显示：新疆扁吻鱼的鳃丝由两排鳃片组成,每根鳃丝的两侧又着生许多细小的鳃小片,染色后可看见出鳃动脉和入鳃动脉,扁吻鱼的肌肉切片要比鳃切片更清晰,可看见肌纤丝和结缔组织间隙毛细血管的存在,扁吻鱼的肝脏细胞较大,核仁大而明显,细胞排列紧密,本实验对新疆扁吻鱼的鳃、肌肉和肝脏的显微结构有了初步的认识,为新疆扁吻鱼的研究提供了切实可靠的组织学参考依据。     

新疆某鸡场马立克氏病的实验室诊断及发病原因和场后消毒措施

2022年3月份,在新疆某地区一万羽肉鸡场出现较大死亡,每日平均死亡100只左右,病鸡出现精神沉郁,萎靡不振,食欲下降,被毛糙乱,有的鸡呈现大劈叉,部分病鸡解剖发现内脏器官出现结节。随后对鸡进行荧光定量PCR检测,确定为阳性。由于马立克疾病没有特效药物,所以在临床中预防成为防治本疾病的关键要点。     

1例疑似溶血性曼氏杆菌感染的诊断及生物信息学分析

试验旨在研究溶血性曼氏杆菌的生物学特性,以新疆阿克苏市某羊场疑似感染溶血性曼氏杆菌的绵羊为研究对象,对其感染情况和发病症状进行调查记录;解剖病死羊,无菌采集组织脏器,通过普通PCR法对病料进行实验室病原学诊断,同时对溶血性曼氏杆菌基因及其蛋白特性进行生物信息学分析。结果显示,病死羊肺脏充血、出血、实变,肠道出血、淋巴结肿大;巴氏杆菌PCR、16S rRNA检测结果均为阳性,该病例最终诊断为溶血性曼氏杆菌感染。生物信息学分析结果显示,该蛋白为亲水性蛋白,具有54个磷酸化位点,二级结构为其结构连接5个α-螺旋。研究表明,该羊场羊感染溶血性曼氏杆菌。     

棉籽壳菌糠饲喂卡拉库尔羊效果研究

分析了棉籽壳菌糠饲喂卡拉库尔羊的效果 ,结果表明 .用菌糠取代 6 0 %的棉籽壳与取代新疆 4 5 %的棉籽壳和全部用棉籽壳 ,卡拉库尔羊平均日增重差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,而每千克饲料成本比对照组降低 0 .11元     

利用轮虫和枝角类培育水花技术

水花至夏花的培育在鱼的整个养殖过程中是很重要的一环.因为水花是鱼的整个生命中最脆弱的阶段,身体纤弱,取食能力低,饵料范围狭窄,对水质要求高,对外界条件的变化和敌害生物侵袭力差.因此,必须对水花进行小水体单独培育,给予充分地“照顾”,等到长到足够大的鱼种才可以和成鱼套养.利用小水体池塘培育轮虫和枝角类进行鱼苗培育是大连水产学院李永函教授,经过多年研究总结出来的一套先进的水花培育方法.这套方法于1993年5月开始在吉林省推广使用,它具有鱼苗成活率高,放养密度大,节省饵料等优点.为探讨该项技术在新疆阿克苏阿拉尔地区应用的可能性,我们在农大渔场进行了试验,取得了较好的效果.试验从5月20日水花下塘,到6月15日夏花出塘,在26天的生长期内,鱼苗从7.2mm长到30.9mm,成活率达48.3%,效果很好,该项技术值得在本地区推广使用.1 材料与方法1.1 选塘培育鱼苗(水花)的池塘是1995年主养鲢鱼成鱼的池塘,面积0.1675公顷,阳光充足,水源丰富,池底平坦,底泥厚度为15cm,水质较好,含盐度2‰,池形整齐,排灌水方便.1.2 池塘清整     

卡拉库尔羊TNF-α基因原核表达载体的构建及表达条件优化

利用反转录PCR (RT-PCR)技术扩增卡拉库尔羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因,连接到pET-28b载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同的IPTG浓度、时间、温度条件下诱导TNF-α的表达.结果表明,原核表达栽体pET-28b-TNF-α构建成功,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,优化的诱导表达条件为诱导温度37℃、诱导时间4h、IPTG浓度1.0 mmol/L.