大鼠OSP-1启动子克隆与表达检测

[目的]克隆大鼠卵巢特异性启动子（OSP-1）片段,并在细胞水平检测该启动子调控标记基因的组织特异性表达。[方法]参考已知大鼠OSP-1序列设计特异性引物,PcR扩增大鼠OSP-1启动子片段并与已公布的大鼠OSP—1序列进行比较。将OSP-1启动子定向克隆到去除CMV的pEGFP—N1载体,构建真核表达载体pOSP—1—EGFP．N1;重组质粒在脂质体LipofectamineTM2000介导下,分别转染水牛的颗粒细胞、乳腺上皮细胞和胎儿成纤维细胞,并于转染后12,24和48h在荧光显微镜下观察EGFP表达情况。【结果lOSP—l启动子扩增片段长480bp,与已公布的大鼠OSP-1序列的相似性达96％;应用启动子预测软件对所得序列分析表明,该扩增片段含有类似于TA—TAbox和CAATbox的核心启动顺式元件,并含有多个C／EBPbeta转录因子的结合位点;在颗粒细胞转染后12h可观测到绿色荧光表达,转染后24h荧光细胞增多,细胞形态均呈圆形、体积较大,48h荧光细胞数量骤减,且死细胞增多;在乳腺上皮细胞和胎儿成纤维细胞均未检测到EGFP基因表达。[结论]大鼠OSP-1启动子控制下的EGFP基因可在水牛颗粒细胞中特异表达,为构建水牛卵巢特并性表达转基因载体奠定了基础。     

苏云金芽孢杆菌cry1Ac28基因的克隆及原核表达

研究旨在克隆苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)Q-12的cry1Ac28基因并在原核载体中表达。应用PCR-RFLP法鉴定出Bt Q-12中含有cry1Ac基因,根据已知的cry1Ac全长基因序列设计特异引物,以Bt Q-12基因组DNA为模板扩增cry1Ac全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pEB相连接获得含有cry1Ac全长基因的重组质粒pEB-cry1Ac,经过序列分析表明,该基因编码区为3 537 bp,编码1 178个氨基酸,分子质量为133.3176 ku,pI为4.885,为弱酸性蛋白质,亮氨酸(Leu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)三种氨基酸含量最高,分别为8.06%、7.80%、7.72%,该基因在大肠杆菌BL21(DE3)菌株能够正常表达133.3176 ku蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为FJ610439,并由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry1Ac28。为进一步研究cry1Ac28蛋白功能和活性打下了良好的基础。     

蔗叶机械化粉碎还田负面效应分析与控制

通过对甘蔗叶粉碎还田前后土壤结构、营养成分以及还田技术方式进行分析和试验对比,初步探讨其主要原因,并提出了从种植、管理、技术手段等多方面相结合的控制技术措施。     

不同辐照下大豆胰蛋白酶抑制剂荧光的小波分析

用db4小波分析了不同剂量的60Co-γ辐照下大豆胰蛋白酶抑制剂(KSTI)的荧光发射谱.结果表明:随着辐照剂量的增加,KSTl蛋白分子破碎程度加深,光谱噪声加重,因此要获得KSTI光谱相关信息,需要对不同的光谱数据进行不同层次的小波分解和重构.     

小麦新品种比较试验及示范

2008-2009年度,对近年新审定的7个小麦品种进行品比试验,在陕西省西安市安排了3个点,筛选出在不同生态条件下5个最适品种。2009-2010年度在全市4个地方进行示范,为各生态区大力推广最适品种提供可靠依据。     

燕麦不同留茬高度对土壤风蚀的影响

以位于内蒙古阴山北麓武川地区耕地为试验地点,对燕麦不同留茬高度进行粗糙度、风蚀量和吹蚀量的监测,比较燕麦不同留茬高度对土壤风蚀的影响.结果表明,与传统耕作相比,燕麦田留茬能有效增大地表粗糙度和降低近地风速;随着燕麦留茬高度的增加,地表粗糙度增大、风蚀量和吹蚀量降低.     

茶园物理除虫机除虫效果试验研究

对影响茶园物理除虫机除虫率的出风角度、风速、行走速度分别进行单因素试验和正交试验。单因素试验结果表明,当出风角度为5°、风速18 m/s、行走速度0.7 m/s时,除虫率可达81.5%。正交试验结果表明,对除虫机除虫率影响大小依次为风速、出风角度、行走速度;极差分析的最好组合为出风角度5°、风速18 m/s、行走速度0.9 m/s,除虫率为80.5%。对2个试验结果进行验证对比分析,认为单因素最佳参数组合的除虫效果最好。     

棉花、豇豆科间杂交F1生殖器官的异常表现

以棉花为母本、豇豆为父本进行远缘杂交,F1生殖器官发生如下变异:单性花,5%的花只有雄蕊,雌蕊退化;多花,1个花柄上长出2朵花,各自具备完整的器官及组织;多花瓣,8%的花由6～7片花瓣组成,比正常母本多1～2片;子房多室,16%的花出现多个子房室,最多达到10个;26%的柱头出现畸形;10%的花粉粒带有2个萌发孔,并各具有萌发力.     

锌肥在作物上的应用

锌是作物生长发育所必需的营养元素之一。需锌较多的有玉米、水稻、棉花、大豆、甜菜、番茄、柑橘等。由于多年来施肥的不均衡性,导致许多作物出现缺锌症状,补施锌肥能够减轻或消除缺锌状况,达到高产优质的目的。一、作物缺锌症状正常植株中锌的分布是顶芽含锌量最高,叶中次之,茎中最少,整个作物的含锌量则是由下而上逐渐递增。植物体内色氨酸含量减少,生长素合成数量也随之降低,因而植株生长缓慢,矮小,叶少。二、作物对锌的吸收特点作物对锌的敏感程度常因作物种类不同有很大差异,禾本科植物中以玉米和水稻最为敏感,双子叶植物中马铃薯、番…     

基于图像识别技术的海参分级与计数设备的设计

针对海参不同规格分级和计数的需求,以图像识别技术为基础,设计了一套机电一体化高精度自动分级与计数系统。该设备通过图像识别、采集、计算和处理海参在传送带上的投影面积大小来确定海参的规格,进而对海参进行相应等级的分选和计数。结果表明：该设备具有对单体海参分辨误差率低、分选精度高、分选速度快、计数准确等特点,达到了预期效果。