流式细胞仪分离处理对种公牛精子活力、顶体完整率及线粒体活性的影响

Johnson等最早报道用流式细胞仪分离兔X和Y精子,并使用分离精子受精后产下后代.目前,牛精子分离和性别控制技术已经开始商业化应用,这对于奶牛和肉牛业的发展都有着巨大的应用价值.但是,大多数研究证明,分离精子的受精能力要低于未分离精子.     

阿拉伯马染色体G带核型分析

为了比较阿拉伯马与普通马的差异,利用培养的阿拉伯母马体细胞,制备和分析了其染色体组型.试验采用体外培养的阿拉伯马成纤维细胞,用常规染色体标本制作技术,制备了阿拉伯马染色体G带,并完成了染色体组型配对分析.结果显示阿拉伯马染色体数目为2n=64,包括31对常染色体和1对XX性染色体.其中1～13号染色体为中或亚中着丝粒染...     

哺乳动物的性别决定

动物有雌雄,人分男女,这就是我们常见的性别之分。那么一个受精卵是发育为雄性还是雌性,其决定因素在哪里?下面就性别决定的机制以及目前的一些分子水平研究结果作一简略介绍。1性别决定机制首先可以明确地告诉大家,哺乳动物的性别是由遗传来决定的,雌雄个体的性特征(sexualchanacter)是在不同的性激素刺激下的具体表现。性别在受精的一瞬间业已决定,或者具体地说是由受精时的精子来决定的。我们知道二倍体的动物染色体组成中,有一对专门决定个体性别的染色体称作性染色体(sexchromosome),雌性动物为XX,雄性动物为XY,其中Y染色体是决定动…     

白绒山羊性控胚胎生产及移植应用研究初探

应用X性控冷冻精液对超排供体白绒山羊进行人工授精,生产性控胚胎并进行鲜胚移植。结果发现,①用性控冻精和鲜精输精的供体母羊,平均卵子回收数分别为13.3和12.5枚,其中性控冻精组受精卵比例为29.6%（55/186）,极显著低于鲜精组94.0%（281/299）的比例（P<0.01）;②性控胚胎和普通胚胎移植受体母羊产羔率分别为42.2% 和58.1% ,二者差异极显著（P<0.01）;③性控胚胎移植受体母羊所产羔羊雌性所占百分数为100%,极显著高于普通胚胎移植（P<0.01）。表明通过白绒山羊X、Y精子分离、人工授精生产性控胚胎,同时结合胚胎移植技术,可以达到按照生产实际中的意愿得到性别控制子代白绒山羊的目的。     

不同种公牛X／Y精子分离效果及对体外受精能力的影响

本研究首先时比了3头种公牛的X/Y精子分离效果,并通过常规冻精和性控冻精的活力检测,来评价流式细胞仪分离及冷冻处理对不同种公牛精子分离效果的影响.应用体外受精试验,探讨了不同种公牛个体的常规冻精和分离冻精的受精和胚胎发育能力.试验结果表明,不同种公牛个体间除分离准确率外,精子的分离速率(4.1×103/s vs 4.5×103/s vs5.3×103/s,P<0.05)和死精率(19.3%vs 14.5%vs 11.0%,P<0.05)都存在显著差异.三头种公牛的性控冻精在体外培养过程中,精子活力的下降速率要显著快于常规冷冻精液组.不同种公牛个体的分离冻精组在4小时的精子活力也有显著差异(1号种公牛9.1%vs 2号种公牛22.1%、3号种公牛21.5%,P<0.05).此外,常规冻精和性控冻精在受精后的卵裂率和囊胚率存在显著差异(1号种公牛:64.0%vs 41.6%,26.9%vs 19.3%;2号种公牛:67.3%vs 52.3%,29.2%vs26.5%;3号种公牛:60.3%vs 43.1%,27.3%vs 29.9%).上述结果表明,不同种公牛个体间精子的分离速率、死精率、以及对分离冷冻处理的耐受性存在显著差异,造成其解冻后活力和存活时间不同程度的下降;但在体外受精试验中,3头种公牛的分离精子仍具有正常的受精能力,并能支持胚胎发育到囊胚阶段.综上结果表明,选择适宜的种公牛和降低分离及冷冻处理对精子的损伤,对于提高精子的分离效率、分离精液的品质和体外受精效率都有着重要的意义.     

不同培养系统牛体外受精囊胚的质量评价

采用双重荧光分染方法，结合免疫外科手术，对来自TCM199和SOF培养系统的牛体外受精囊胚质量进行了评价。结果显示，TCM199培养系统的囊胚发育率为31．9％(335／1074)，平均细胞总数为73．1，内胚团细胞数为16．8，其中生存细胞占99．5％；SOF培养系统的囊胚发育率为20．9％(248／1186)，平均细胞总数为56．2，内胚团细胞数为11．3，其中生存细胞占96．5％。证实，使用TCM199生产的囊胚质量和囊胚发育率优于SOF培养系统。     

牛3种妊娠相关糖蛋白可视早孕试剂盒检测效果比较

旨在确定牛妊娠相关糖蛋白(PAGs)可视早孕试剂盒与超声检查的差异、检测准确性的判断标准,并比较牛3种PAGs可视早孕试剂盒的检测效果。采用酶联免疫吸附试验法检测牛的“未孕(特异性)”和“怀孕(灵敏性)”,并将检测结果与超声检查相比较,以此判断牛PAGs的检测准确性及检测效果。结果显示,3种PAGs试剂盒的检测结果与超声检查不存在显著性差别,可以用作商业化检测。该类试剂盒的灵敏性与超声检查的一致性高于93%,但不能达到100%,原因在于PAGs存在一定的半衰期,灵敏性只能作为牛PAGs检测准确性的参考依据,不能作为最终判断依据。而3种试剂盒的检测特异性与超声检查的一致性均可达100%,该类试剂盒可以作为准确性最终判断依据。3种试剂盒中,试剂盒2、3可以在人工输精后第27天达到100%,比试剂盒1提前4 d。     

家畜繁育生物技术研究开发与产业化推广应用

家畜繁育生物技术包括人工授精、胚胎移植、体外受精、动物性别控制、动物克隆、转基因动物、干细胞等多元化的生殖生物工程技术。繁育生物技术的早期研究开发阶段主要集中在20世纪,到产业化推广应用经历了大约一个世纪的历程。目前,包括动物细胞性别控制、转基因-克隆技和干细胞技术已经进入产业化应用阶段,并且在人类疾病治疗方面显示了潜在的应用前景。     

荷斯坦公牛X和Y精子核形态差异及其影响因素分析

旨在分析荷斯坦公牛X和Y精子核形态(包括精子大小和形状)及其差异,探究流式分选及分选后冷冻对公牛X和Y精子核形态的影响.本研究使用荧光显微镜拍摄15头年龄相当、健康状况良好的荷斯坦公牛X和Y精子冷冻前后及新鲜精液分选前后共6类精子核图像,利用Image J插件Nuclear Morphology Analysis分析3...