绵羊c-Myc与EGFP融合蛋白的真核表达及其对细胞增殖的调控作用

为了探讨c-Myc基因对细胞增殖及相关基因表达的调控作用，本试验构建了c-Myc-（G₄S）₃-EGFP融合基因的真核表达载体pc-Myc-EGFP，并利用生物信息学分析了其结构和理化特征。转染后分别通过细胞计数和qRT-PCR检测了其对绵羊胚胎成纤维细胞（sheep embryonic fibroblasts，SEF）增殖及相关基因表达的影响，并利用启动子分析软件解析了相应的表达调控机制。酶切鉴定和测序结果表明，载体构建成功。生物信息学分析表明，绵羊c-Myc蛋白主要定位于细胞核，含有螺旋环螺旋（helix-loop-helix，HLH）结构域，其分子量为48 474.78 u。融合蛋白c-Myc-（G₄S）₃-EGFP有较强的亲水性，且含有31个磷酸化位点。因（G₄S）₃有较高的灵活度（9.848 5），两侧的c-Myc和EGFP都保持各自的空间构象且互不干扰。进一步的细胞试验结果表明，重组质粒pc-Myc-EGFP在SEF中能够表达。过表达c-Myc促进了SEF的增殖，使cyclin D2、Cdk4、Cdk6、cyclin E1、cyclin A2、cdc25A mRNA的表达水平分别升高至5.20、3.10、6.54、6.52、23.37和8.22倍（P<0.01），E2F1 mRNA的表达升高至1.83倍（P<0.05）。启动子分析结果表明，各基因的5'调控区存在c-Myc和E2F1的结合元件。综上所述，绵羊c-Myc通过上调细胞周期相关基因的表达促进SEF细胞增殖，c-Myc的作用机制可能是通过直接作用于靶基因5'调控区的E-box元件，也可能是通过其他转录因子（如E2F1）的间接调控作用而实现。     

汽车电子技术的发展方向

随着汽车工业的迅速发展,汽车早就不是那个只是代步的工具,汽车的车型、结构、性能不断地改变,而今汽车的发展和创新,主要决定于汽车电子技术装置的采用、改进及创新,汽车正向一个电子化,智能化的方向发展,因此我们非常有必要探讨一下汽车电器的发展方向.     

中成药生化丸治疗耕牛胎衣不下

近几年来笔者试用中成药生化丸治疗耕牛胎衣不下6例,产后血水滞流11例,均获痊愈,疗效显著。1治法中成药生化丸,成份有当归、川芎、桃仁、干姜（炒炭）、甘草。功能主治为养血祛瘀,用于妇女产后恶露不行或行而不畅，夹有血块，小腹冷痛，每10丸一盒，每丸9g     

金银花贮藏期的害虫防治

金银花为我国名贵中药材.封丘早在20世纪70年代即成为全国著名的金银花生严基地,目前栽植面积2万hm2,年产干花600万kg.为了提高金银花储藏技术,笔者根据多年的经验,查阅有关资料,将金银花储藏期害虫防治方法总结如下.     

藏獒呃逆症中药治验

犬类呃逆症在兽医临床上罕见,笔者从医30余年仅遇此1例,现将治疗情况报道如下,供同行参考.     

两种氮肥在葡萄上应用试验

一、试验目的 通过对2种氮肥在葡萄上的应用试验,验证2种氮肥在葡萄上的施用效果,为推广提供依据。     

鉴别树种质量的简易方法

园林绿化工作已成为建设现代化、园林化城乡的重要内容，并且成为一个地区社会经济发展综合水平的重要指标。作为育苗农户来讲，这是可喜之事，但可喜之余，又往往对树木种子的质量犯愁。有些农户往往赔上了种子钱，还搭上了一年的工夫，连棵苗子也没见到，怎样避免这类事情的发生?现介绍几种鉴别种子质量的简易方法供参考：     

延安市城市森林树种草种调查及其评价

延安市城市森林树种草种调查和分析表明,延安市城市林业栽植树(草)种少,共39科113种,选择余地小,不能满足城市绿地类型多样性和植物多样性的要求,乔、灌、草配置比例不合理,城区园林注重视觉效果,忽视改善环境质量的生态功能,对此提出了建议。     

饲料中雷洛西芬的测定

采用高效液相色谱法,紫外检测器,测定配合饲料中的雷洛西芬,最低定量限为0.5 mg/kg,添加浓度为0.5~5 mg/kg时,回收率为88%~99%,变异系数(RSD)低于9.3%。该方法不受其他药物等的干扰,适合于配合饲料中雷洛西芬的测定,为更好的监控雷洛西芬在饲料中的添加,控制畜产品的质量,确保食品安全提供了良好的技术支持。     

高压液相色谱仪测定维生素B_(12)

维生素Ｂ１２是动物体内必不可少的一种维生素，由于Ｂ１２在酸碱环境中易失效，且易受盐酸硫胺素和抗坏血酸等的破坏，因此近几年市场上出现单纯的马。预混剂，一般多为０．０１％和０．００５％两种规格。由于０．０１％和０．００５％的Ｂ１２预混剂中Ｂ１２含量太低，用ＧＢ９８４１－８８测定其含量时因称样量过大（分别为２０９和４０ｇ），给操作带来了很多不便，且测定结果不准确。笔者经过反复试验，利用高压液相色谱仪较好地解决了０．０１％和０．００５％Ｂ１２预混剂的含量测定问题。１仪器和试剂高压液相色谱仪，带Ｃ１８柱；…