猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

试验根据猪链球菌2型荚膜多糖（CPS）抗原设计CPS2J基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×10¹拷贝/μL,是普通PCR的10倍;特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌;重复性试验变异系数为0.37%~0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规PCR方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。     

中草药添加剂"羊壮宝"饲喂羔羊增重效果的研究

在羊的日粮配合精料中添加中草药添加剂"羊壮宝",饲喂7月龄的萨福克羔羊,研究其对羔羊增重性能的影响。经过40 d的饲养试验,结果表明:添加"羊壮宝"的试验组与未加添加剂的对照组相比差异显著,试验组羔羊的日增重提高了92%,试验组每只羊比对照组羊只每天多收入1.57元。     

饲料生产过程控制与质量追溯系统的建立

<正>饲料产品的质量安全不仅取决于饲料原料和配方,还决定于加工过程,严格控制饲料加工过程,对全面提升我国饲料质量安全水平,确保动物性食品安     

布鲁氏菌外膜蛋白16单克隆抗体的制备及初步应用

旨在制备布鲁氏菌外膜蛋白16(OMP16)单克隆抗体,建立OMP16抗体竞争ELISA方法,为布病临床防控提供免疫血清学检测手段。本研究选取保守性高、免疫原性良好的布鲁氏菌OMP16,经原核表达获得携带GST或His标签的重组OMP16(rOMP16)。利用杂交瘤技术筛选可稳定分泌OMP16特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经亚型鉴定、细胞核型分析和抗体交叉反应性试验分析单抗性质。制备小鼠腹水并纯化,方阵滴定法建立布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法。结果表明,成功构建OMP16原核表达系统,经表达、纯化获得rGST-uOMP16和rHis-OMP16。筛选到1株遗传稳定的OMP16特异性杂交瘤细胞株,命名为B7;经鉴定,该抗体亚型为IgM-κ型,可识别目的蛋白,与标签蛋白无交叉反应。建立了布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法,该方法与试管凝集试验检测结果相比总体符合率为90.53%,显示出良好的一致性。本研究有望为布鲁氏菌病的临床防控提供特异性高、敏感性好的免疫血清学检测方法。     

饲粮组成对育肥羔羊肠道微生物菌群结构的影响

为研究饲粮组成改变对育肥羔羊肠道菌群结构及多样性的影响,选择生长发育良好、体重相近的2月龄蒙系公羔羊76只,随机分成2组,每组38只,分别饲喂不同的饲粮,对照组为精料+苜蓿饲粮,处理组为精料+全株玉米青贮+苜蓿+花生秧的全混合饲粮,试验期122 d,其中预试期20 d.试验结束后,每组随机选取4只羔羊屠宰并采集小肠及盲...     

草地早熟禾PpGA2ox基因启动子的克隆及功能分析

为了研究草地早熟禾(Poa pratensis L.)GA2-氧化酶基因(PpGA2ox)的启动子,利用染色体步移的方法从草地早熟禾中克隆得到1109bp的PpGA2ox基因启动子序列。Plant CARE在线预测结果表明该启动子序列中存在CAAT-box、TATA-box等启动子基本顺式作用元件以及响应干旱胁迫和茉莉酸甲酯诱导的调控元件。构建PpGA2ox基因启动子与GUS报告基因融合的植物表达载体转化拟南芥,阳性植株GUS组织化学染色结果表明PpGA2ox基因启动子可以驱动GUS基因在拟南芥中表达并且表达具有组织特异性。与对照相比,激素处理及非生物胁迫下GUS基因表达量发生变化,推测PpGA2ox基因的表达可受到激素及非生物胁迫调控。     

饲用酸化剂在家禽生产中的研究应用进展

酸化剂具有提高畜禽生产性能、调节畜禽机体免疫能力、促进其肠道健康等功能,目前作为一种安全、绿色的“替抗”产品受到饲料行业的广泛关注。文章从酸化剂的类型、主要功能及其在家禽生产中的研究应用展开综述,并对影响酸化剂应用效果的诸多因素加以总结,以期为酸化剂在家禽生产中的研究应用提供科学参考依据。     

不同稀释液配方对种猪精子活力的影响

研究以杜洛克和大约克种猪精液为研究对象,通过精液质量分析系统分析了不同配方的稀释液对精子活力的影响。结果发现4种配方对两个品种猪精液保存效果各不相同,对杜洛克种猪,在24 h、48 h和96 h内,配方4的保存效果最佳,配方2的保存效果最差;对大约克种猪,24 h和96 h内配方2保存效果最佳,48 h内配方4保存效果最好。因此建议在实际生产过程中分别选择配方4和配方2用于杜洛克和大约克种猪精液稀释和配种,且17℃保存时间不宜超过24 h;同时,配制的稀释液不用高温高压灭菌处理,以免引起相关物质变性而影响保存效果。     

日本结缕草ZjPPH2基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

利用RACE技术从日本结缕草中克隆得到1个脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶基因ZjPPH2(GenBank登录号:MG870086)。其开放阅读框为1140bp,编码379个氨基酸。构建系统进化树发现,ZjPPH2蛋白与高粱亲缘关系最近。通过染色体步移的方法得到ZjPPH2基因ATG上游1699bp序列,PLACE在线预测结果表明,其启动子序列上具有响应ABA、MeJA、SA的调控元件及若干光响应元件。亚细胞定位结果显示,ZjPPH2定位于叶绿体。荧光定量数据表明,ZjPPH2基因在衰老叶片中的表达量最高,且受ABA、MeJA、SA及黑暗处理的调控。     

山东省猪腹泻病例中PEDV、TGEV和PRV的感染调查与分析

为了解山东省规模化猪场由猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪伪狂犬病毒（PRV）引起猪病毒性腹泻的流行情况,自2014年1月至2016年12月,对来自山东省各地规模化猪场的猪腹泻病料（共3 035份）进行PCR检测。结果显示,PEDV、PRV和TGEV阳性率分别为67.49%、9.33%和3.29%;3年间,PEDV阳性率在2014年第四季度最低,为48.15%,2015年第四季度阳性率最高,为88.57%,2016年各季度阳性率相对2015年呈波动下降趋势;TGEV阳性率在2014年第四季度最高,为18.52%,2015年第三季度阳性率为15.38%,2016年第一季度阳性率为6.67%,其他季度未检测出阳性病料;PRV阳性率在2016年第二季度最高,为15.68%,除2014年第一季度未检出阳性病料外,2014年第二季度阳性率最低,为2.56%。通过对69份被动送检的病料进行PEDV、TGEV和PRV混合感染检测发现,这部分病料中PEDV、TGEV、PRV阳性率分别为86.96%、5.80%和37.68%;总单独感染率为69.57%,PEDV、TGEV和PRV单独感染率分别为57.97%、1.45%和10.14%;总混合感染率为30.43%,PEDV/PRV、PEDV/TGEV和TGEV/PRV混合感染率分别为26.09%、2.90%和1.45%;总单独感染率比总混合感染率高。结果表明,山东省存在PEDV、PRV和TGEV 3种病毒流行,存在PEDV/TGEV、TGEV/PRV和PEDV/PRV的混合感染,混合感染中主要为PEDV/PRV混合感染,不存在PEDV/PRV/TGEV的混合感染。目前PEDV是引起山东省猪病毒性腹泻的主要病因,本试验结果可为山东省猪病毒性腹泻的诊断和控制提供参考。