根癌农杆菌介导荔枝遗传转化研究

利用带有内含子的GUS基因(uidA)的瞬时表达,研究影响根癌农杆菌介导荔枝胚性愈伤组织遗传转化的若干因素。结果表明:在AGL-1、LBA4404和EHA105三种菌株中,EHA105对荔枝胚性愈伤组织的侵染力最强;采用2d的共培养时间既有较高的瞬时表达率,又避免了农杆菌的过度生长;0.5×10~8个细胞/mL的菌液密度为最佳侵染浓度;继代培养15d的胚性愈伤组织处于最旺盛分裂的时期,是转化的合适受体;愈伤组织转化前干燥处理对uidA瞬时表达率的提高有一定的促进作用。使用优化的农杆菌侵染条件获得了稳定表达uidA基因的荔枝抗性愈伤组织。     

新中国果树科学研究70年——龙眼

新中国成立70 a(年)以来,我国龙眼科学研究取得长足进展,在龙眼种质资源、遗传育种、采后生物学、生物技术等研究领域领跑国际同类研究。建立了国际上资源数量最多、类型最为丰富的国家级龙眼种质资源圃,杂交育种培育出有不同香气、留树保鲜期长、成熟期配套、优质丰产等优异性状的适宜轻简化栽培的系列新品种;利用新育成的不同熟期龙眼品种,结合催花技术和生态差异选择,在我国实现龙眼鲜果的周年供应;研发出了龙眼安全保鲜物流新技术;先后构建了龙眼的基因组草图和精细参考基因组图谱,促进龙眼基础研究进入了功能基因组学和分子育种研究时代。未来应进一步加强龙眼产业发展的基础研究与关键性技术的研发创新。     

雪柑试管苗不定根高频率诱导和高效再生体系的建立

以雪柑实生苗上胚轴为材料,建立了高效离体培养再生体系。上胚轴纵切结合前期暗培养,在MS附加6-BA 3mg/L、蔗糖30g/L培养基中,不定芽诱导率为100%,每个外植体平均诱导的不定芽数达33.8;不定芽在1 000mg/L IBA溶液中浸泡10min后,移入1/4MT(大量元素) 1/2MT(其它元素) 10g/L蔗糖的液体培养基中,采用滤纸桥法进行培养,生根率达100%,平均根数2.5条;移苗成活率达100%。     

基于在线课程的园艺植物育种学混合式教学改革

园艺植物育种学是很多高校园艺专业的核心课程之一,在园艺学科建设和人才培养方面都发挥着重要作用。为适应"宽口径、厚基础"人才培养规格的要求,园艺植物育种学教学上面临着教学课时少、教学任务量大的现状,传统的课堂教学方式很难取得良好的教学效果。随着在线课程的迅速发展,为解决这些问题提供了可能。可在开设园艺植物育种学在线课程的基础上,探索混合式教学模式,以期实现线上线下教学的有机融合,提升教学效果。     

Pichia pastoris表达β-葡萄糖苷酶基因研究

采用Pichiapastoris(毕赤酵母)表达系统表达拟南芥β-葡萄糖苷酶基因(AT5g44640),获得了有活性的目的蛋白.研究了影响β-葡萄糖苷酶基因表达的因素.结果表明,表达载体整合拷贝数、不同P.pastoris菌株、甲醇体积分数、诱导培养时间和诱导培养起始的D(600nm)等对β-葡萄糖苷酶的产量都有一定的影响.     

罗汉果遗传转化受体再生体系的建立及发根农杆菌转化初探

以罗汉果品种“青皮果”试管苗的茎段和叶片为外植体,研究适合于遗传转化的受体再生系统, 并进行了发根农杆菌转化的初步研究。试验结果表明茎段的再生能力强于叶片,且对农杆菌敏感,是 进行遗传转化合适的受体材料。在MS基本培养基附加BA 1mg/L、KT 1mg/L、NAA 0．2mg/L、蔗糖30 mg/L培养基中,20d龄的茎段不定芽诱导率为100％,平均每个外植体诱导的不定芽数达到9．7个,移 苗成活率90％以上;外植体培养前的割伤处理有利于提高出芽数;发根农杆菌转化茎段诱导出毛状 根。罗汉果毛状根的诱导和培养将为罗汉果药用成分的研究和开发提供新的途径。     

授粉方式与疏果时期对焦核龙眼的影响

 通过去雄花套袋、自花授粉、自然异花授粉,不同时期疏果,以及花粉萌发力的测定,研究了闽焦64-1、闽焦64-2的座果和焦核率情况。结果表明：焦核品种的花粉大部分败育,花粉萌芽率均低于大核品种;焦核龙眼无单性结实特性,异花授粉是其座果所必需的;在并粒期与关公刀粒期疏大果有利于提高焦核率。     

琯溪蜜柚成年态茎段无菌系建立的影响因素

以琯溪蜜柚田间成年树茎段为材料,研究外植体消毒方法和茎段不同成熟度等因素对无菌系建立的影响。试验结果表明,经70%酒精处理30 s、400 mg.L-1头孢拉定浸泡30 min的预处理后,用0.1%升汞溶液消毒5 min结合10%NaClO消毒30 min的方法,半木质化茎段的成功率最高,达83.3%;外植体切成5 cm长进行消毒以及培养基中添加活性炭有助于减轻外植体的褐变。     

龙眼LEAFY同源基因片段的克隆和表达

研究克隆的龙眼（Dimcarpus Longan Llour.）LFY同源基因（LFY）保守区片段在不同组织器官以及"冲梢"逆转成的营养芽中的表达情况,为进一步鉴定龙眼LFY同源基因的功能及分析其在龙眼花序的冲梢"过程中的作用机理奠定基础。根据不同物种LEAFY同源基因保守区序列设计简并引物,从 红核子"龙眼（D.longan Lour.cv.Red Seed）中克隆了425bp的cDNA片段。同源性比较结果表明,获得的序列为龙眼LEAFY 同源基因（LLFY）;同时还获得了1816bp的LLFY基因组序列片段并进行了序列分析。通过RT-PCR研究LLFY在6种龙眼不同组织器官的表达发现LLFY在花序芽和花芽中的表达量最高,叶芽中有微量表达,叶片和茎段中没有表达;在冲梢"逆转成的营养芽中,LFY的表达量明显高于叶芽     

龙眼ISSR反应体系的建立和优化

对影响龙眼ISSR－PCR扩增反应的各个参数进行优化,建立适合龙眼的ISSR反应体系：PCR反应体积为20μl,其中模板DNA 25ng,引物0.2μmol/L,dNTP 100μmol/L,Taq DNA聚合酶0.5U,MgCl2 2.5mmol/L,10×PCR缓冲液2.0μl;扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性1min,退火温度1min,72℃延伸90s,40个循环;72℃延伸7min