转大麻哈鱼生长激素基因鲤食用安全——生殖毒性分析

以转大麻哈鱼生长激素基因鲤和普通鲤鱼肉(受试物)作为小鼠的饲料基础蛋白成分,以10%、5%、2.5%的比例掺入饲料喂饲小鼠,并以常规大鼠饲料为阴性对照,采用二代繁殖试验法观察受试物对实验动物生殖周期全过程的影响,检测转基因鲤作为食物对实验动物小鼠生殖过程的毒性作用.结果表明,对各代各剂量组试验小鼠全部生殖毒性指标的检测...     

鲤鲫杂交回交子代的染色体数目及倍性

采用PHA和秋水仙素体内注射,制备鲤鲫杂交回交子代鱼(鲤鲫杂交♀×鲤鱼♂)的染色体,结果表明:鲤鲫杂交回交子代染色体组由150条染色体组成,按着丝粒位置染色体组型可分为4组,每个染色体小组均由3条同源染色体组成。鲤鲫杂交回交子代鱼的染色体数目为3n=150 条,染色体臂数NF=234,核型公式为:3n=60m 24sm 36st 30t。鲤鲫杂交回交子代的DNA相对含量是二倍体鲤鲫杂交肾细胞DNA相对含量的1.54倍,与细胞染色体试验结果一致,说明该鱼是以三倍体细胞为主的回交种。     

镜鲤多家系体长和体质量QTL定位分析

为了克服单个家系数量性状位点(QTL)检测效率低、假阳性高等缺点,实验利用250对微卫星(SSR)标记对镜鲤8个全同胞家系的522尾子代进行基因组扫描,采用半同胞家系的分析策略对镜鲤体长(SL)和体质量(BW)性状进行QTL分析。结果显示,基于父系的QTL分析,共检测到4个QTL区间,其中,3个体长的QTL中,1个为95%基因组水平(genome-wide)显著性,位于LG24,可解释表型变异率为20.3%;其余2个均为95%染色体水平(chromosome-wide)显著性,分别位于LG6和LG30,可解释表型变异率分别为11.9%和11.6%。1个体质量的QTL达到99%基因组水平,位于LG24,可解释表型变异率达到38.3%,且与体长QTL区间重叠。基于母系的QTL分析,共检测到8个QTL区间,其中,5个体长的QTL中,1个为99%染色体水平,位于LG8,可解释表型变异率为16.6%;其余4个均为95%染色体水平,分别位于LG24、LG30、LG31和LG45,可解释表型变异率为9.6%~14.2%,且位于LG24和LG30上的QTL为父母本共有;3个体质量的QTL均与体长QTL区间重叠,1个为95%染色体水平,位于LG24,其余2个均为99%染色体水平,位于LG30和LG45,可解释表型变异率分别为14.1%和13.6%。进一步分析发现,位于LG24上的体长和体质量QTL区间重叠且均为父母本共有,体质量的3个QTL均与体长QTL存在重叠区域且呈现成簇分布的特点。本研究结果不仅可以为鲤分子育种提供更可靠的标记,而且为家系和品种间QTL变异规律的探索提供基础数据。     

转生长激素基因鲤鱼与正常鲤鱼经济性状的比较

对1-3龄转大麻哈鱼生长激素基因鲤鱼和正常鲤鱼在高寒地区的池塘的生长、生活力、抗寒、抗病等主要经济性状进行了比较。实验结果表明，转基因鲤鱼的生活力、抗寒、抗病等经济性状与正常鲤鱼经t值检验均无明显差异，其抗病能力稍弱于正常鲤鱼。而转基因鲤鱼的群体中其生长个体差异大，有的个体的生长明显快于正常鲤鱼；在试验鱼群体中最大个体体质量比对照组群体中最大个体体质量分别提高了52.5％，46.0％，76.0％，这说明外源基因的导入对部分受体鱼有促生长效应，促进了转基因鱼的生长。     

乌鳢的人工繁殖及仔鱼摄食生长研究

进行了黑龙江地区乌鳢的人工繁殖和仔鱼摄食生长研究，初步摸清了乌鳢的人工繁殖条件、催产方法、产卵和孵化等，并对受精卵和鱼苗的色彩变化进行了描述。仔苗的摄食生长实验表明，仔鱼不摄食人工鲟鱼开口饲料，这一阶段可进行鱼苗发塘，利用池中天然饵料喂养。仔鱼孵出4天卵黄囊吸收消失后，进行不同时间投喂活铒对鱼苗生长影响试验，在卵黄囊消失后1-3内天开始投喂活铒的鱼苗可快速生长，在4-7天内开始投喂的生长明显减慢，8天以后才开始投喂的已不能摄食活铒。     

梭鲈GH基因序列特征及其在生长差异个体间的表达分析

本研究旨在克隆梭鲈(Sander lucioperca)生长激素(growth hormone, GH)基因, 探究其序列特征及其表达量与梭鲈生长的相关性, 以期为梭鲈生长的分子机理研究鉴定基础。研究采用 RACE 技术从梭鲈垂体中克隆了 GH 基因, 其 cDNA 全长为 926 bp, 包含 74 bp 的 5′非翻译区、237 bp 的 3′非翻译区和编码 204 个氨基酸的开放阅读框。 氨基酸多重比对发现, 梭鲈 GH 与黄金鲈(Perca flavescens)、河鲈(Perca fluviatilis)的氨基酸序列相似性分别为 97.04%和 94.05%, GH 基因在鱼类和哺乳动物中都存在四个保守的半胱氨酸残基位点。应用实时荧光定量 PCR 技术分析了 GH 基因在梭鲈各组织和体重极端差异个体间的表达特征, 结果显示, GH 基因在梭鲈各组织中均有表达, 垂体中相对表达量最高, 脑次之, 与其他组织相比差异极显著(P＜0.01)。GH 基因表达量与梭鲈体重呈正相关, 4 个组织中 GH 基因表达量均为体重极大组高于极小组, 其中垂体和脑中差异极显著(P＜0.01), 肌肉中差异显著 (P＜0.05)。因此, GH 基因可以作为梭鲈生长候选基因用于分子选择。本研究结果可为进一步解析 GH 基因调控梭鲈生长发育的分子机制研究提供参考。     

几种鱼类的受精卵注射外源基因后孵化率的比较研究

用显微注射方法，将融合基因(鲤MT启动子基因与大麻哈鱼生长激素基因)分别导入虹鳟Oncorhynchus mykiss、鲤Cyprinus(cyprinus)carpio haematopterus和鲫Carassius aurautus gibelio的受精卵中，注射外源基因后受精卵的孵化率分别平均为6．4％、34．0％和35．70％，按孵出的鱼苗数计算成活率，分别研究了各实验中注射后3种鱼受精卵孵化率的差异及影响因素。经t值检验，鲤与鲫注射后的孵化率无显著差异，而与虹鳟受精卵的孵化率比较有显著差异，说明显微注射在这几种鱼受精卵上的转基因孵化效果明显不同。     

利用SSR及EST标记对鲤鱼饲料转化率的QTL分析

利用137个SSR(simplc sequence repeat)及EST(expressed sequence tag)标记,对柏氏鲤(Cyprinus pelle grini)/荷包红鲤(Cyprinus carpio wuyuanensis)抗寒品系的BC1F1群体93个个体进行了基因型检测.利用Windows Map Manager2.0的标记回归法进行了饲料转化率数量性状单标记回归分析.检测结果得到了8个微卫星标记(HLJ133、HLJ360、HLJ380、HLJ562、HLJ740、HLJ852、HLJ930和HLJ1420)和2个EST标记(HLJE318和HLJE417)与鲤鱼饲料转化率相关,对性状的表型贡献率为4%～11%.对同一标记的不同基因型间饲料转化率性状进行了显著性比较,通过ANOVA检验找到了相关基因型,标记HLJ360、HLJ380、HLJ562座位上,分别对应基因型212/212、236/224、220/220与饲料转化率性状正相关.本研究检测出的与鲤鱼饲料转化率性状相关的标记及基因型,为鲤鱼的QTL定位及分子标记辅助育种(MAS)提供了有效的依据.     

镜鲤体重相关分子标记与优良子代的筛选和培育

根据性状相关分子标记的QTL分析结果进行品种培育是分子标记用于水产育种研究的重要方向之一。本研究利用镜鲤与体重相关的3个基因座(HLJ302、HLJ338、HLJ343)作为快速生长的标记,筛选出一批镜鲤亲本进行繁殖,对得到的子代进行基因分型,并将基因分型结果与检测的最大10尾个体与最小10尾个体进行比较,结果表明最大10尾具有优势基因型为每尾1.7个,最小10尾具有优势基因型为每尾0.7个,生长速度快群体与生长速度慢群体在体重相关基因型的富集上呈现显著性差异。同时选出具有富集体重相关优势基因型的子代且生长速度快的群体一个,2008年生产出子二代。综合性状好生长速度更快的镜鲤新品系正在培育之中。     

高寒鲤、红鲫杂交F_1同亲本形态学特征比较

鲤鲫杂交F_1、高寒鲤、红鲫主要形态学特征:体高/体长比为39.60％、39.45％、41.81%;体厚/体长比为17.22％、18.27％、19.99％;眼径/体长比为5.16％、5.62％、5.79％;体厚/头长比为56.33％、57.22％、66.42％;眼径/头长比为16.90％、17.60％、19.28％。鳞式分别为31(5-6)/6 33、36(6-7)/(6-8)40、26(6-7)/(6-7)29。第一鳃弓左侧腮耙数分别为34.20、21.64、42.93。上述指标除体厚/体长、眼径/体长、体厚/头长、眼径/头长鲤杂交F_1比双亲低以外,其它指标均介于双亲之间。从上述三种鱼同塘饲养生长对照来看,鲤鲫杂交F_1分别比亲本高寒鲤、红鲫生长31.18％、96.60％。我们认为鲤鲫杂交F_1是一个极有前途的新的养殖对象。