溶藻弧菌III型分泌系统vscC基因缺失株的构建(英文)

[目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapext ension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连接至自杀质粒pDM4,再转化入大肠杆菌SY327进行克隆,筛选阳性克隆子并进行PCR分析鉴定;提取阳性克隆子的自杀重组质粒pDM4-△vscC,用热休克法将其转入到大肠杆菌S17-1中,再经接合生殖的方式将自杀重组质粒导入溶藻弧菌ZJ51-O菌株中,利用抗生素筛选策略与蔗糖反向筛选系统,挑选疑似目的突变菌株,最后利用PCR鉴定与测序分析进行确证。[结果]溶藻弧菌ZJ51-O的vscC基因框内缺失突变株构建成功。[结论]该研究为进一步研究vscC基因的功能和T3SS在溶藻弧菌致病过程中所起的作用奠定基础,同时也为溶藻弧菌的其他基因突变株的构建和研究提供了参考和试验经验。     

水稻乳芽直播栽培技术

1 乳芽培育与直播初期的主要技术措施1.1 土地平整 乳芽直播作为不同于常规插秧、抛秧的水稻种植技术,对土地平整状况的要求较高。田块内地表不平度标准偏差一般不超过2～3 cm,绝对差值小于2cm的测点累积百分比应大于80％。地表平整是保证乳芽健康生长和节水的基础。试验表明采用激光平地一次作业即可达到要求。     

水稻乳芽直播栽培技术

1乳芽培育与直播初期的主要技术措施 1.1土地平整 乳芽直播作为不同于常规插秧、抛秧的水稻种植技术,对土地平整状况的要求较高.田块内地表不平度标准偏差一般不超过2～3 cm,绝对差值小于2cm的测点累积百分比应大于80%.地表平整是保证乳芽健康生长和节水的基础.试验表明采用激光平地一次作业即可达到要求.     

戊糖片球菌的耐酸及耐胆盐能力研究

本实验对戊糖片球菌进行耐酸、耐胆盐能力表征及模拟胃液和模拟肠液实验.结果表明,在pH 2.5、3.5条件下培养4h后,戊糖片球菌PP的活菌数分别能达到108 cfu/mL和1010 cfu/mL以上.在胆盐质量分数为0.1％、0.2％和0.3％的MRS培养基中培养4h后,戊糖片球菌PP生长良好,活菌数均在106cfu/mL以上,其中胆盐质量分数为0.1％时,戊糖片球菌PP存活率能达到133.3％.模拟胃液和模拟肠液实验结果表明,该菌株能够有效通过胃环境,能在肠道中繁殖.结果可见,戊糖片球菌PP具有较强的耐酸耐胆盐能力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种的要求.     

湖南省农村社会治安问题调查与防治对策思考

农村社会治安问题严重影响农村社会稳定,制约农村经济发展,已受到各级党委政府的关注。我省属于农业大省,如何防治农村社会治安问题,更好地促进我省农村社会稳定和经济发展尤为重要。为此,对我省农村社会治安问题的现状进行调查,分析我省农村社会治安问题的成因,在此基础上,提出各级党委政府高度关注农村社会治安,大力发展农村经济,积极开展农村地区社会主义精神文明建设和社会矛盾纠纷排查化解,推行农村社区警务,多措并举解决农村社会治安问题的构想。     

人工神经网络的混合算法在发动机故障诊断中的应用

提出一种基于混合神经网络的发动机振动故障诊断方法,即迭代前期采用BP算法而迭代后期采用梯度优化法进行计算。通过BP算法和混合算法对相同算例网络权值和阈值的计算,验证所提出的混合算法的有效性和实用性。     

犊牛阿维菌素中毒病例的解决

阿维菌素是阿维链霉菌发酵的天然产物,其兽用药由我国首先研究开发,具有优异的W,虫活性、较高的安全性,加之价格低廉,是一种新型、广谱、高效、安全的抗体内外寄生虫药,近年来广泛应用于兽医临床.正确使用一般不会发生中毒,但在实际工作中因粗心大意或对于体重推算不准,阿维菌素用量过大引起中毒的事件时有发生.     

棉属野生种旱地棉蛋白激酶基因GarCIPK8的克隆与功能分析

CIPK (calcineurin B-like calcium sensor interacting protein kinase)是植物钙感受器钙调磷酸酶B类似蛋白特定靶向的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在前期的研究中, 我们将棉属野生种D亚组旱地棉(Gossypium aridum)盐胁迫前后RNA混合样品进行转录组测序, 发现一CIPK相关基因存在较高的转录丰度。盐胁迫下荧光定量PCR分析表明该基因在根部表现诱导上调表达, 推测该基因可能参与植物在高盐胁迫下的生理调控。利用电子克隆及RT-PCR方法从旱地棉中克隆了一个ORF全长为1350 bp的蛋白激酶基因GarCIPK8。序列分析表明该基因编码的蛋白含有449个氨基酸, 分子量为51.12 kD, 理论等电点为8.13, 其N端催化结构域包含一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶域, C端具有植物CIPK蛋白家族特有的24个氨基酸组成的NAF保守结构域; 与水稻OsCIPK8蛋白的相似度为73.95%。为进一步验证其功能, 利用组成型高效强启动子CaMV35S和拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体并转化烟草, 经PCR和RT-PCR分子检测, 证明GarCIPK8基因已经整合到烟草基因组中, 并正常表达。T₁代转基因植株耐盐性鉴定结果表明GarCIPK8基因对提高转基因植株的耐盐性有较明显的作用, PEG干旱模拟试验也证明GarCIPK8基因可增强植株的抗旱性。