抗病与感病苹果叶片应答轮纹病菌侵染的蛋白质表达差异分析

从‘鸡冠’与‘富士’苹果的杂交后代中选择对轮纹病抗病的材料1-1-24和感病材料1-2-34的叶片为试材,在叶片正面主脉两侧各针刺一处,分别接种长有轮纹病菌（Botryosphaeria berengeriana f. sp. piricola）菌丝和蘸有无菌蒸馏水的PDA培养基饼。通过对接菌前和接菌后24 h的叶片总蛋白进行2-DE分离筛选和质谱检测鉴定,共获得27个差异蛋白,其中9个为胁迫应答蛋白,1个与防御反应相关,17个参与叶绿体光合作用、细胞代谢、核糖体、羧酸等相关合成或未知反应。对β–1,3–葡聚糖酶、酸性内切几丁质酶和AP15基因进行实时定量PCR分析,结果表明：β–1,3–葡聚糖酶和酸性内切几丁质酶是苹果叶片应答轮纹病胁迫的关键蛋白,抗病和感病的苹果叶片在接菌前关键蛋白含量的显著差异可能是导致抗病性不同的原因之一。     

农杆菌介导法将LFY基因导入嘎拉苹果的研究

以嘎拉苹果叶片为外植体,利用GUS瞬时表达率,对农杆菌介导法转化苹果的因素进行优化.结果表明:卡那霉素(Km)选择压在30 mg/L时,外植体预培养2～3 d后以OD600=0.3～0.5农杆菌菌液浸泡3～5 min,共培养3 d,延迟筛选3 d可明显提高M2叶片转化效率,GUS阳性率达50%.PCR检测初步证明,LFY基因已整合到苹果再生植株中.     

铁胁迫对苹果砧木根系活性氧含量及保护酶活性的影响

试验以SH40、M26两种苹果砧木为试材,研究了缺铁胁迫对根系组织中O2^-（超氧阴离子）含量及SOD（超氧化物歧化酶）、POD（过氧化物酶）活性的影响。结果表明：铁胁迫条件下SH加根系内O2^-含量升高,MDA含量降低,O2^-和MDA含量均高于M26根系内的。随着铁胁迫处理时间的延长,M26根系内SOD活性先升高后降低,POD活性一直升高;而SH加根系内SOD酶活性降低,POD活性先升高后降低。M26根系内SOD、POD活性均高于SH40。     

苹果花芽生理分化期外源亚精胺对叶片内源多胺含量的影响

以红富士苹果和新红星苹果为试材,研究了花芽生理分化期叶片内源多胺(PAs)的变化和外源亚精胺(Spd)对内源多胺含量的影响。结果表明,花芽生理分化期叶片内源多胺发生明显的变化,红富士苹果叶片内腐胺(Put)含量在5月29日达到高峰,亚精胺(Spd)和精胺(Spm)含量变化缓慢。而新红星苹果叶片内Put、Spd和Spm含量均在6月2日达到高峰。外源亚精胺(Spd)提高了花芽生理分化期红富士苹果叶片腐胺和亚精胺含量,内源亚精胺的含量在整个测定期都显著高于对照。对于新红星苹果外源Spd提高了叶片内源亚精胺和精胺的含量。外源亚精胺增加(Spd+Spm)/Put的比值,对红富士苹果效果好于新红星苹果。     

外源亚精胺对鸭梨自花授粉花粉管伸长及花柱蛋白表达的影响

为探讨外源多胺调控鸭梨自交不亲和的生理生化机制,分别以自花授粉和外源亚精胺处理后1~3 d的花柱为试材,测定了不同处理不同时期花粉管生长发育动态,利用双向电泳技术和质谱分析技术分析了外源亚精胺处理前后不同时期鸭梨花柱蛋白的差异表达。结果显示:与对照相比,不同浓度的Spd处理均能极显著促进花粉管生长,0.25 mmol/L Spd处理72 h后可使大量花粉管到达花柱基部;在自交花柱电泳图谱中发现了3种特异蛋白质,A蛋白质Mr A=28.0 k Da,p I=5.7;B蛋白质Mr B=28.5 k Da,p I=5.7;C蛋白质Mr C=22.0 k Da,p I=5.3,这3种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关;质谱分析获得了2个较好的蛋白点,分别为推定和假定蛋白。     

苹果砧木实生后代枝条电阻抗参数与抗寒性的相关性

以苹果砧木实生后代单株为试材,研究低温胁迫下苹果砧木实生后代枝条电阻抗（EIS）参数（胞外电阻率re、胞内电阻率ri、电阻率r1和弛豫时间τ）的变化,并分析电阻抗图谱法和常规的电导法测定的苹果砧木抗寒性的相关性。结果表明,随着温度降低,苹果砧木枝条的胞外电阻率re、胞内电阻率ri、电阻率r1和弛豫时间τ均减小。以苹果砧木枝条的EIS参数电阻率r1、胞外电阻率re、胞内电阻率ri求得的抗寒性与EL法测定的抗寒性呈显著性正相关（r=0.838～0.906）。r1测定的苹果砧木枝条的抗寒性与EL法测定的抗寒性相差10℃,不适合用于测定苹果砧木枝条的抗寒性。表明经低温胁迫后的苹果砧木枝条用re和ri可以测定苹果砧木枝条的抗寒性。     

拉枝时期对天红2号苹果幼树生长和内源激素含量的影响

为给苹果幼树拉枝管理提供技术参考,本试验以天红2号苹果幼树为供试材料,研究不同时期拉枝对苹果幼树中心干延长梢长度、新梢长度粗度、中间砧干径、品种干径、枝展和枝条翘头长度、枝条翘头角度、花芽量、新梢内源激素(IAA、GA₃、DH和KT)含量的影响。结果表明：随着拉枝时期推迟,中心干延长梢长度、中间砧干径、品种干径、新梢粗度、翘头长度、翘头角度和花芽量呈减小趋势,新梢长度和枝展呈增加趋势。5月25日拉枝处理苹果新梢内源激素IAA含量显著低于6月25日、7月25日、8月25日和9月25日拉枝处理,且其GA₃含量较低、DH含量最高、KT含量较高。综合认为,天红2号最佳拉枝时期为5月25日。     

三种苹果矮化中间砧不同入土深度对树体生长及果实品质的影响

本试验以天红2号/SH40/八棱海棠、天红2号/冀砧1号/八棱海棠、天红2号/冀砧2号/八棱海棠为材料,研究SH40、冀砧1号、冀砧2号中间砧4个入土深度(0、10、20 cm和30 cm)对树体生长及苹果果实品质的影响。结果表明,SH40、冀砧1号、冀砧2号中间砧随入土深度增加,树高、干径、枝展、主枝数、外围新梢长度、总枝量基本呈增加趋势。SH40入土10、20 cm处理果实纵径、可溶性固形物含量、固酸比显著高于其它处理,且入土20 cm处理苹果酸含量显著低于入土30 cm处理;冀砧1号、冀砧2号入土20 cm处理单果重、果实纵径、固酸比显著高于其它处理。综合分析认为,三种中间砧适宜入土深度,SH40为10～20 cm,冀砧1号和冀砧2号为20 cm。     

苹果矮化砧木P59离体叶片高效再生体系的建立

对苹果矮化砧木P59离体叶片再生条件进行研究,结果表明:当选用苗龄20~30 d的试管苗,取顶部第2~4叶位幼嫩叶片,横切2刀,远轴面向下接触培养基,再生培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+白砂糖35 g/L+琼脂6.2 g/L,暗培养20 d时,再生效率可达到85%,出芽数平均8个以上,建立了良好的再生体系。     

苹果不同矮砧与其对应中间砧植株POD、IOD酶活性的研究

 研究了 4种砧木、5种中间砧红富士苹果叶片内POD、IOD酶活性的季节变化规律、不同中间砧对红富士苹果树体生长的影响以及中间砧红富士苹果不同部位的酶活性变化。结果表明 ,各砧木与中间砧红富士苹果叶片内POD、IOD酶活性的季节变化规律相似 ;砧木与其对应的中间砧红富士苹果叶片内的酶活性之间呈极显著的正相关 ;不同矮化程度砧木之间及不同中间砧红富士苹果之间的POD、IOD酶活性差异较大 ,并且酶活性大小与砧木的矮化程度密切相关 ,即半矮化砧木的酶活性低于矮化、极矮化砧木的酶活性 ;比较不同中间砧红富士苹果各部位的酶活性表明 ,不同中间砧POD的酶活性在枝条韧皮部中的差异较大 ,而IOD在叶片中的差异较大 ;在 5月下旬和 9月下旬 ,中间砧红富士苹果叶片内的POD、IOD酶活性与树体的生长势达显著负相关 ,因此利用POD、IOD酶活性预测嫁接树生长势的最佳时期应分别为 5月下旬和 9月下旬