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11.
12.
猪2型圆环病毒广东株ORF2基因在大肠埃希氏菌中的表达 总被引:5,自引:1,他引:4
应用PCR扩增猪2型圆环病毒广东株ORF2后部一段基因,将PCR产物用K pn Ⅰ和Hind Ⅲ酶切后与同样处理过的pBAD/g ⅢB载体连接,转化TOP10细胞后挑取阳性克隆,酶切鉴定和测序后,用L-阿拉伯糖诱导,经SDS-PAGE和Western-blotting分析,表明ORF2基因在大肠埃希氏菌中得到了表达,表达的多肽为28 ku。 相似文献
13.
【目的】 研究纳米银(silver nanoparticles,AgNPs)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的作用,并初步分析其抗病毒作用机制,为PRRSV的防控提供新思路。【方法】 使用0.1875、0.375、0.75、1.5、3、6、12 μg/mL AgNPs处理Marc145细胞,采用CCK-8试剂盒评估AgNPs对Marc145细胞毒性,确定其安全浓度。通过显微观察、间接免疫荧光试验、病毒滴度测定、实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs体外抗PRRSV感染Marc145细胞的效果。通过间接免疫荧光试验和实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs对PRRSV的直接灭活效果。通过实时荧光定量RT-PCR方法分析AgNPs对不同感染复数(multiplicity of infection,MOI) PRRSV (0.0001~0.1)黏附和入侵Marc145细胞的影响,以及PRRSV感染Marc145细胞3、6、12、18和24 h后加入AgNPs对Marc145细胞增殖的影响。【结果】 AgNPs对Marc145细胞的最大安全浓度为1.5 μg/mL,0.375、0.75、1.5 μg/mL AgNPs均具有良好的体外抗PRRSV活性,0.375、0.75、1.5 μg/mL AgNPs均对PRRSV起一定灭活作用。AgNPs对不同MOI的毒株黏附和入侵Marc145细胞均有一定抑制作用,且不同时间(3、6、12、18、24 h)加入AgNPs对PRRSV增殖均有一定抑制作用。【结论】 AgNPs具有良好的体外抗PRRSV活性,体外抗PRRSV的作用机制包括直接灭活以及抑制病毒的黏附、入侵和增殖过程。 相似文献
14.
副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5能诱导机体产生免疫保护反应,同时可以用于特异性的血清学诊断,本试验选取P5蛋白进行抗原表位鉴定。首先通过PCR扩增P5F1(1~204aa),P5F2(170~296aa)及P5F3(280~371aa)3个片段,PCR产物分别定向克隆到表达载体pET32a(+)中表达纯化。根据ELISA和Western blotting结果确定P5F3片段(280—371aa)是OmpP5的免疫优势决定区。为了进-步对该免疫优势决定区进行抗原表住鉴定,设计了-套11个部分重叠的短肽,这些短肽覆盖全部280~371aa片段。每-个短肽合成1对寡核苷酸链,退火后插入表达载体pGEX-6p-1,与GST进行融合表达。用HPS阳性血清进行ELISA和Western blotting扫描,鉴定出其表位位于”。TGNTCDAVKGRKALIT351。通过序列分析证实该抗原表位在不同的HPS菌株中高度保守。本试验确定了位于HPSOmpP5上的-个抗原表位,为建立-种方便、快捷、适用于现地大规模样品检测的鉴别诊断方法奠定了基础,同时也为HPS新型亚单位疫苗的研制,以及研究病原茵感染和机体免疫过程中P5蛋白与宿主体内相应分子之间的相互作用提供了有用信息。 相似文献
15.
间伐和树体改造对柑橘密闭园产量和品质的影响及效益分析 总被引:3,自引:0,他引:3
以“鄂柑1号”椪柑密闭园为试材,设计隔行间伐(A)和隔株间伐(B)2种处理和不间伐的对照(CK),对它们的光照、树体生长、叶片干物质和叶绿素以及产量和品质的相关指标进行测定分析.3年的结果表明,各处理树冠内0~200 cm的光照强度远高于对照;除CK外,各处理的树冠覆盖率在3年间均逐渐增加,但B和A均小于CK;各处理叶片干物质含量和叶片叶绿素含量均显著高于对照;2种处理的公顷单产量在间伐当年均明显低于CK的,但到间伐第三年就可恢复,其公顷单产量与CK相当;3年果园改造后各处理的平均单果重、果皮亮度值(L)、果皮色泽指数(a/b)、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、可滴定酸的含量、优质果率等品质指标均好于CK,具体表现为处理A、B的明显好于CK的;各处理每年的修剪和病虫害防治成本大大降低,具体表现为A<B<CK.因此,适宜的间伐和树体改造方式除在短时间内产量有一定下降外,可从根本上改善果园光照状况、增加叶片干物质含量,提高光合效率和果品质量,而且从较大程度上降低生产成本,进而提高经济效益. 相似文献
16.
<正>1高接前的准备选交通方便、土壤肥沃、树龄4年以上的核桃楸,按株行距4m×5m定株,每丛保留1~2棵直立、健壮、无病虫害植株,砧木粗度应大于3cm,其余从基部刨除,667m2保留30~40株,再按等高线挖成水平撩壕。2高接优种的选择 相似文献
17.
海丰1052是以08-123为母本,F07-253-2-1为父本配制的早熟鲜食线椒一代杂种。始花节位为第7~8节,果实顺直,果面光滑,果肩略皱,辣味较强,青熟果亮绿色,老熟果鲜红色,果实纵径31.2cm,横径1.5cm,平均单果质量为32.6g,VC含量为672mg·kg-1,可溶性糖含量1.7g·kg-1,蛋白质含量为14.0g·kg-1,辣椒素含量为0.25g·kg-1。抗CMV、TMV,中抗疫病。一般每667m2产量3000kg左右。适合北方露地、秋延后大棚栽培,广东、广西、山西、陕西等地露地栽培。 相似文献
18.
19.
20.
2006年1月6日,中共中央总书记胡锦涛在中央纪委第六次全会的讲话中,将“反商业贿赂”列为今年六大要务之一12月24日,国务院总理温家宝在第四次全国廉政会议上,将“治理商业贿赂”作为今年反腐的重点之一;中纪委牵头,联合22个部委对商业贿赂进行专项整治。中国前所未有地向商业贿赂全面宣战。 相似文献