大丽轮枝菌木糖苷酶基因的鉴定及基于HIGS技术的功能分析

【目的】 从大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）中鉴定木糖苷酶基因,研究其与大丽轮枝菌致病力的关系,为解析大丽轮枝菌致病分子机制提供理论依据,同时为制定更好的棉花黄萎病防治策略提供科学依据。【方法】 利用生物信息学方法从大丽轮枝菌基因组数据库中鉴定全部木糖苷酶基因,并对基因编码蛋白的结构域、基因的染色体定位及进化关系等进行分析。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测木糖苷酶基因在不同抗/感棉花品种根系分泌物培养0、6、12、24和48 h大丽轮枝菌中的表达量。利用寄主诱导的基因沉默（host-induced gene silencing,HIGS）技术对木糖苷酶基因VdxyL3在大丽轮枝菌侵染过程中的功能进行初步分析。将VdxyL3的目标片段转化棉花,采用伤根法接种大丽轮枝菌Vd991,观察转化植株的表型,调查病情指数,同时利用qRT-PCR技术对植株中真菌生物量和VdxyL3的表达量进行检测。【结果】 利用生物信息学方法从大丽轮枝菌中查找出13个木糖苷酶基因（VdxyL1—VdxyL13）,其编码序列长度介于1 461—2 544 bp,蛋白质分子量介于38.78—90.97 kD,理论等电点介于4.67—5.89。结构域和进化树分析发现13个木糖苷酶基因中包括9个糖苷水解酶43家族成员、1个3家族成员和3个31家族成员。染色体定位分析发现13个基因分布在6条染色体上,未形成基因簇。qRT-PCR结果发现选取的6个基因均受到根系分泌物的诱导,在一种或多种根系分泌物中培养6 h或12 h后,表达量均明显升高,然后降低。其中VdxyL3受海岛棉根系分泌物诱导后表达量明显升高,表明该基因的表达明显受海岛棉根系分泌物的诱导。HIGS研究结果表明,接菌14 d和21 d后转化VdxyL3基因干扰片段的棉花发病明显较重,其病情指数（33.3和83.9）明显高于空载体对照（21.7和66.1）。qRT-PCR分析发现转化VdxyL3基因干扰片段的棉花植株茎中VdxyL3的表达量明显低于空载体对照,真菌生物量显著多于对照。【结论】 利用HIGS技术将VdxyL3基因沉默后,棉株的抗病性明显降低,表明VdxyL3在大丽轮枝菌致病及宿主-病原体互作过程中可能发挥着重要的作用。     

喀斯特山区城乡人类活动强度及其效应时空演变研究

[目的]探究城镇与乡村人类活动强度,以及城镇与乡村地区人类活动的经济效应、生态效应的时空演变,为全面定量评估城乡人类活动机制、生态文明建设与社会经济发展等提供一定理论支撑和决策指引。[方法]通过构建城镇与乡村地区的人类活动强度指数、人类活动强度阈值及人类活动效应等模型方法,对贵州省各地市城乡人类活动强度及阈值演变进行了研究。[结果]2010—2018年,贵州省各地市乡村人类活动强度减弱(降低7.57%～28.57%),城镇人类活动强度增强(增加22.72%～124.83%),城镇人类活动强度大于乡村人类活动强度。各地市乡村人类活动强度最低与最高阈值总体呈降低变化,但多数地市超过最高阈值(1.02～1.62倍),山区土地系统承受较高乡村人类活动强度影响。各地市城镇人类活动强度阈值呈增加变化,2018年城镇人类活动强度趋近最高阈值(0.940～0.997倍),城镇人地系统承受着较大压力。各地市单位城镇人类活动经济效应与单位乡村人类活动生态效应均呈增长变化(年均增长率8.60%～13.53%),单位乡村人类活动生态效应比城镇人类活动经济效应更显著(2.24～14.84倍)。[结论]尽管贵州省...     

闾山保护区管理现状及今后发展策略

辽宁医巫闾山国家级自然保护区(简称闾山保护区)是1981年辽宁省人民政府批准建立的省级自然保护区,1986年经国务院批准晋升为国家级自然保护区,它位于闾山中段,地跨义县、北宁两县(市)交界处。保护区管理局管护总面积11459公顷。下设朝阳、碾盘沟、老爷岭、森林公园四个管理处,全局在职职工126人。     

两个新疆棉花品种体细胞胚胎发生的比较研究

以新疆棉区主栽品种新陆早33号和新彩棉7号为实验材料,比较不同激素组合对两者体细胞胚胎发生过程的影响,以建立高效再生体系。结果表明,新陆早33号和新彩棉7号在2,4-D+KT的激素组合下出愈率均为100%,降低2,4-D浓度有利于胚性愈伤组织的分化,分化率分别达到60.0%和7.5%;在IBA+KT的激素组合下出愈情况相对较差,分别为72.5%和85.0%;继代几次后,两个品种的胚性愈伤组织分化率可分别达到45%和55%,新陆早33号和新彩棉7号分别在DK和IK激素组合下更有利于体细胞胚胎发生过程。进一步观察发现,新彩棉7号分化形成胚状体的能力比新陆早33号更强,两品种均能在6个月内获得再生植株。再生体系的建立,为新疆棉花开展分子育种工作奠定了基础。     

用敌鼠钠盐防治鸡场褐家鼠

<正> 近两年来,褐家鼠给我场造成了极大的经济损失。1989年因鼠害致死(鼠吃小鸡内脏、肉、吸鸡血等)的雏鸡数达3400只,占总死鸡数的14.4%;鼠吃饲料量为27吨(经普查老鼠平均日存数为2500只)。1990年因鼠害致死雏鸡数为8776只,占总死鸡数的38.22%;鼠吃饲料量为45吨(经普查老鼠平均日存数约5000只)。此外,鼠还咬鸡蛋、毁设备、传疾病,危害甚重。为了减少鼠害,我场先后采用了磷化锌,毒鼠磷、杀鼠灵、氟乙酰胺、敌鼠钠盐等化学杀鼠剂,并以玉米,小麦、黄豆作为饵料,进行了灭鼠试验。试验结果表明,以褐家鼠占优势的鸡场,采用了0.05%敌鼠钠     

毛皮动物能量代谢的研究进展

饲粮能量直接影响毛皮动物生产性能,如何真实评价动物对饲料能量的需要、利用及能量转化效率是能量代谢研究的重点。毛皮动物维持能量受动物的基础代谢、环境温度、饲养管理、品种、营养物质代谢热增耗等因素的影响。本文综述了毛皮动物能量代谢的研究进展,为毛皮动物精细化饲养和饲料的精准配制提供充足的理论依据。     

饲粮维生素B_2添加水平对育成期水貂生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响

本试验旨在研究饲粮维生素B_2添加水平对育成期水貂生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响。选取(65±5)日龄、体重[(1 213.38±72.72) g]相近的健康雄性短毛黑水貂96只,随机分为6个组,每组16个重复,每个重复1只水貂。采用单因素试验设计,各组饲粮维生素B_2添加水平分别为0(Ⅰ组)、2.5(Ⅱ组)、5.0(Ⅲ组)、10.0(Ⅳ组)、20.0(Ⅴ组)、40.0 mg/kg(Ⅵ组)。预试期7 d,正试期58 d。结果表明:1)饲粮维生素B_2添加水平显著影响水貂末重和料重比(P0.05),极显著影响水貂平均日增重(P0.01),其中以Ⅴ组平均日增重、末重最大,料重比最小。Ⅴ组平均日增重显著或极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组(P0.05或P0.01),Ⅴ、Ⅵ组料重比显著或极显著低于Ⅰ组(P0.05或P0.01),Ⅴ、Ⅵ组末重显著高于Ⅰ组(P0.05)。2)饲粮维生素B_2添加水平极显著影响水貂粗蛋白质消化率和粗脂肪消化率(P0.01),对水貂干物质采食量、干物质排出量和干物质消化率影响不显著(P0.05)。Ⅵ组粗脂肪消化率最高,Ⅰ组最低,Ⅰ组极显著低于Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P0.01)。Ⅴ组粗蛋白质消化率最高,极显著高于Ⅰ组(P0.01)。3)饲粮维生素B_2添加水平显著影响育成期水貂氮沉积、净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值(P0.05),对食入氮、粪氮和尿氮影响不显著(P0.05)。Ⅴ组净蛋白质利用率最高,显著高于Ⅰ和Ⅱ组(P0.05),与Ⅲ、Ⅳ和Ⅵ组差异不显著(P0.05)。Ⅴ组蛋白质生物学价值最高,Ⅴ和Ⅵ显著高于Ⅰ组(P0.05),与Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P0.05)。Ⅵ组氮沉积最高,Ⅰ组最低,Ⅰ组显著低于Ⅴ和Ⅵ组(P0.05),与Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P0.05)。综合各项指标,在本试验条件下,饲粮中维生素B_2添加水平为20.0 mg/kg(饲粮中维生素B_2水平为23.35 mg/kg)时,育成期水貂可以获得较好的生长性能及较高的营养物质消化率、氮利用率。     

木瓜蛋白酶用于鲜茧缫丝脱胶的工艺试验

为了实施绿色环保的鲜茧缫丝工艺,在鲜茧缫丝中采用木瓜蛋白酶进行脱胶处理,并建立基本的脱胶工艺技术,以脱胶率、解舒率和茧丝单纤维断裂强力作为考核指标,通过单因素试验研究脱胶工艺中木瓜蛋白酶用量、脱胶时间、脱胶温度、脱胶液p H值对鲜茧脱胶效果、缫丝性能和茧丝强力的影响。结果表明,上述工艺因素对鲜茧脱胶效果均有明显影响,确定用木瓜蛋白酶对鲜茧脱胶的工艺条件为:脱胶温度35℃,脱胶时间2 h,酶液质量浓度4 g/L,脱胶液p H值7.0。鲜茧在此工艺条件下的平均脱胶率为23.42%,平均解舒率达到82.4%,单根生丝纤维平均断裂强力达到12.52 c N。红外光谱表征鲜茧用木瓜蛋白酶脱胶后缫制的生丝与干茧用传统缫丝方法缫制的生丝在结构上没有明显的差异,热重分析2种茧丝样品的热稳定性也没有明显差异,但扫描电子显微镜下观察鲜茧缫制生丝的表面较光滑。建立的木瓜蛋白酶脱胶工艺技术可以用于鲜茧缫丝。     

棉花GhFAD2-1基因5’UTR内含子的克隆与序列分析

【目的】对棉花~(Δ12)-油酸去饱和酶基因Gh FAD2-1 5'UTR区的内含子进行克隆和序列分析,为研究Gh FAD2-1的表达调控奠定基础。【方法】利用5'RACE技术,克隆Gh FAD2-1的5'UTR序列,结合棉花基因组序列,克隆Gh FAD2-1 5'UTR内含子,并利用PLACE等生物信息学软件对其顺式作用原件进行分析。【结果】棉花A、D基因组的Gh FAD2-1 5'UTR中各含一内含子序列,全长分别为1 103 bp、1 111 bp;Gh FAD2-1成熟mRNA的5'UTR为77bp,转录的起点碱基为T;5'UTR内含子两个剪切位点分别AA-GG、CA-GC。该内含子包括一些典型的与光响应相关的作用元件,以及与激素和胁迫因素相关的应答元件等。【结论】克隆获得了棉花A、D基因组的Gh FAD2-1基因5'UTR内含子序列;明确其转录的起点碱基及5'UTR内含子的剪切位点,为进一步在分子水平上研究Gh FAD2-1功能及其表达调控规律,为植物的遗传改良奠定了基础。     

供给侧改革视角下精准扶贫资金投入机制的构建

基于供给侧改革视角,从扶贫资金供给端着眼,对精准扶贫资金投入问题进行分析,提出构建基于供给侧改革的精准扶贫资金多方投入机制:以财政资金为基础的政府供给端,以政策性贷款为重点的资金供给端,以引入社会资本为动力的市场供给端,以农户自筹为补充的活力供给端。