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猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界上主要的猪传染性疾病之一,目前,疫苗和抗病毒药物只能提供有限的保护。本研究选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)JXA1-R株ORF1a、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7的保守区域为靶序列,利用pSilencer2.1-U6 neo构建shRNA表达载体并转染Marc-145细胞。经实时荧光定量PCR、细胞病变及病毒滴度分析,结果显示,ORF1a-4-shRNA、ORF3-1-shRNA、ORF6-2-shRNA干扰质粒能明显抑制病毒基因的转录,并有效抑制PRRSV在Marc-145上的增殖,显著降低病毒滴度。最后筛选ORF6-2-shRNA表达质粒转染猪胎儿成纤维细胞,构建稳定转染细胞株,为抗PRRSV转基因猪的生产奠定了基础。 相似文献
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采用PCR方法成功克隆了3株鸡贫血病病毒(CAV)广州株VP3和VP1的部分基因,并进行了核苷酸序列测定。序列分析表明,3株CAV广州株与国内外其他21株CAV毒株的核苷酸序列相似性在89.5%~100.0%之间;推导氨基酸序列的相似性在84.8%~98.2%之间。系统发育进化树分析显示,3株CAV广州株和中国TJBD40、SD22、SD24株都同处于一个分支上,而与马来西亚的SMSC-1株、日本的G6株以及澳大利亚的CAU269/7株的亲缘关系较远。 相似文献
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选取华南区域110个代表站点1961~2008年气温资料,对淮河流域的极端温度变化的长期趋势进行了研究探讨。结果表明:1961~2008年,华南地区极端最高气温和高温日数均呈增加趋势,其中华南东南部沿海地区的上升趋势比较明显,尤其以珠江三角地区增加最为迅速,中西部地区上升速率较小;与全球气候变暖一致,华南地区年极端最低气温总体上呈现上升的趋势,≤0和≤5℃的低温日数总体上也呈减少趋势,尤其从20世纪80年代中期以来呈显著减少,并且在空间分布呈纬度地带性规律,华南北部比南部减少快。 相似文献
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