猪附红细胞体病的诊断与防治

为了解猪附红细胞体病的概况,有效控制该病的流行与发展,减少该病对养猪业的危害,笔者通过对猪附红细胞体病的病原体、流行特点、临床症状、诊断与防治等方面进行了系统阐述,目的是让广大兽医工作者深刻了解猪附红细胞体病的特点,以此采取有效措施控制该病的发生与流行,进而促进养猪业的健康发展。     

陕西定边长爪沙鼠的经济损害水平及防治指标研究

通过对陕北靖边县海子梁村荒漠化草原长爪沙鼠的危害状况调查研究,结果表明:平均相对鼠密度645.93有效洞口/hm2,平均经济损失228.69元/hm2,鼠密度与牧草减产量及其经济损失量之间呈正相关关系,R=0.938,有效洞口数(X)与草地植物减产量(M)的线性回归方程为:M=0.836 X-32.10。用溴敌隆进行大面积防治,测得在防治成本42.75元/hm2、防效为73.34%时,防治收益为167.72元/hm2,投入产出比1∶3.92;经济允许损失率8.00%,约为实际损失率(31.42%)的1/4;经济损害水平193.46有效洞口/hm2,最佳防治指标115.00有效洞口/hm2,符合"得失"的防治原则。     

氯氨酮对小白鼠全身麻醉的试验

为筛选较理想的小白鼠全身麻醉药物，选健康成年小白鼠32只，随机分成4组，用氯氨酮进行全身麻醉，观测麻醉前后小白鼠的呼吸变化及其诱导期、麻醉期和苏醒时间．小白鼠腹腔注射氯氨酮1～1．5mg／10g体重，4～8min可平稳进入麻醉状态，麻醉诱导快，小白鼠无呕吐、躁动等现象，呼吸次数变化不明显，可持续20～40min．氯氨酮用于小白鼠的麻醉，安全有效．     

腺病毒穿梭载体介导牛源新孢子虫NcSAG1基因转染293细胞的表达

为了解腺病毒穿梭载体介导NcSAG1基因在293细胞中的表达情况,本试验应用PCR技术扩增牛源新孢子虫NcSAG1基因,构建pMD-18T-NcSAG1克隆质粒和腺病毒重组穿梭质粒pCR259-NcSAG1,将鉴定正确的pCR259-NcSAG1重组质粒转染293细胞,应用免疫荧光试验(IFA)和Western blot技术检测pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中的表达。结果显示:扩增的牛源新孢子虫NcSAG1基因长度为982 bp,与GenBank中发表的NcSAG1(AF132217)核苷酸序列同源性为99%,IFA检测构建的pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中得到瞬时表达,Western blot分析表达蛋白的分子量为33 ku,具有较好的反应原性。本试验为NcSAG1腺病毒载体疫苗的构建奠定了基础。     

猪附红细胞体50S核糖体基因PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank上最新发布的猪附红细胞体基因组序列(NC-015155)设计一对引物,并以吉林省延边地区猪附红细胞体基因组DNA为模板,建立猪附红细胞体50 S核糖体基因PCR诊断方法,通过特异性、敏感性及临床应用试验验证,快速准确的检测出猪附红细胞体.试验结果显示,建立的猪附红细胞体PCR诊断方法扩增片段大小为10...     

牛瑟氏泰勒虫对昆明小白鼠的人工感染试验

瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)病是一种经蜱传播,对牛危害严重,流行较广的血液寄生原虫病,其发生与流行在我国呈明显上升趋势[1]。为了开展对动物体内瑟氏泰勒虫的形态、生理、生化及增殖的研究,揭示其生物学特性,筛选治疗药物,观察疫苗预防效果,提供血清学诊断用抗原,张守发     

犬新孢子虫AMA1基因的生物信息学分析及原核表达载体构建

为了解新孢子虫AMA1基因的生物信息学特性,并构建重组原核表达质粒p GEX-4T-1-Nc AMA1。本试验对牛源犬新孢子虫吉林株AMA1基因进行分子克隆,利用生物信息学软件对该基因进行编码蛋白等电点、信号肽、跨膜区、糖基化位点及疏水性分析,并将该基因片段亚克隆至原核表达载体p GEX-4T-1,构建了重组表达质粒p GEX-4T-1-Nc AMA1。结果显示,克隆的Nc AMA1基因片段长1 695 bp,与GenBank(AB265823.1)上发表的基因序列同源性99.9%;Nc AMA1基因编码蛋白等电点为5.43,在其N端及C端分别存在一个跨膜区,为不溶性蛋白,且Nc AMA1蛋白抗原指数较高,有潜在疫苗研究价值。     

新孢子虫NcGRA2t基因的克隆与生物信息学分析

为研究新孢子虫的血清学诊断方法,参照GenBank中已发表的新孢子虫NcGRA2基因序列设计了1对特异引物,扩增去掉新孢子虫NcGRA2基因N-末端信号肽的基因（NcGRA2t）。根据NcGRA2t蛋白基因序列和推导的氨基酸序列进行同源性和抗原决定簇分析。结果表明,扩增得到的NcGRA2t基因与Nc-1株同源性为100％,与弓形虫的同源性为49％,NcGRA2t氨基酸有很强抗原性。     

几种治疗猪附红细胞体病临床药物的体外筛选试验

为筛选出有效的治疗猪附红细胞体的临床用药,选用感染率在90~以上的阳性血液,通过体外培养的方法,分别用附弓血虫清、原虫净、金诺米先、血呼平、三氮脒对猪附红细胞体进行体外杀灭作用研究。结果表明,血呼平效果最佳,其次是三氮脒、金诺米先,附弓血虫清、原虫净效果不佳。     

犬附红细胞体PCR检测方法的建立及应用

通过将GenBank上报道的犬附红细胞体16S rRNA基因序列与其他物种同源序列进行比对,取其种间特异性和种内保守性较高区域设计1对引物,以吉林省延边地区犬附红细胞体基因组DNA为模板进行PCR扩增,并进行特异性、敏感性试验验证,建立犬附红细胞体PCR诊断方法,应用于临床检测。结果表明:该方法可成功扩增出大小为529 bp的犬附红细胞体片段,与GenBank中German no.1(AY150973.1)序列同源性为98.5%。其最低DNA检测量为25 fg/μL,不与犬巴贝斯虫、犬弓形虫及猪附红细胞体等病原体基因组产生交叉反应。同时通过对57份犬血液样本的检测结果说明,该方法检出率明显高于姬姆萨染色镜检法,且避免了假阳性。本试验所建立的PCR检测方法具有特异、敏感、准确等优点,为犬附红细胞体病的诊断提供了一种可靠的方法。