乌鸡肌胃糜烂病例报告

1995年6月吉林省延边某养殖场饲养的2000多只育成乌鸡群中,有的鸡出现精神沉郁、食欲减退、消瘦、下痢、慢性死亡等现象。经诊断为肌胃糜烂。禽类的肌胃糜烂常发生于肉用鸡和蛋鸡,乌鸡的肌胃糜烂实为少见,现将有关情况报告如下。 1.临床症状:病鸡食欲减退,精神不振,羽毛蓬乱,鸡冠、肉髯苍白,皱缩。嗉囊膨大,腹泻,拉棕色稀便或软便,严重者拉黑褐色稀便。后躯羽毛被粪便污染。少数病鸡步态不稳,喜蹲伏,闭目缩颈,最后消瘦衰竭死亡。个别死鸡倒提双脚时,从口中流出黑褐色或淡绿色液体。病程约7～30天。 2.剖检变化:血液稀薄,呈淡红色,肌肉苍白,干燥,无光泽。少数死鸡嗉囊扩张,内充满黑褐色或淡绿色液     

猪附红细胞体病的病理学观察

用常规病理学方法，对5头患有附红细胞体病的仔猪进行病理解剖学和病理组织学观察，病理解剖学主要变化是血液稀薄，凝固不良，全身皮肤及粘膜，脂肪和脏器黄染，肝，脾肿大，病理组织学主要变化是肝，脾，肾等器官有含铁血黄素沉积和广泛的器官损害。     

虫克星对黑熊消化道寄生虫的驱虫试验

１９９４年１月份和６月份，对延边两家养熊场３８只熊进行消化道寄生虫区系普查，并在此基础上用虫克星和盐酸左咪唑进行了对比驱虫试验。结果，两种药物使犬蛔虫、犬钩虫和类圆线虫的虫卵减少率、转阴率均达到１００％，但虫克星组的排虫时间显著长于盐酸左旋咪唑组。     

牛源犬新孢子虫孕鼠感染模型的建立

为建立牛源犬新孢子虫孕鼠感染模型,深入研究牛源犬新孢子虫对孕鼠的致病作用,本试验以雌性BALB/c小鼠为试验动物,分离Vero细胞中培养的牛源犬新孢子虫速殖子,分不同剂量组腹腔接种雌性BALB/c小鼠后,与雄性BALB/c小鼠合笼,每天观察小鼠临床症状和发病情况,观察主要脏器组织的病理变化,应用PCR方法检测孕鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织及胎盘中犬新孢子虫Nc5基因,并测定孕鼠胎盘湿重和胎盘系数。结果显示,感染模型小鼠的最佳攻虫剂量为10⁵个虫体;感染犬新孢子虫孕鼠先后出现精神不振、共济失调等临床症状,并有不同程度死亡;病理学观察模型小鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织出现充血、出血、肿大等病理变化;在模型小鼠脑、肝脏、脾脏等脏器组织及胎盘中检测到犬新孢子虫Nc5基因;随攻虫天数的增加,模型小鼠胎盘重量和胎鼠重量均不断增加,胎盘系数逐步降低,在第12、14、16天时,模型组与对照组相比,胎盘重量和胎盘系数均差异显著（P < 0.05）。本试验成功建立了牛源犬新孢子虫孕鼠感染模型,为犬新孢子虫致病机制研究奠定了基础。     

放养与圈养对松辽黑猪免疫球蛋白和细胞因子水平的影响

为了研究放养与圈养对松辽黑猪免疫球蛋白和细胞因子水平的影响,试验采集相同日龄的放养和圈养松辽黑猪血液分离血清,利用ELISA方法检测血清中免疫球蛋白IgA、IgE和免疫球蛋白IgG亚类IgG1、IgG2a、IgG2b以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)的含量并进行统计学分析。结果表明:放养松辽黑猪免疫球蛋白IgA、IgE含量均显著高于圈养松辽黑猪(P0.05),免疫球蛋白IgG亚类IgG1、IgG2b含量均极显著高于圈养松辽黑猪(P0.01),IgG2a含量显著高于圈养松辽黑猪(P0.05);放养松辽黑猪细胞因子IL-4和IFN-γ的含量也显著高于圈养松辽黑猪(P0.05)。说明放养松辽黑猪抗病力水平显著高于圈养松辽黑猪。     

犬新孢子虫NC-GFP株在4种细胞中培养的比较

为筛选出犬新孢子虫的最佳培养细胞,本试验对利用非洲绿猴肾细胞(Vero)、人胚肾细胞(HEK-293)、人宫颈癌细胞(HeLa)和小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)培养犬新孢子虫NC-GFP株进行了比较研究,连续培养犬新孢子虫15d,观察Vero细胞、HEK-293细胞、HeLa细胞及SP2/0细胞的形态变化并计数犬新孢子虫的数量,绘制虫体在细胞中生长曲线。结果表明,Vero细胞、HEK-293细胞、HeLa细胞及SP2/0细胞均可培养犬新孢子虫,尤其在HEK-293细胞和Vero细胞中虫体生长较快,分别在接种虫体的第5,6天虫体数量达到最大值;而犬新孢子虫在SP2/0细胞和HeLa细胞中生长缓慢,分别在第7,8天数量达到最大值,数量处于较低水平。综合比较,HEK-293细胞可以短期较快的培养犬新孢子虫,可作为一种新的细胞系培养犬新孢子虫。本试验为体外细胞培养犬新孢子虫提供了科学依据。     

动物传染病学"三段式"实践教学体系的构建

动物传染病学是动物医学专业必修的主干专业课程,传统的实验课教学,主要是验证课堂教学的基本理论和掌握一些基本的实验方法,是一种辅助性教学手段[1,2].     

弓形虫重组GRA3抗原单克隆抗体的制备与鉴定

为了鉴定弓形虫特异性重组GRA3蛋白的抗原表位,以原核表达并纯化的融合蛋白GRA3免疫BALB/c小鼠,利用快速免疫法进行免疫,通过ELISA进行筛选,获得8株能够稳定分泌抗GRA3蛋白特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞。这8株McAbs亚类鉴定均为IgG型,特异性强,ELISA检测结果均为阳性,抗体效价均大于1∶200 000。该结果为进一步探索GRA3蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。所生产的McAb可用于免疫组化和疫苗的制备,并可大大提高诊断的特异性。     

表达牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析

为构建牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒,并分析其免疫原性,PCR扩增牛源犬新孢子虫NcSRS2基因,构建克隆质粒pMD18-T-NcSRS2、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2及表达质粒Transpose-AdNcSRS2,脂质体介导转染QBI-HEK293细胞,包装重组腺病毒Ad5-NcSRS2,PCR检测重组腺病毒NcSRS2基因,IFAT和Western blotting检测NcSRS2基因在QBI-HEK293细胞中的表达,测定病毒滴度后,收集病毒液免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清IgG抗体水平.结果显示,扩增的牛源犬新孢子虫NcSRS2基因大小为1 227 bp,与GenBank中发表的NcSRS2( AF061249)核苷酸序列相似性为99％;重组腺病毒Ad5-NcSRS2在293细胞中包装成功,表达蛋白的相对分子质量为43 ku,具有较好的反应原性;测得重组腺病毒Ad5-NcSRS2滴度为109TCID50·mL-1,间接ELISA检测二免后3周BALB/c小鼠血清中IgG抗体效价达1 ∶ 2 048.本研究成功构建了具有良好免疫原性的重组腺病毒Ad5-NcSRS2,为牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了基础.     

新孢子虫致密颗粒蛋白截短型NcGRA7t的体外表达及免疫活性检测

为构建新孢子虫致密颗粒截短型NcGRA7t基因的原核表达质粒,研究其在体外细胞中的表达情况和免疫活性,运用PCR方法和基因克隆技术,构建了pGEX-4T3-NcGRA7t重组质粒,并在大肠杆菌中进行诱导蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测重组蛋白在体外的表达情况和免疫活性。结果显示:以新孢子虫的cDNA为模板,从新孢子虫Nc-1株扩增出了NcGRA7t基因,并克隆到了表达载体上。本试验成功构建了重组表达质粒pGEX-4T3-NcGRA7t,表达出的NcGRA7t重组蛋白具有免疫活性,为新孢子虫病的流行病学调查和亚单位疫苗的研究奠定了基础。