钙蛋白酶系统研究进展

阐述了钙蛋白酶系统的分类、结构,并且综述钙蛋白酶系统的一般生物学功能及影响因素。     

豫粉1号蛋鸡祖代D系种鸡周产蛋率及其累计产蛋数曲线拟合

以豫粉1号蛋鸡祖代D系20—72周龄种鸡为研究对象,运用伍德模型、分室模型和杨宁模型3种蛋鸡周产蛋率曲线拟合分析模型,对豫粉1号蛋鸡祖代D系种鸡周产蛋率进行拟合分析;运用Logistic、Gompertz和Bertallanffy 3种非线性生长模型,对豫粉1号蛋鸡祖代D系种鸡的累计产蛋数进行拟合分析。结果表明:伍德模型、杨宁模型、分室模型的周产蛋率曲线拟合度(R~2)分别为0. 369、0. 982、0. 978; Logistic模型、Gompertz模型和Bertalanffy模型的累计产蛋数曲线拟合度(R~2)都在0. 98以上。比较周产蛋率及累计产蛋数的预测值与实际值数据发现,杨宁模型和Gompertz模型曲线拟合效果最佳,因此,在生产中可用于对豫粉1号蛋鸡祖代D系种鸡的产蛋规律预测。     

固始鸡快慢羽纯系的选育及自别雌雄效果研究

对固始鸡自然群研究得知，快羽占8．60％，慢羽占91．40％，说明固始鸡的原始种群主要以慢羽为主。其羽型分布结果为：快羽中R1型占68％，R2型占32％；慢羽中，倒长型占58．8％，等长型占16.5％，未长型占24．7％，未出现微长型。依据鸡的快慢羽显隐性关系以及伴性遗传的原理，通过个体选择、测交和纯繁扩群等方法建立了固始鸡快、慢羽纯系。将建立起来的固始鸡快、慢羽纯系进行纯繁，其后代快羽及慢羽比例分别达到了99.5%和99．7％以上。经两系自别配套知，其后代雏鸡羽速自别雌雄的准确率达到了99%以上。     

固始鸡中枢免疫器官细胞和自然凋亡细胞超微结构研究

应用透射电子显微镜技术,对固始鸡17日龄胚胎、4周龄和19周龄固始鸡正常发育的中枢免疫器官超微结构进行了研究。结果表明,固始鸡胚胎胸腺和法氏囊超微结构不同于4周龄和19周龄固始鸡;在中枢免疫器官内免疫细胞存在着自然凋亡现象,主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增生。核质凝集为新月形、C字形、圆环形、花瓣状等多种形态,凋亡细胞裂解为凋亡小体,最后被巨噬细胞吞噬。     

固始鸡免疫器官内细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的动态表达

应用免疫组织化学技术和Leica 显微图像处理系统,对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在固始鸡免疫器官内的动态表达进行了研究。结果：Bax蛋白在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量不同;Bax蛋白表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核;Bax蛋白表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布：脾脏内不同部位均有分布,主要在动脉周围淋巴鞘、红髓、淋巴小结边缘、边缘区,很少出现在淋巴小结内;胸腺内主要分布于胸腺小叶的皮质与髓质交界处,其次是胸腺小叶髓质,极少出现于皮质;法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴滤泡间的区域,在淋巴滤泡边缘的少量淋巴细胞也有Bax蛋白表达,淋巴滤泡内极少有阳性细胞。Bcl-2蛋白在固始鸡免疫器官内的表达与Bax相似,但表达量与Bax相比较少。以上结果表明,细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

HSPB1基因对脂多糖诱导的鸡巨噬细胞炎症反应的调控机制

为了探究热休克因子结合蛋白1(heat shock factor binding protein 1,HSPB1)基因对脂多糖(LPS)诱导的鸡巨噬细胞(HD11细胞)炎症反应的调控机制，试验以不同浓度的LPS刺激HD11细胞不同时间，构建HD11细胞炎症模型，利用HSPB1基因过表达质粒pcDNA3.1-HSPB1瞬时转染HD11细胞后再用最佳浓度的LPS进行刺激，并以仅转染pcDNA3.1和pcDNA3.1-HSPB1的HD11细胞为对照，采用实时荧光定量PCR方法检测转染HSPB1基因过表达质粒pcDNA3.1-HSPB1后对白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和α干扰素(IFN-α)基因表达的影响。结果表明：在LPS浓度为1μg/mL、刺激时间为9 h时炎症因子IL-1β基因相对表达量极显著升高(P<0.01),成功构建出HD11细胞炎症模型；与转染pcDNA3.1质粒相比，转染HSPB1基因过表达质粒pcDNA3.1-HSPB1后能极显著下调IL-6、IL-1β和IFN-α基因的相对表达量(P<0.01);受LPS刺激且仅转染pcDNA3.1...     

鸡MyD88基因对巨噬细胞增殖和凋亡的影响

为探究鸡MyD88基因对巨噬细胞增殖和凋亡的影响，通过构建MyD88基因过表达质粒，以及合成MyD88基因干扰片段，并分别转染至鸡巨噬细胞(HD11)细胞中，采用CCK-8、流式细胞术及qRT-PCR方法检测过表达和干扰MyD88对HD11细胞增殖和凋亡的影响。结果显示，MyD88过表达可显著降低HD11细胞活力(P<0.05),下调促增殖标志基因CCND1和PCNA的表达水平(P<0.05),上调抑增殖标志基因P21的表达水平(P<0.05),减少S期细胞数，阻滞细胞周期进程，增加HD11细胞凋亡率，上调促凋亡基因Caspase 3、Caspase 9和Bax的表达水平(P<0.05)。干扰MyD88可显著提高HD11细胞活力(P<0.05),上调促增殖标志基因的表达水平，降低G1期细胞数，增加S期细胞数，加快细胞周期进程，降低HD11细胞凋亡率。结果表明，MyD88基因能抑制HD11细胞增殖，促进HD11细胞凋亡。     

固始鸡胸肌脂肪酸组成特征及其关键调控基因鉴定

为揭示固始鸡胸肌脂肪酸组成特征及其关键调控基因，试验采用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）技术分析了14、22和30周龄固始鸡胸肌组织的脂肪酸组成，通过权重基因共表达网络分析鉴定了主要脂肪酸含量相关的核心基因。结果显示：三个发育阶段胸肌组织中均检测到49种脂肪酸，且多数脂肪酸含量在不同发育阶段间差异不显著（P>0.05）；胸肌组织中优势脂肪酸为C16∶0、C18∶0、C18∶1N12、C18∶1N9C、C20∶4N6、C18∶1N7、C18∶2N6和C14∶1T，含量占总脂肪酸含量的86%以上。另外，共鉴定到blue、brown、purple、lightyellow、grey60和red共6个特异性转录模块，从中筛选到104个与C14∶0、C16∶0、C17∶0、C18∶1N12、C18∶2N6、C18∶3N6、C20∶1、C20∶2和C20∶3N6等脂肪酸含量相关的核心基因，功能涉及脂肪酸代谢相关的许多生物学过程和信号通路。结果表明，固始鸡胸肌脂肪酸含量在不同生长时期存在动态变化且为微效多基因共同调控的复杂数量性状。     

鸡骨骼肌中天然反义lncRNA VGLL2-AS的鉴定及其与VGLL2的关系研究

旨在探究鸡骨骼肌中VGLL2基因天然反义链转录本VGLL2 AS lncRNA(VGLL2-AS)与VGLL2的关系。本研究首先采用PCR和测序技术验证VGLL2-AS是否存在；之后分别采集不同周龄固始蛋鸡(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄，每个周龄各6只)组织样，采用荧光定量PCR分析VGLL2基因和其反义链转录本VGLL2-AS的表达谱；采用双向转录试验和核酸酶保护试验检测VGLL2和VGLL2-AS是否可以双向转录且两者之间关系；体外分离培养原代成肌细胞(11胚龄固始鸡胚),然后用2μg·mL^-1的放线菌素D处理成肌细胞(对照组不做处理),收取处理不同时间点细胞(0～8 h,每组各个时间点各做3个重复),检测VGLL2-AS与VGLL2的半衰期；分离鸡成肌细胞的细胞核和细胞质，通过RT-qPCR方法确定两者的细胞定位；利用PCR扩增及测序对VGLL2的转录本进行验证；最后利用RT-qPCR检测它们在固始蛋鸡胸肌组织(1日龄、6周龄、16周龄、22周龄、30周龄每个周龄各6只)中的时空表达规律和相关性。结果表明，VGLL2-AS在鸡的转录组中真实存...