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102.
为分析miR-15a在肉鸡不同组织中的表达情况,并探究过表达miR-15a对体外培养鸡软骨细胞的影响。本研究首先通过倒置显微镜观察、PCR、凝胶电泳和甲苯胺蓝染色对体外分离培养的软骨细胞进行鉴定。通过实时荧光定量PCR检测miR-15a在肢体内外翻畸形(valgus-varus deformity, VVD)组和健康组肉鸡中(各3只)各组织的表达量。之后通过CCK8和EDU方法分析软骨细胞过表达miR-15a后细胞增殖情况。软骨细胞转染miR-15a mimics后,通过qPCR检测软骨细胞的标志基因Collagen-2、Aggrecan、Collagen-10,成熟分化基因Runx2、Sox9、VEGF、MMP9,炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β3以及凋亡基因Fas、FasL、Bcl-2的表达量。并构建FKBP5 3'UTR的野生型载体和突变型载体,通过双荧光素酶检测报告检测miR-15a与FKBP5的靶向关系。结果表明,本研究所用的胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶联合消化法成功分离得到状态良好的软骨细胞。荧光定量结果显示,miR-15a在各组织中均有表达,与健康组相比,miR-15a在VVD组的肝(P < 0.01)、脾(P < 0.05)、胸腺(P < 0.01)中的表达量显著升高,在心和胸肌组织中的表达量显著降低(P < 0.01)。CCK8与EDU分析结果显示,与NC组相比,过表达miR-15a组软骨细胞增殖速度显著降低(P < 0.01),增殖细胞数量显著减少(P < 0.01)。qPCR结果显示,与mimics NC组相比,miR-15a mimics组的软骨细胞标志基因Aggrecan、成熟分化基因Sox9、Runx2表达量显著降低(P < 0.05),Fas基因表达量极显著上升(P < 0.01),FasL基因和抗凋亡基因Bcl-2极显著下降(P < 0.01)。成功构建了FKBP5 3'UTR野生型和突变型载体,双荧光素酶检测报告结果显示预测的靶基因FKBP5与miR-15a没有靶向关系。本研究成功分离并鉴定了鸡软骨细胞,过表达miR-15a抑制鸡软骨细胞增殖、成熟和分化并促进细胞凋亡。 相似文献
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近年来,以佳多频振式杀虫灯为代表的灯光诱杀器械,其技术性能得到较大改进和提高.在监测功能的基础上,作为诱杀工具,得到广泛认可,防治森林害虫范围不断扩展,防治面积越来越大,展现出广阔的应用前景. 相似文献
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大力推广生物农药 促进森林病虫害持续控制 总被引:5,自引:1,他引:5
大力推广生物农药,目的是保护森林生态环境,充分发挥森林的经济、生态和社会效益。在森林病虫害防治时,必须进一步提高认识,加强管理,把保护环境、控灾减灾和实现可持续控制的统一性作为选药、施药的出发点和落脚点。在大力推广生物农药的同时,必须减少或限制使用中、高毒化学农药。 相似文献
109.
本文研究花岗岩母质红壤严重水土流失区,植树造林成效与养分因子的关系。用赤桉(Elcalyptus camaldulensis)裸根幼苗造林,基肥用N、P、K和垃圾肥按正交表L_(16)(2~(15))和L_(27)(3~(13))等表设计,多年重复试验结果表明,造林当年肥料对赤桉的高生长效应比对照增高165.8%,其中施垃圾肥和氮肥优于磷肥,肥效都极显著,施钾肥不显著;肥料单施效应不显著,氮肥与垃圾肥或氮肥与磷肥配合具有正的显著相互作用效应。赤桉每株施尿素25g+垃圾肥2.5kg或施N11.5g+P_2O_515g经济效益较佳;氮肥、磷肥和垃圾肥的配比效应方程式,可供花岗岩水土流失区赤桉造林选择较佳的施肥方案作依据。 相似文献
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