一种高效提取棉花细胞核的技术

[目的]研究一种高效提取棉花细胞核的技术,为棉花大片段基因组文库的构建和全基因组测序提供技术。支持。[方法]采用“刀切法”,在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利刀片切割发育1周的棉花黄化子叶以释放细胞核,并经过100、50、和30μm的膜过滤后离心收集细胞核,同时选取棉花幼嫩叶片和黄化处理时间不同的子叶分别用研磨法和刀切法作对照。[结果]刀切法所得细胞核干净完整杂质少,不需要研磨和巯基乙醇等处理,方便快捷无毒害,成功率达100％。[结论]建立了一种简单、高效快捷、无毒害的棉花细胞核提取技术。     

近十年国家自然科学基金资助棉花项目情况分析

文章对近10年（2000-2009）获得国家自然科学基金资助的棉花项目进行了分析,棉花基金项目是以生命科学部立项为主,研究热点为棉铃虫,其他主要是棉纤维、黄萎病、栽培学、遗传学等方面内容,其中棉纤维呈现增加趋势。高等院校是基金项目的承担主体,近年承担项目数量呈增加趋势,而科研单位承担着应用基础研究内容,项目数量无大变化。通过简要评述棉花基础研究的优势和不足,以提高同行对棉花基础研究重要性的认识,提出加强棉花基础研究、提高科技创新能力、培育科研重大成果的期望与基础创新研究的思考。     

子叶期卡那霉素快速鉴定转基因棉花

如何高效快速鉴定外源基因的转化 ,一直是热门的探索主题。特别是对于棉花 ,随着花粉管通道法的广泛应用 ,大批量“注射”种子更需要早期、快速、高效鉴别筛选。卡那霉素抗性是目前农杆菌介导外源基因最为广泛的筛选标记 ,但是在棉花花粉管通道法导入外源基因的检测方面 ,应用不多。含有对卡那霉素抗性基因的转基因棉花 ,应该在个体生长发育的各个时期表现出对卡那霉素的抗性 ,如果在幼苗期 ,特别是在子叶平展期完成转基因抗性的鉴定 ,则不失为一种比较理想的方法。为此 ,设计了一系列实验 ,探索成功子叶期采用卡那霉素对转基因棉花早期快速…     

关于收集棉花自然突变材料的说明(告示)

棉花突变体材料是重要的棉花种质资源 ,在棉花遗传、育种等研究中具有重要的作用。棉花能够自然发生突变 ,但发生频率极低 ,而且常常被忽视而丢失 ,或虽然被注意到了但没有良好的采集方法而难以得到保存。我国是世界上最大的植棉国之一 ,还有大批量的棉花科技实验 ,所以自然突变的潜力很大。系统、全面收集和保存 ,无疑是给国家积累廉价而丰富的棉花资源。在农业部有关部门的指导和资助下 ,我所开始有计划地收集棉花自然突变材料 ,并拟将突变棉株引种到位于海南岛的国家棉花种质圃 ,以便通过多年生方式永久保存自然突变的原始资源。1收集材…     

基于10个棉花腺体相关材料转录组的EST-SSR标记开发

棉花是重要的经济作物,但有毒棉酚的存在,使棉子得不到充分的利用,所以低酚棉育种是棉花育种的重要内容之一。色素腺体是棉酚的储存器官,开发功能型分子标记,加密棉花遗传图谱对色素腺体和其他重要性状相关基因的研究具有重要作用。本试验以10个有腺体和无腺体材料转录组信息为基础开发EST-SSR标记,在12895条1 kb以上的Unigene中共搜索到1546个SSR位点,发生频率和平均距离分别是11.99%和15.99 kb。得到的EST-SSR中,二碱基和三碱基重复是主要的重复类型,分别占30.85%和48.97%,AT/TA和GAA/CTT分别是二碱基和三碱基的优势重复类型。对长度≥20 bp的SSR共设计合成了56对引物,在这10个材料中进行检测,能扩增出清晰条带的有38对,占67.86%,其中呈多态性的有9对,占23.68%,并对其所在的Unigene功能和表达量进行了初步分析。本研究进一步证明了棉花EST-SSR标记开发的可行性,并且为棉花高密度遗传图谱和腺体相关基因的研究奠定了基础。     

棉花DNA主要分析技术及其应用研究

全面地介绍了限制性片段长度多态性、随机扩增多态ＤＮＡ 、扩增片段长度多态性、简单序列重复、序标位、细菌人工染色体和数量性状位点等主要分析技术方法在棉花基因组ＤＮＡ的应用研究的最新进展,并就有关发展动态作了分析和探讨。     

棉花抗黄萎病QTL初步定位

本研究以高抗黄萎病的海岛棉品种海7124和高感黄萎病的陆地棉品种邯郸14组配的F2群体184个株系,构建了一个分子标记遗传连锁图,包括了142个位点和30个连锁群,标记间的平均距离为8.24cM,全长1169.6cM,覆盖棉花总基因组约23.4%。用复合区间作图分析共检测到12个抗黄萎病相关QTL,其中田间抗病性检测到不同时期7个病情指数相关QTL,1个病株率相关QTL,温室苗期抗病性定位4个病株率相关QTL。从绝对量上看,各QTL加性效应从2.20到42.39,显性效应从1.65到32.25,解释表型变异1.09%～22.73%,且田间抗病性获得的QTL与温室苗期抗病性得到的QTL基本相同,其中qFDI711-30-0.01位点距MUSS294仅为0.01cM,加性效应较高解释表型变异22.32%,这对于培育优质抗病材料用于标记辅助育种具有一定的参考价值。     

陆地棉单体和端体细胞学行为与鉴定技术

报道了陆地棉单体和端体的细胞学鉴定时的染色体构型表现及其鉴定技术方法，并就陆地棉花粉母细胞减数分裂研究的取样、染色体制片和两种细胞学材料的传递等进行了讨论。     

转基因棉花早代材料细胞学变异研究

农杆菌介导转基因棉花早代 ( T0 )材料 ,花粉母细胞的染色体构型变异很大 ,只有部分二价体 ( 7～ 1 6个 ) ,多数是单价体 ,没有更高的价体。二价体位于赤道面 ,但多形成染色体桥。单价体多散布在两极。减数分裂后形成 1～ 8个分体的多分体 ,其中四分体虽然比例很高 ,多为畸形。染色体数目的减少、PMC染色体构型变异等 ,是这类材料高度败育的直接原因