秦川牛PDHB基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

[目的]旨在通过构建秦川牛丙酮酸脱氢酶β亚基(Pyruvate dehydrogenase β subunit,PDHB)基因的重组腺病毒载体,为研究PDHB基因在牛前体脂肪细胞分化过程中的功能做准备。[方法]根据牛PDHB基因mRNA序列(GenBank Accession No.NM_001035435)设计引物,克隆该基因的编码区(Coding Sequence, CDS)序列。测序验证后将其重组到穿梭载体pAdTrack-CMV上,经PmeⅠ线性化后,转化到含有pAdEasy-1腺病毒骨架载体的E. coli BJ5183感受态细胞中进行同源重组,以获得重组质粒pAd-PDHB。再将经PacⅠ酶切线性化的pAd-PDHB转染到HEK 293A细胞中,进行病毒包装并扩增高滴度病毒Ad-PDHB,绿色荧光蛋白(GFP)标记法测定病毒滴度。将高浓度的Ad-PDHB病毒感染牛肌内前体脂肪细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PDHB的表达量。[结果]经测序验证,本实验克隆获得的牛PDHB基因CDS与数据库GenBank收录的序列一致。将PDHB基因CDS与穿梭载体pAdTrack-CMV重组并转染HEK 293A细胞后成功获得了重组腺病毒Ad-PDHB,其滴度为1.66×10⁹ PFU.mL^-1。腺病毒Ad-PDHB侵染牛肌内前体脂肪细胞后,PDHB在mRNA的表达水平比对照组高25.5倍。[结论]成功克隆了秦川牛PDHB基因并构建了重组腺病毒质粒pAd-PDHB,并获得能够在牛肌内前体脂肪细胞中过表达PDHB基因的高滴度重组腺病毒Ad-PDHB。     

新疆博尔塔拉蒙古自治州猪棘球蚴病的调查与分析

棘球蚴病（包虫病）是人畜共畜寄生虫病,成虫寄生犬、猫、狼等肉食动物的小肠,绦蚴寄生在人、畜的肝、肺。棘球蚴病严重危害人体健康和畜牧业发展。新疆博尔塔拉蒙古自治州是棘球蚴病危害的重灾区,据《博州动物疫病志》记载：1988年全州猪的平均感染率为23．71％,感染强度肝为1-24个包囊,肺为1-16个包囊;此后再未对本病进行过调查。2011年4-5月,我们再次对本病在州内的感染情况进行了调查,现将结果报告如下。1调查的时间、地点、方法及数量     

故乡二题〔散文〕

关于故乡的一切读小学以前,家里住的院子里,有很多树,都是梧桐;人小,我绕着树走一圈,似乎都很费时。夏天,大雨过后,院子里会冲出很多"结了龟"(蝉的幼虫)来,它们慌慌张张地想重新爬回窝里去,可是笨拙的身体划啊划,终究还是跑不过我尖叫着捉住它们的速度。村子里人说,一个"结了龟"的营养价值,能顶一个鸡蛋,于是一个夏天,我就每天可以吃到很多个能唱歌的     

柴油机过量消耗机油的原因及维护

在工程机械和农用车辆上普遍采用柴油发动机作为动力,但工作中若使用不当,有的车辆仅行驶1～2万km,柴油发动机就开始冒蓝烟,烧机油.这不但使机油消耗增大,而且使活塞环和汽缸磨损加剧,使柴油发动机运转不稳,功率明显下降.出现过量消耗机油的直接原因是机油从活塞和汽缸之间窜入燃烧室.     

肥城桃花粉粒形态观察

【目的】明确肥城桃花粉粒形态特征及品种间的亲缘关系,为确定肥城桃的演化关系提供孢粉学证据。【方法】以肥城桃9个主栽品种及‘中华寿桃’的花粉为试材,采用HITACHIE-1010型扫描电镜观察花粉的形态结构。【结果】供试品种花粉粒极轴长介于31.22~34.87μm,花粉均为近扁球形,等极,辐射对称,极面为三角形,三边略成弧形,赤面均为椭圆形,肥城桃花粉属N3P4C5类型,花粉外壁纹饰均为杂乱走向的条纹状纹饰,条纹间有穿孔,为复合纹饰,各品种间纹饰的形态存在差异。聚类分析结果显示,肥城桃与‘中华寿桃’亲缘关系较远,主栽肥城桃品种‘红里肥桃’‘白里肥桃’为一类,其余肥城桃为另一类。【结论】主栽肥城桃品种演化顺序符合花粉由大到小、表面纹饰及覆盖层穿孔由简单向复杂的一般演化规律,推测供试品种的演化顺序为:‘白里肥桃’最为原始,其次为‘红里肥桃’,其他品种为群体内较为进化的类型,其中‘肥桃2号’‘肥桃3号’‘柳叶肥桃’3个品种亲缘关系较近,‘早熟肥桃’和‘刘台肥桃1号’亲缘关系较近。     

基于GIS和地统计学的土壤养分时空变异分析

运用ArcGIS的地统计学和空间分析模块,研究了封丘县20年前后土壤表层有机质、全氮、碱解氮、速效磷和速效钾5种养分的含量水平、分布以及演变趋势。研究结果表明,封丘县土壤有机质含量明显上升,氮素有所积累;磷素有升有降,以升为主;但速效钾含量急剧下降,这些变化与封丘县长期以来的肥料施用和土地利用有关。运用地理信息系统和地统计学方法能够很好地模拟土壤养分的空间分布特征,便于研究者直观地发现土壤养分时空变化趋势。     

晚秋叶面喷肥对设施杏发育前期的影响

晚秋叶面喷肥增加树体的营养积累是非常有效的办法,充足的营养供给是保证果实细胞分裂的重要条件,也为果实增大奠定了基础。晚秋叶面施氮肥影响了设施杏树花前枝条内的激素含量变化,ABA和GA在杏树的解除休眠过程中起着重要的作用,3%、5%尿素对枝条内激素的影响更有利于解除休眠和芽的生长发育。不同的尿素浓度都影响了树体枝条内花前激素的含量,显著增加了前期的新稍生长量,对果实的纵横径也有不同程度的影响。3%左右的尿素浓度更适宜于在设施内杏树晚秋追肥中应用。     

锦园、锦花黄桃的引种表现及栽培技术要点

2012年从上海市农业科学院林木果树研究所引进锦园、锦花两个黄桃品种苗木至泰安试栽。经多年栽培观察,两个品种树体健壮,果肉黄色,汁液多,口感甜,综合品质优良,经济价值高,适于泰安及周边地区推广,简述了栽培技术要点。     

杂交水稻机械化制种及效益分析

随着科技的发展,机械化已经慢慢走进了千家万户。在杂交水稻制种方面,泰宁县下渠乡近年来借助机械化的培育,已经取得了很好的成绩。该文对下渠乡杂交水稻制种高产优质高效技术的应用进行了介绍和探讨,同时介绍杂交水稻机械化制种技术的现状,以实现杂交水稻经济效益更大化,为未来的经济发展带来更好的帮助,同时也对未来杂交水稻制种技术带来更加完善的方法和对策。     

响应面法优化香菇液体发酵条件

在香菇液态发酵单因素试验基础上,通过响应面法对发酵条件进行优化试验,依据Box-Benhnken(BBD)设计预测发酵的最佳条件为:接种量12.42%、pH值4.96、培养温度24.11℃。在转速为160 r/min条件下按照最佳条件培养,菌丝生物量实测值为17.76 g/L,与理论值17.58 g/L相差1.02%。