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猪圆环病毒II型ORF4真核表达载体构建及其抗体制备 总被引:1,自引:1,他引:0
为构建猪圆环病毒II型(PCV2) ORF4基因的真核表达载体,并制备ORF4抗体。用PCR方法扩增PCV2 ORF4基因,将其克隆入真核表达载体pCDNA3.1(+)或pEGFP-C1,成功构建出重组质粒pCDNA-ORF4、pEGFP-ORF4。重组质粒pEGFP-ORF4转染PK15细胞后,pEGFP-ORF4蛋白在细胞中明显表达,荧光信号主要定位于细胞核内。重组质粒pCDNA-ORF4接种BALB/c小鼠后,接种小鼠血清能与PCV2发生特异性免疫反应,经4次接种后抗体效价均达到1:26以上,表明诱导产生了PCV2 ORF4抗体。研究结果表明,构建了2种PCV2 ORF4真核表达载体,并制备了PCV2 ORF4抗体,为PCV2 ORF4基因功能研究奠定了基础。 相似文献
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摘要:【目的】从天津地区分离和克隆出1株PCV1,并进行基因组序列分析。【方法】参照GenBank上猪圆环病毒1型(PCV1)全基因组序列设计1对引物,用PCR技术从天津一猪场的临床发病猪病变组织中扩增和克隆获得1株PCV1全基因组序列,并进行序列测定和分析。【结果】全基因组序列结果显示,该株PCV1基因组全长1759 bp,与国内外其他各株PCV1的核苷酸同源性达98.2%以上。主要开放阅读框(ORF)序列结果显示,该分离株与国内外其他PCV1毒株间的ORF1与ORF2的核苷酸同源性分别为97.5%~99.8%和92.7%~99.9%。【结论】虽然各个PCV1分离株之间的全基因组与主要ORF的核苷酸同源性均很高,但还是呈现出一定的地域相关性。 相似文献
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[目的]对猪群伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染的快速检测方法进行比较.[方法]采集肥育猪的血清和扁桃体,用ELISA方法检测血清中PRV-gE蛋白抗体,用常规PCR方法和荧光定量PCR方法检测血清与扁桃体中的PRV-gE基因,比较分析猪群PRV野毒感染情况.[结果]结果显示,荧光定量PCR方法对血清与扁桃体中的PRV-gE基因的检出率均高于常规PCR方法,gE基因在扁桃体中的检出率高于血清,而gE蛋白抗体检出率高于gE基因检出率.[结论]PRV-gE蛋白抗体检测敏感性高于gE基因检测,荧光定量PCR对gE基因的检测敏感性高于常规PCR,gE基因在扁桃体中的检测敏感性高于血清,为猪群PRV野毒感染快速检测方法的选用提供了试验依据. 相似文献
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猪GM-CSF荧光定量PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
根据GenBank中猪粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因序列设计一对引物,用RT—PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增出296bpcDNA片段,并克隆到pGEM—TEasy载体中。经测序鉴定后,构建出含猪GM—CSFcDNA部分片段的重组质粒。通过重组质粒的Real—timePCR方法,建立了猪GM-CSFcDNA的Real—timePCR标准曲线及其直线回归方程。该方法重复性好,敏感性高、特异性强,可用于猪GM—CSFmRNA水平的定量检测。 相似文献
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为了分析环山集团近2年来某核心育种场猪体型评分性状与其他生产性状之间的相关性,笔者利用R软件评估了总体评分与各部位评分以及与繁殖性状的表型相关,又利用DMU软件和动物模型估计了体型评分性状与达100 kg体重日龄和背膘厚之间的表型与遗传相关。结果表明:总体评分与四肢、生殖器官和中躯表型相关较大,分别达到0.597,0.481和0.432;与总产仔数和产活仔数表型相关接近于0,分别达到0.041和0.034;此外,体型评分与达100 kg体重日龄和背膘厚表型相关也接近于0,而遗传相关分别达到-0.16和0.05。说明体型评分还需要进一步优化,在父系和母系中应选择性应用。 相似文献
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天津白母猪性发育过程中生殖激素变化规律 总被引:2,自引:0,他引:2
测定了 6头天津白母猪从出生至 7月龄之间血清中 4种生殖激素浓度变化规律。结果表明出生时血清促黄体素 (LH)和雌二醇 (E2 )浓度很高 ,之后迅速下降 (P<0 .0 5 )并保持较低水平 ,促卵泡素 (FSH)在短时期内有一定上升 ;2 .5~ 3月龄之间血清 L H、FSH和 E2 浓度均相对较高 ,随后都下降并稳定在较低水平上 ;6月龄以后 ,L H、FSH、E2 浓度都出现上升 ,其中 6.2 5月龄时的 E2 浓度显著高于 6月龄且个体差异很大 ;5~6.5月龄之间的血清孕酮 (P4 )浓度低于 1μg.L-1,6.75月龄时的 P4 浓度显著升高 (P<0 .0 5 )且个体差异很大。根据生殖激素水平变化可推断出天津白母猪大致在 6.2 5~ 6.75月龄之间达到初情期 相似文献
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猪圆环病毒3型是近年来发现的又一种致病性猪圆环病毒,已在不少地区存在。为了了解猪圆环病毒3型在一些地区的流行情况,用PCR方法检测了湖南省与京津冀地区523头断奶仔猪血清样品中的病毒核酸。结果显示,猪圆环病毒3型核酸的猪场阳性率为68.75%,个体阳性率为31.74%,整体存在极显著(P<0.01)差异。进一步分析发现,病毒核酸阳性率超过20%的猪场达到50%,超过70%的猪场占18.75%,为0%的猪场占31.25%。调查结果表明,猪圆环病毒3型感染在我国一些地区广泛存在,但在不同猪场的感染率差异很大。 相似文献
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选取国内商业PCV2疫苗A和B,在一个大型猪场进行小型田间试验.将36头母猪随机平均分成3组,每组母猪所产仔猪在14日龄分别接种疫苗A(A组)、 疫苗B(B组)、 生理盐水(C组,对照).采集免疫后不同时间的仔猪血清,检测PCV2抗体,比较各组的发病率、 死亡率与增重.结果显示,接种疫苗组与对照组的仔猪发病率与死亡率都低、 且无差异;但接种PCV2疫苗的两组都显著(P<0.05)提高了增重,并改善了血清中PCV2抗体变化趋势.另外,A组的临床数据稍优于B组.检测结果表明,仔猪免疫PCV2疫苗的临床效果明显优于未免疫组,PCV2疫苗A的临床免疫效果稍好于疫苗B,为试验猪场今后进行PCV2疫苗免疫提供了实验依据. 相似文献
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