嵌合猪圆环病毒的构建

[目的]为了构建猪圆环病毒1型(PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)的嵌合病毒,并为PCV2疫苗研究奠定基础.[方法]以PCV1基因组为骨架,将其衣壳基因替换为PCV2衣壳基因,来构建嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)DNA克隆,将PCV1-2 DNA克隆转染PK-15细胞以获得拯救病毒PCV1-2,并测定PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性.[结果]酶切和序列测定显示成功构建出PCV1-2 DNA克隆;免疫荧光试验和PCR检测显示成功获得拯救病毒PCV1-2,其效价达到1060 TCIDs0/mL以上;一步生长曲线显示PCV1-2在PK-15细胞中的增殖特性与其亲本病毒近似.[结论]成功构建了1种具有较高体外增殖能力的嵌合猪圆环病毒.     

基于高效液相色谱法的苦参指纹图谱研究

【目的】旨在建立苦参高效液相色谱指纹图谱。【方法】采用Waters Atlantis?T3色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5.0μm),流动相为0.01 mol/L乙酸铵(0.045%浓氨水)和乙腈,流速1.0 mL/min,梯度洗脱,色谱柱温度30℃,检测波长225 nm。检测12批苦参样品,建立指纹图谱,进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。【结果】建立了苦参的高效液相色谱指纹图谱,苦参样品的相似度在0.940～0.998之间,共标定出23个共有峰,并通过标准品确认了其中5个,分别为氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、苦参碱和槐果碱。聚类分析将12批苦参样品分为4类,主成分分析后23个共有峰缩减为4个主成分。【结论】该方法快速可靠,稳定性和重复性好,可用于苦参的质量控制。     

嵌合猪圆环病毒对仔猪的免疫保护研究

为分析嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)对仔猪的免疫效力,检测了PCV1-2免疫诱导仔猪产生抗猪圆环病毒II型(PCV2)感染的保护性免疫。将10头28日龄健康普通仔猪随机平均分成两组,一组肌注免疫106.05TCID50 PCV1-2作为免疫组;另一组不予免疫作为对照。到免疫后28天,免疫组仔猪血清中PCV2 ORF2蛋白抗体全部转为阳性。在免疫后28天,所有仔猪经口鼻予以106.95TCID50 PCV2攻击。攻毒后,免疫组仔猪全部保持临床健康,而对照组仔猪全部出现了PCV2疾病的临床症状;免疫组血清和淋巴组织中PCV2 DNA载量均显著(P<0.05)减少;对照组仔猪淋巴组织普遍出现中度到重度的淋巴细胞减少与组织细胞浸润,而免疫组没有。研究数据表明：PCV1-2免疫诱发了仔猪对PCV2感染的保护性免疫,有望成为候选PCV2弱毒疫苗。     

PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞Fc受体数量和吞噬功能的影响

将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时间宰杀,收集肺泡巨噬细胞(PAM),同时设立对照组。用EA花环试验测定Fc受体数目,用吞噬鸡红细胞试验测定吞噬功能,来分析PCV2感染对PAM某些生物学活性的影响。结果显示,PAM表面Fc受体数和吞噬鸡红细胞数的变化规律一致,与对照组相比,两者数量在接种后3 d时下降至最低,之后回升,14 d时基本恢复正常。本研究表明,PCV2感染可引起PAM吞噬和清除病原的能力出现短暂下降。     

猪圆环病毒2型感染不会诱发猪肺泡巨噬细胞凋亡

将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时相宰杀,收集肺泡巨噬细胞,用流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测其凋亡现象,分析PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞凋亡的影响。结果显示,在整个试验期内,与对照组相比,两种方法均未检测到攻毒组肺泡巨噬细胞出现凋亡上升现象,表明PCV2感染不会诱发猪肺泡巨噬细胞凋亡。     

DFC2光电式数字日照计的使用和日常维护

中国气象局贯彻落实全面实现气象现代化和全面深化气象改革的决策部署,自地面气象观测自动化改革方案的实施以来,以新发展理念为指导,通过全面深化气象改革和大力实施创新驱动,积极开展地面气象观测自动化改革试点和评估,推进地面气象观测全面实现自动化。DFC2光电式数字日照计作为一种智能化的日照监测设备,具备稳定性强、测量精度高等特性,在各国家级气象台站装备,随着地面气象观测自动化改革深入,装备保障、设备运维对业务人员的能力要求日益提高。本文简单阐述该型仪器的测量原理、安装、校准及日常运维方法,提供合理的保障维护方法及处理。     

猪圆环病毒3型7个ORFs不能诱导PK-15细胞凋亡

【目的】为了探明猪圆环病毒3型的致病机制。【方法】用PCR技术扩增PCV3的ORF1-ORF7基因片段并克隆到pEGFP-C1载体,构建7个真核表达质粒后分别转染PK-15细胞,在转染后不同时间观察细胞中荧光表达情况,并检测Caspase-3活性变化。【结果】7个真核表达质粒转染PK-15细胞后均可观察到荧光,表明PCV3的ORF1-ORF7基因均可在PK-15细胞中获得表达,但在表达丰度方面存在差异。与单独的PK-15细胞和pEGFP-C1载体转染的PK-15细胞相比,7个真核表达质粒转染PK-15细胞后都未出现Caspase-3活性的显著(P0.05)变化,表明均未引起PK-15细胞发生凋亡。【结论】PCV3的ORF1-ORF7基因均无诱导PK-15细胞发生凋亡的作用。     

天津白公猪性发育过程中促黄体素和睾酮变化规律

用放免法测定了6头天津白公猪从出生到7月龄之间外周血清中促黄体素(LH)和睾酮(T)浓度的变化规律。结果显示,LH和T浓度变化规律基本一致。LH和T均从出生后便开始快速上升(P<0.05),并均在0.5月龄达到首次高峰后便下降。LH浓度在3~4.5月龄之间相对较高(P<0.05),并于4月龄时达到峰值,之后出现一定程度下降并保持相对稳定。T浓度在1.5~3月龄之间维持在极低水平,3.5~4月龄之间有一定程度的上升但不显著;随后急剧上升,4.5月龄时T浓度极显著升高(P<0.01);之后呈现逐渐的、不显著的上升,但7月龄时T浓度显著高于4.5月龄值。结果表明,天津白公猪的LH和T两激素的分泌范型在5~7月龄之间逐渐成熟。     

一例保育猪伪狂犬病暴发后的早期诊断与快速防控措施

猪伪狂犬病是由疱疹病毒（DNA病毒）感染所导致以仔猪出现共济失调、后驱瘫痪、抽搐,妊娠母猪流产、木乃伊胎等为特征的重要猪传染病之一。
　　自2012年初起,我国北方多个省份（河南、河北、山东等）规模化猪场先后暴发了伪狂犬病[1]。而在此之前,很多规模化场都已经取得了猪伪狂犬病净化（gE抗体阴性）,故本次猪伪狂犬病大流行发病急、损失大,众多猪伪狂犬病阴性的规模化猪场再次转为阳性。     

排毒逐瘀散对高致病性猪蓝耳病的防治效果观察

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪的一种病毒性传染病,俗称"猪蓝耳病".其病原猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)很容易变异,可导致其毒力增强并引起新的流行与发病.已有研究表明,化学药物对防治高致病性猪蓝耳病没有明显效果,而中兽药对该病的实际效果已得到了专家们的肯定.因此,寻求新型高效中兽药来防治高致病性猪蓝耳病具有重要的实际意义.为了更好地防治本病,尽量减少损失,